硫堇染色液的用途及操作步骤？

硫堇染色液(1%)是一种用于染色体染色的试剂，适用于口腔黏膜、尿液、羊水、绒毛细胞以及人工培养细胞等样本。它特别适用于性染色质的染色，并可用于肥大细胞的染色。该试剂仅供科研使用，不得用于临床。

如何操作

样本处理

1、口腔黏膜细胞：

a、用PBS或生理盐水漱洗口腔数次，尽量去除口腔内细菌和其他杂物。

b、操作人员一手拉住患者的下唇，一手用压舌板或牙签钝头端刮取两侧颊部或下唇内侧的粘液，丢弃第一次刮取的细胞。

c、同一部位连续刮取数次，将刮取物涮入装有5ml生理盐水的离心管中。

d、离心，弃上清液，留取细胞团。

e、加入新鲜固定液轻轻混匀制成悬液室温放置。

f、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

2、尿液中脱落细胞：

a、取患者干净的中段尿液，混匀，吸取至离心管中。

b、离心，弃上清液，留取细胞团。

c、根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。

d、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

3、羊水细胞：

a、按妇科常规经腹壁穿刺妊娠16周左右孕妇的羊水至离心管中，抽取羊水时先抽取丢弃，以免母体细胞的污染。

b、离心，弃上清液，留取细胞团。

c、加入新鲜固定液，轻轻混匀制成悬液，室温放置。

d、离心，弃上清液，留取细胞团。

e、根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。

f、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

染色质染色

a、玻片标本置于HCl中，37℃孵育。

b、蒸馏水充分冲洗，自然干燥。

c、将玻片样本浸入硫堇染色液(0.4%)染色。

d、蒸馏水冲洗，自然干燥。

e、在低倍镜下查找均匀分散的细胞群，转油镜认真观察。

染色结果

异染性物质呈紫红色，其他呈蓝色。

注意事项

1、涂片厚薄适宜，固定后方可染色。

2、所加硫堇染色液(1%)以覆盖涂片为宜，不能过少，以免蒸发而染料沉淀。

3、冬季染色时，如环境温度较低时，苏木素、橙黄、伊红的染色时间可适当延长。

4、固定液应定期更换，以免固定不充分导致着色不佳。

5、染色液应定期更换，以免影响染色效果。

主要参考资料

[1] 硫堇染色液(1%)说明书