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王经理
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王经理
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2026-02-06回答
提升试剂与样本质量,保障反应稳定性
试剂平衡与保存
所有试剂(包括标准品、检测抗体、洗涤液)使用前需在室温(18–25℃)平衡30分钟,避免冷凝影响反应均一性;
显色液现配现用,禁止将剩余TMB倒回原瓶,防止污染或降解;
避免使用含叠氮钠(NaN)的试剂,因其会抑制HRP酶活性。
标准品配制优化
冻干标准品需充分溶解,反复颠倒或轻弹管壁,避免残留;
每次实验现配标准曲线,不重复使用已稀释的标准品溶液,确保浓度准确;
推荐使用8个以上浓度点,采用四参数逻辑拟合(4PL)模型提高曲线拟合精度。
样本处理标准化
血清/血浆样本避免溶血或脂血,采集后尽快离心(3000 rpm,10–15 min),取上清检测;
组织匀浆使用预冷PBS冲洗去血,按1:9(w/v)比例研磨,离心后取上清;
所有样本分装保存于-80℃,避免反复冻融导致蛋白降解;
冻融样本检测前需充分混匀,防止局部浓缩。
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