细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?
答:不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++,Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH8.0,温度37oC其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。通常使用的消化液浓度为:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶
多数细胞传代消化可使用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。