胆碱酯酶的作用及组成？

胆碱酯酶是一种特异性酯酶，可分为两大类：乙酰胆碱酯酶（AChE）和胆碱酯酶（PsChE）。AChE主要存在于神经元的胞质内和神经与肌肉接头处，起到生理调节作用；PsChE主要存在于血浆、胰腺和唾液腺内，其生理功能尚不明确。乙酰胆碱酯酶的染色方法有多种，如Koell法、Snell和Garrett法、Karnovsky和Roots法等。

如何使用乙酰胆碱酯酶染色液

1、将切片冰冻至厚度为6μm，然后进行10%甲醛钙固定或不固定。

2、用蒸馏水洗涤。

3、配制AChE孵育液，将A2加入A1中溶解，形成A12混合液，保存在4℃。然后将适量的A12混合液、A3、A4、A5、A6按比例混合，得到AChE孵育液，需在6小时内使用。如果只需显示AChE和ChE而无需区分两者，无需加入Iso-OMPA。

4、将切片放入预温的乙酰胆碱酯酶染色液中，避光孵育，直到切片呈淡棕色。

5、用蒸馏水洗涤，观察活性部位是否仍较淡，如需要可再次孵育。

6、用流水冲洗5分钟。

7、滴加Leagene苏木素染色液浅染细胞核。

8、再次用流水冲洗。

9、进行常规脱水、透明处理，最后用中性树胶封固。

使用乙酰胆碱酯酶染色液的注意事项

乙酰胆碱酯酶染色液适用于冰冻切片，同时应尽量减少切片在室温下的暴露时间。

参考资料：

[1]乙酰胆碱酯酶染色液(亚铁氰化铜法)操作说明