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石墨烯量子点:一个具有广阔应用前景的新材料? 1个回答.14人已关注
随着科技的进步,越来越多的新材料被发现和应用于各个领域。石墨烯量子点是其中一个新兴领域,它指的是直径小于10纳米的石墨烯片段,具有...
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八坂夏萍 ,暂无简介 2023-07-18回答

随着科技的进步,越来越多的新材料被发现和应用于各个领域。石墨烯量子点是其中一个新兴领域,它指的是直径小于10纳米的石墨烯片段,具有独特的电子结构和光学性质。

石墨烯量子点具有高表面积、良好的导电性和透明性,同时也具备出色的光电性能,这使得它在能源、电子学、生物医学和环境保护等领域具有广泛的应用前景。

制备石墨烯量子点的方法有多种,包括机械剥离法、化学还原法、电化学法和等离子体法等。化学还原法是最常见的制备方法之一,通过将氧化石墨烯还原来制备石墨烯量子点。此外,通过控制其大小、形状、表面修饰和杂化等方法,可以调控石墨烯量子点的性质。

在能源领域,石墨烯量子点可以作为新型太阳能电池的光电转换材料,提高太阳能电池的光电转换率和稳定性,从而提高能量转化效率。此外,石墨烯量子点还可以应用于储能材料、催化剂和光催化剂等领域,具有良好的应用前景。

在电子学领域,石墨烯量子点可以作为新型半导体材料,制备高性能的场效应晶体管、光电传感器和光电器件等。此外,石墨烯量子点的荧光性质也可以应用于显示器、荧光标记和生物成像等领域。

在生物医学领域,石墨烯量子点具有良好的生物相容性和荧光性质,可以应用于生物成像、药物传输和癌症治疗等领域。此外,石墨烯量子点还可以应用于生物传感、生物检测和基因测序等领域。

在环境保护领域,石墨烯量子点可以作为新型催化剂和吸附材料,应用于废水处理、空气净化和有害气体去除等领域。此外,石墨烯量子点还可以应用于土壤修复和污染监测等领域。

综上所述,石墨烯量子点是一种具有广泛应用前景的新材料,在能源、电子学、生物医学和环境保护等领域都有良好的应用前景。随着石墨烯量子点制备技术的不断改进和完善,相信它将在更多领域得到应用,并为人类的生活和社会发展带来更多福祉。

如何制备4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺? 1个回答.18人已关注
4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺是一种有机中间体,可以通过两步反应从丙烯腈和二乙二醇制备而成。 制备步骤 第一步 首先,在带有搅拌棒的1L...
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atlr1434 ,暂无简介 2021-10-13回答

4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺是一种有机中间体,可以通过两步反应从丙烯腈和二乙二醇制备而成。

制备步骤

第一步

首先,在带有搅拌棒的1L三颈烧瓶中加入121g(1当量)的三(羟基甲基)氨基甲烷、84ml的50%氢氧化钾水溶液和423ml的甲苯,然后搅拌混合物。将反应系统放入水浴中,保持在20-25℃的温度下,在两个小时内滴加397.5g(7.5当量)的丙烯腈。添加后,继续搅拌混合物1.5小时。然后,加入540ml的甲苯到反应系统中,将反应混合物转移到分液漏斗中,去除含水层。将有机层经过硫酸镁干燥后,通过C盐过滤,并在减压下蒸馏去除溶剂,得到丙烯腈加合物。通过对获得的物质进行1H-NMR和MS分析,确认其与已知产品相符,因此可以直接用于后续的还原反应,无需进一步纯化。

第二步

将24g的丙烯腈加合物、48g的Ni催化剂和600ml的25%氨水溶液(水:甲醇=1:1)放入1L加压釜中,混合悬浮,并密封反应容器。向反应容器中通入10MPa的氢气,在25℃的反应温度下反应16小时。

通过1H-NMR确认起始原料的消失,通过C盐过滤反应混合物,并用甲醇洗涤C盐若干次。然后在减压下将溶剂从滤液中蒸馏出,得到多胺化合物。获得的物质可以直接用于后续反应,无需进一步纯化。

应用领域

一项研究报道了一种制备水溶性季铵阳离子荧光碳点的方法,该方法利用4,7,10-三氧-1,13-十三烷二胺作为原料之一。这种水溶性季铵阳离子荧光碳点的制备方法具有简单、高产率、低成本等优点,适合规模化生产和推广应用。

参考文献

[1] [中国发明] CN201310378521.6 图像形成装置和图像形成方法

[2] CN201710430015.5一种水溶性季铵阳离子荧光碳点的制备方法

请问细胞免疫荧光双标的共定位度怎么计算呢? 1个回答.7人已关注
今天找到以前做这方面的笔记,是我3年前用IPP软件分析免疫荧光双标/三标的操作过程,不过间隔时间太久了,毕业后就一直没用过这个软件,所...
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岁月与世界 ,设备维修 2019-03-10回答
今天找到以前做这方面的笔记,是我3年前用IPP软件分析免疫荧光双标/三标的操作过程,不过间隔时间太久了,毕业后就一直没用过这个软件,所以自己的操作看上去都很生疏,如有感兴趣的占有,可以按照这个操作,对着软件再去摸索一下,估计很快就会上手,也希望自己贡献的这点材料,对有需要的战友有帮助。
操作过程:
1:打开原始图,在SET navigator 中点extract,分出第一张图(green),选中green的图,在edit convert to gray 8(因为有些处理只认识8位),save为green extract and convert to gray 8。同样在set navigator中改参数为start2 ,current2 ,点extract,分离出第二张图(red),在edit convert to gray 8。save为red extract and convert to gray 82:打开green extract and convert to gray 8,点process 中filter的对话框中选 median3*3( 取平均),apply,save为 green filter median 3*3,对红图做同样处理。3:在morpholigical中选tophat,下面有3*3,5*5,和7*7,选中任何一个,点右上角的图可以看原图和处理后的图的差别,选一个合适的,我选5*5, apply。Save green tophat5*5。对红图做同样处理。4,打开green tophat5*5,点measure,点count size,对话框中选manual,点select range,自动出现一个range,若为0-49 ,则我们该为49-255。因为我们要的是亮的点。选好后点close回到count size的对话框,点option选4-connect(一种算法,两个图象有一点相连算两个图象,而8-connect指两个图象有一点相连算两个图象)fill hole(中间荧光的亮度比边上低的图象也算一个)。点count,在measure,select measurement中选area。点count,在measure中选auto-classification, max classes 2, 点ok,在classificaiton的view中选mean SD。这样我们就把area的下限定在小的那群的mean area+3SD(即排除小的那群),若小的那群mean area+3SD> 大的那群的mean,可以直接去小的那群的mean当area的下限。点delete去除之前的count,在measure中选select measurement点area,用刚才的计算好的下限重新count。选count/size,image中make mask,在edit中选watershed split。Save 为04 green (count_size_49_255_area_0.0966_watershed),对红图做同样处理。5,打开04green,和green filter median 3*3,在process中选operation,选and,image。这样得到原始图density的数值。在count size中同四处理,在count size的时候不要选measure objects,选了有时不显示count的数值只是这次一density为指标做筛选。Save 为06green(count_size_average_density_75), 对红图做同样处理6,打开处理后的两张图,process中选择color composition,与原图比较,看处理的对不对。7,打开处理后的两张图,在process中选者restricted dilation ,seed image 选06 green (count_size_average_density_75).tif,mask image 选06 red (count_size_average_density_72).tif Interation 选255(只要部分共定位,通过反复的覆盖,全选中),4-connect。Mask threshold 没关系。 restricted dilation是指red 中与种子一样的选中,即共定位的点。8 用count的方法数出共定位的点。分别数红色和绿色的点,可以算ratio9 AOI可以选一个图像的一部份作分析
2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸的研究有哪些应用领域? 1个回答.9人已关注
研究背景 2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸又名舒尼替尼中间体,分子式为C 8 H 9 NO 3 ,分子量为167.16,常温常压下表现为米白色固体,...
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Hug ,销售 2024-08-19回答

研究背景

2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸又名舒尼替尼中间体,分子式为C8H9NO3,分子量为167.16,常温常压下表现为米白色固体,微溶于水。有研究表明,2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸与2,3-二氨基吩嗪反应产物对NH2-MIL-101(Al)材料进行后修饰制备得到的1-MOF材料,可用于有机染料亚甲基蓝(MB)的吸附,最大吸附量高达146.82mg/g,对共存的离子具有抗干扰性,循环5次后依然具有高于80%的去除率,可以解决传统NH2-MIL-101(Al)材料可循环性能差,难以高效吸附的问题。

2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸.jpg

应用领域

药物合成

苹果酸舒尼替尼是由美国辉瑞公司研发的多靶点激酶抑制剂的抗肿瘤药物,具有抗血管生成和抑制肿瘤细胞增殖作用,主要用于晚期肾细胞癌的治疗。2006年获FDA批准上市,由于所获批适应症竞争少,以及靶向治疗疗效显著,当年销售额2.19亿美元,此后销售额屡创新高。由于苹果酸舒尼替尼的市场需求量大,治疗效果显著,所以,对苹果酸舒尼替尼的合成及提纯工艺进行详细研究是很有必要的.

荧光探针

SO2作为一种重要的气体信号分子,其浓度异常与癌症,心血管疾病,神经系统疾病有关,因此有必要发展一种检测SO2的分析方法。有关研究以1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚和碘甲烷为原料合成中间体2;2与2,4-二甲基-5-醛基-1H-吡咯-3-羧酸经缩合反应合成了一个基于苯并吲哚和吡咯共轭的荧光增强型探针(3)。研究发现,探针3可以定量检测外源性SO2,并且对SO2具有良好的选择性,对其他阴离子和生物硫醇不响应或响应水平低。用350 nm激发,探针3在450 nm处的荧光强度随SO2的浓度增加而增强。当SO2浓度为0~100 μmol·L-1时,荧光强度与其呈良好的线性关系,相关系数R2为0.997.

参考文献

[1]师艺颖,舒燕,段中余.基于吩嗪基团修饰的Al-MOF材料吸附亚甲基蓝[J].化工新型材料, 2024(6).

[2]邱士泽.抗肿瘤药物苹果酸舒尼替尼的合成及提纯工艺改进[D].河北师范大学,2016.

[3]吕爱锋,赵明礼,陈明,等.苹果酸舒尼替尼的制备方法:CN201310729201.0[P].CN104744442A.

[4]何艳阳,付丁强,杨黎,等.一种选择性检测SO2的荧光增强型探针的合成[J].合成化学, 2017, 25(7):5.DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.1005-1511.2017.07.17006.

蛋白酶K:一种广泛应用于核酸提取的高活性蛋白酶? 1个回答.5人已关注
蛋白酶K是一种与枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,源自Tritirachium album Limber。它以其降解角蛋白的能力而得名,并且在变性尿素或十...
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云辰超级甜 ,暂无简介 2023-06-27回答

蛋白酶K是一种与枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,源自Tritirachium album Limber。它以其降解角蛋白的能力而得名,并且在变性尿素或十二烷基磺酸钠(SDS)溶液中仍能保持高酶活性,因此被广泛应用于各种生物材料中DNA或RNA的提取。

蛋白酶K的特性

分子结构

蛋白酶K由一条含有277个氨基酸残基的肽链组成,相对分子质量为28,930。它的活性位点由D39、H69和S224组成,底物识别位点主要由G100-Y104和S132-G136两个片段组成。蛋白酶K的氨基酸序列与枯草杆菌蛋白酶高度相似,因此被归类为枯草杆菌蛋白酶。蛋白酶K含有两个二硫键(C34-C124、C179-C248)、两个色氨酸残基(W8、W212)和一个游离半胱氨酸(C73)。X射线晶体学研究显示蛋白酶K具有明确的球形折叠结构。它属于α/β类蛋白质,包含6个α-螺旋、15个β-折叠和一个3/10螺旋。

荧光性

蛋白酶K在295 nm处被激发,其荧光由两个色氨酸残基W8和W212决定。然而,这两种色氨酸的光反应性不同,W212的活性要高得多。在pH 3-9范围内,色氨酸的荧光量子产率是恒定的。激发态色氨酸的热灭活需要54 kJ/mol的活化能,这个值远高于其他微生物蛋白酶,因此可以解释蛋白酶K具有更高的热稳定性。

酶学性质

蛋白酶K具有高切割活性,其底物识别位点可以与底物形成3链反平行-折叠,从而催化切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。α-螺旋是维持蛋白酶K活性中心构象稳定性的主要结构。α-螺旋共含有90个氨基酸残基,占总残基数的1/3,并且大部分残基位于扩展的β-折叠结构中。这使得整个分子级数较低,变性熵较小,比变性热函极低,体现了酶的稳定性。分子中的两个二硫键和两个Ca2+也有助于三级结构的热稳定性。pH、温度、Ca2+、激活剂和抑制剂是影响蛋白酶K活性的主要因素。

蛋白酶K在核酸提取中的应用

蛋白酶K可用于消化各种蛋白质,包括制备用于脉冲电泳和蛋白质印迹的染色体DNA,以及去除DNA和RNA制备物中的核酸酶。蛋白酶K在核酸提取中的应用涉及食源性疾病的防治、农业病虫害的防治、法医学基因的鉴定与比较、分子生物学的实验研究等多个领域。应用对象包括原核生物、人体血液样本和组织、动植物组织、寄生虫、微生物等。蛋白酶K的使用条件,如工作浓度、缓冲液种类及浓度、处理时间、处理温度等条件因样品而异。

如何检测鸟苷-5'-三磷酸二钠盐? 1个回答.2人已关注
鸟苷 -5'-三磷酸二钠盐的检测是化学分析研究 中至关重要的一环。通过采用现代化的分析技术和方法,可以有效地检测鸟苷 -5'-三磷酸二钠盐的...
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书生狐妖 ,给排水工程师 2024-06-11回答

鸟苷-5'-三磷酸二钠盐的检测是化学分析研究中至关重要的一环。通过采用现代化的分析技术和方法,可以有效地检测鸟苷-5'-三磷酸二钠盐的存在及其浓度。


简述:鸟苷-5'-三磷酸二钠盐(Guanosine 5'-triphosphateGTP)是一种嘌呤核苷三磷酸。它是转录过程中 RNA 合成所需的构建块之一。其结构类似于鸟苷核苷,唯一的区别在于像 GTP 这样的核苷酸在其核糖上具有磷酸盐。GTP 的鸟嘌呤核碱基附着在核糖的 1' 碳上,三磷酸盐部分附着在核糖的 5' 碳上。它还具有能量来源或代谢反应中底物激活剂的作用,就像 ATP 一样,但更具体。它被用作蛋白质合成和糖异生的能量来源。GTP 对信号转导至关重要,特别是对于 G 蛋白,在第二信使机制中,它通过 GTPases 的作用转化为鸟苷二磷酸 (GDP)。

鸟苷-5'-三磷酸二钠盐作为含高能量基质和多种酶的激活因子,对神经系统、代谢系统和心血管等有着非常重要的作用。GTP可以调节Ca2+诱导的胰岛素分泌],还可以刺激神经轴突的生长等。虽然GTP在生理过程中具有很重要的作用,但由于其它三磷酸物质的共存干扰,使得用简单的方法区分GTP与其结构相似物(如三磷酸腺苷(ATP)、三磷酸胞苷(CTP)、三磷酸尿苷(UTP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP))仍然是一个难题。


检测:

1. 方法一

1)量子点的合成

288毫克的硫酸锌七水合物和10毫克的乙酸锰(II)溶解在50毫升微波超声波反应瓶(异口瓶)中,随后加入750毫克预先溶解在少量水中的聚乙烯亚胺(PEI),并最终用水将溶液的体积调整至约20毫升。通过加入6 mol/L盐酸来调节溶液的pH值至4.0,在微波超声波合成/萃取仪中设置参数:目标温度为60摄氏度,微波功率为500瓦,超声波功率为1,000瓦,反应时间为15分钟。整个过程在氩气氛围下进行。随后加入2.5 mL 0.4 mol/L的Na2S·9H2O水溶液,反应30 min,得到PEI包覆的Mn掺杂ZnS量子点。在不加PEI的条件下重复上述操作,得到裸的Mn掺杂ZnS量子点作为对照。分别将所得的PEI包覆和裸的Mn掺杂ZnS量子点按体积比1 ∶1加入无水乙醇使量子点沉降,10 000 r/min离心10 min,倾去上层清液,所得固体放入真空干燥箱中干燥24 h,得到实验所用的PEI包覆和裸的Mn掺杂ZnS量子点。


2)室温磷光检测

10毫升的比色管中,首先加入1毫升pH 7.2的0.1 mol/L羟乙基哌嗪乙硫磺酸(HEPES)缓冲溶液,然后加入20微升20克/升PEI包覆的锰掺杂氧化锌硫量子点水溶液。将溶液用水稀释至10毫升定容,并充分摇匀。随后逐个加入不同浓度的GTP水溶液,在静置3分钟后使用激发波长为312纳米检测溶液的磷光。


3)癌细胞提取液的制备

肝癌细胞中鸟苷-5'-三磷酸二钠盐按以下步骤提取:(1)HepG2细胞的复苏。从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37 ℃水浴中使其溶解,加入一定量的培养液,800 r/min离心3 min,弃去上清液,加入培养液4 mL,吹打使细胞悬浮。重复上述步骤3次,然后将含细胞的培养液移入培养瓶中。细胞密度控制在约5×104个/mL,放入37 ℃ CO2培养箱中培养;(2)HepG2细胞的培养。培养24 h后更换培养基,如果镜检观察发现细胞数量很多,则进行传代;(3)HepG2细胞提取液的制备。首先选择体外指数生长的细胞,消化后用血球计进行计数,总量为2.5×107个/mL,然后以800 r/min离心3 min,并用预冷的PBS洗3次,800 r/min离心3 min,重悬于0.25 mL预冷的超纯水中,在0 ℃超声降解20 min使细胞壁破裂。为去除溶解产物中的细胞碎片和蛋白,依次用Amicon Ultra-4离心膜30 kDa和3 kDa离心分离(10 000 r/min×15 min)。将得到的癌细胞提取液准确稀释20倍用于检测。


2. 方法二

脱氧核酶具有独特的催化和结构性质,其中一种具有自身磷酸化能力的脱氧核酶DK2,在锰(II)存在下可将GTP上的一个磷酸基转移到5′端,而λ外切酶(λexo)可催化5′端磷酸化的双链DNA分子从5′逐渐水解到3′,但不能裂解5′-OH端。荧光染料SYBR Green I (SG I)能与双链DNA结合并产生强荧光,但与单链DNA混合时只能发出微弱的荧光。Chengzhen Hu提出了一种基于脱氧核酶DK2自身磷酸化和λexo特异性水解的新型GTP非标记荧光检测方法。该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好、成本低、无需荧光团(猝灭基团)标记等优点,在生物应用中具有巨大的潜力。


参考:

[1]任呼博,杨成雄,严秀平.微波-超声波辅助合成聚乙烯亚胺包覆Mn掺杂ZnS量子点用于室温磷光检测三磷酸鸟苷[J].分析测试学报,2012,31(09):1042-1050.

[2]Hu C, Jiang K, Shao Z, et al. A DNAzyme-based label-free fluorescent probe for guanosine-5′-triphosphate detection[J]. Analyst, 2020, 145(21): 6948-6954.

如何使用慢病毒浓缩试剂盒进行病毒颗粒浓缩? 1个回答.11人已关注
慢病毒浓缩试剂盒是一种简单快速的方法,可用于浓缩各种类型的慢病毒颗粒。操作步骤简单,只需将慢病毒上清液与浓缩液按比例混合并孵育一...
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一阳韦茹 ,暂无简介 2021-02-23回答

慢病毒浓缩试剂盒是一种简单快速的方法,可用于浓缩各种类型的慢病毒颗粒。操作步骤简单,只需将慢病毒上清液与浓缩液按比例混合并孵育一段时间,然后进行离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。

为了使用慢病毒浓缩试剂盒进行病毒颗粒浓缩,您可以按照以下步骤进行操作:

操作步骤:

1. 在成功包装慢病毒后,收集慢病毒上清液,并使用0.45μm滤膜过滤,以去除细胞和碎片。

2. 将慢病毒上清液与试剂盒中的浓缩液按照体积比4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),并在4℃下孵育2小时或过夜。在孵育过程中,每隔30分钟混匀一次,共混匀3次。

3. 将混合液在4℃下以4000g离心25分钟。

4. 小心去除上清液,避免剧烈晃动管子,通常可以看到白色沉淀物(有时沉淀物可能不可见)。

5. 使用初始体积(原上清液的体积)的1/10-1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,并轻轻吹打均匀,使沉淀物重新悬浮。

6. 将重悬后的病毒颗粒分装到每管50μl,并在-80℃冰箱中保存。

请注意,慢病毒冻存液应避免反复冻融,以免降低病毒滴度。

慢病毒浓缩试剂盒的应用

如何构建人Bmi-1基因shRNA慢病毒表达载体并测定病毒滴度?

本研究旨在构建人Bmi-1基因的慢病毒载体,并通过转染293T细胞收集病毒液,浓缩病毒液并测定病毒滴度。

方法:设计以Bmi-1基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),将3条Bmi-1基因的shRNA片段插入慢病毒载体中,并进行筛选和鉴定。然后,转染具有高转染性的293T细胞,收集病毒液并进行浓缩,最后使用荧光滴度法测定病毒滴度。

结果:成功构建了含有Bmi-1-shRNA的重组慢病毒载体,并通过转染293T细胞获得了该基因的病毒液,并对病毒液进行了浓缩。测序结果证实了重组构建的准确性。

结论:本研究成功构建了Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,并通过转染293T细胞获得了该基因的病毒液,并对病毒液进行了浓缩。通过荧光滴度法成功测定了病毒的滴度,为进一步研究Bmi-1基因对鼻咽癌细胞功能的影响奠定了基础。

参考文献:

[1] IARC Scientific Publications No.155. Parkin MD, Whelan SL, Ferlay J, et al. Lyon France. 2002.

[2] Phase III study comparing standard radiotherapy with or without weekly oxaliplatin in treatment of locoregionally advanced nasopharyngeal carcinoma: preliminary results. Zhang L, Zhao C, Peng PJ, et al. Journal of Clinical Oncology. 2005.

[3] Emerging molecular targeted therapies in the treatment of head and neck cancer. Alexandre Bozec, Frédéric Peyrade, Jean-Louis Fischel, Gérard Milano. Expert Opinion on Emerging Drugs. 2009.

[4] The Bmi-1 oncogene induces telomerase activity and immortalizes human mammary epithelial cells. Dimri G P, Martinez J L, Jacobs J J, et al. Mutation Research. 2005.

[5] 罗逸. 人Bmi-1基因shRNA慢病毒表达载体的构建、病毒的浓缩及其病毒滴度的测定[D]. 遵义医学院, 2015.

蛋白酶K的应用领域及特性? 1个回答.13人已关注
蛋白酶K是一种与枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,源自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)。由于其对角蛋白(keratin)的降...
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fwii1516 ,暂无简介 2020-11-18回答

蛋白酶K是一种与枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,源自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)。由于其对角蛋白(keratin)的降解能力,因此得名蛋白酶K。蛋白酶K在变性剂尿素或十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)溶液中仍能保持较高的酶活力,因此广泛应用于DNA或RNA的提取过程中。

蛋白酶K的特性

分子结构

蛋白酶K由一条含有277个氨基酸残基的肽链组成,相对分子质量为28,930。其活性部位包括D39、H69和S224,底物识别位点主要为G100-Y104和S132-G136。蛋白酶K的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌蛋白酶高度相似,因此被归类为枯草芽孢杆菌蛋白酶类。蛋白酶K含有两个二硫键(C34-C124,C179-C248),两个色氨酸残基(W8,W212)和一个游离半胱氨酸(C73)。X射线晶体学研究显示,蛋白酶K的三维结构呈现球形折叠,属于α/β类蛋白质,包含6个α-螺旋,15个β-折叠和一个3/10螺旋。

荧光性

蛋白酶K在295 nm处被激发,其荧光性由两个色氨酸残基W8和W212决定。其中,W212的光反应活性更强。在pH 3~9范围内,色氨酸荧光量子产率保持恒定。对已激发的色氨酸进行热力灭活时,活化能需达到54 kJ/mol,这一值远高于其他微生物蛋白酶,从而解释了蛋白酶K较高的热稳定性。

酶学性质

蛋白酶K具有高度的切割活性,其底物识别位点能与底物形成一个3股的反平行β片层,从而催化脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键断裂。α-螺旋结构是维持蛋白酶K活性中心构象稳定性的关键。α-螺旋共含有90个氨基酸残基,占总残基数的1/3,大部分残基位于伸展的β-折叠结构中。这使得整个分子的有序度较低,变性熵较小,变性焓值极低,反映了酶的稳定性。此外,分子中的两个二硫键和两个Ca2+也对三级结构的热稳定性起贡献。pH、温度、Ca2+、激活剂和抑制剂等因素是影响蛋白酶K活力的主要因素。

蛋白酶K在核酸提取中的应用

蛋白酶K可用于消化各种蛋白质,包括制备脉冲电泳的染色体DNA、蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K在核酸提取中的应用广泛涉及食源性疾病预防、农业病虫害防治、法医学基因鉴定比对和分子生物学试验研究等多个领域。应用对象包括原核生物、人体血样及组织、动植物组织、寄生虫、微生物等。蛋白酶K的应用条件,如工作浓度、缓冲液种类及浓度、处理时间、处理温度等因样品而异。

凡士林适合哪些人群使用? 1个回答.20人已关注
凡士林是一种石蜡(石油中所提炼的)通用商标,同时亦为联合利华所生产的个人清洁用品、除臭用品、体香剂、润肤霜与润滑剂品牌。 性质 凡...
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ycmf7787 ,暂无简介 2024-10-14回答

凡士林是一种石蜡(石油中所提炼的)通用商标,同时亦为联合利华所生产的个人清洁用品、除臭用品、体香剂、润肤霜与润滑剂品牌。

凡士林

性质

凡士林系石油润滑油馏份,经深度精制而得的无色、无臭、无荧光透明的油状液体,不含任何添加剂、水分和机械杂质。溶于乙醚、氯仿、汽油及苯等溶剂,不溶于水,与乙醇化学稳定性和抗氧化性良好,具有良好的抗氧化安定性、稳定性和光安定性。

功效

凡士林是一种矿物蜡,它不会被皮肤吸收,能在肌肤表面形成一道保护膜,使皮肤的水分不易蒸发散失,而且它极不溶于水,可长久附着在皮肤上,因此具有很好的保湿效果,十分适合干燥肌肤使用。可用来当作护唇膏、护手霜、擦脸或擦身体,是非常好的保湿用品。还具有去除伤疤的效果。

用途

凡士林适用于化状品原料,用以制作发乳、发油、发蜡、口红、面油、护肤脂等。还用作轻型机械和精密仪表的润滑,化妆、食品工业和纺织工业的机械润滑等。

不良反应

提炼程度较低的凡士林,厂商为了避免杂质变质,往往会加入了香精、抗氧化剂等添加物,来盖掉不好的气味或增加商品的香气,对于一般人而言,差异并不大,仅在于使用上好不好推开、感觉油不油腻,比较少见不良反应。

但对敏感肌、年长者、婴幼儿以及孕妇来说,一点杂质即可能引起皮肤不适,就会建议选择等级达到美国药典等级规范的纯化凡士林,一般这样级别的凡士林,已经达到符合生产为医疗药品成分的标准,像是常见的眼药膏基底成分,就是100%纯度凡士林,如果连眼睛都可以使用的等级,使用在皮肤上将更加稳定与舒适。

3,4-二氨基甲苯有哪些性质和应用? 1个回答.9人已关注
3,4-二氨基甲苯是一种灰白色结晶固体,具有较强的碱性。它是苯胺类衍生物,含有两个强给电子的氨基单元,因此在光致发光性质方面表现出优...
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sprt. ,设备工程师 2023-07-24回答

3,4-二氨基甲苯是一种灰白色结晶固体,具有较强的碱性。它是苯胺类衍生物,含有两个强给电子的氨基单元,因此在光致发光性质方面表现出优异的特点。它常被用作有机合成中间体和染料分子合成原料,在基础化学研究和染料生产领域有广泛的应用。

3,4-二氨基甲苯的性质

3,4-二氨基甲苯可由4-甲基-2-硝基苯胺经还原得到,微溶于水但可溶于乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂。它具有可升华的物理性质,可以通过加热直接从固态转变为气态,然后在冷凝后重新结晶成固体。这个升华过程对于纯度控制非常重要,可以去除杂质或不纯物质,提高化合物的纯度。此外,由于其结构中含有两个强给电子的氨基单元,它容易在强氧化剂的作用下转变为氮氧化物而变质。同时,它的结构中两个氨基单元处于邻位,可以与其他双亲电试剂发生环化或缩合反应,制备相应的环状化合物。

3,4-二氨基甲苯的缩合反应

3,4-二氨基甲苯的缩合反应

图1 3,4-二氨基甲苯的缩合反应

在一个干燥的50毫升反应烧瓶中,将3,4-二氨基甲苯(1.0 mmol)、原甲酸三乙酯(1.2 mmol)和ZrCl4 (0.1 mmol)加入到10 mL无水甲醇中,所得的反应混合物在室温下搅拌反应3 h。通过TLC点板监测反应的完成情况,反应结束后将反应混合物直接在真空下进行浓缩以除去有机溶剂。所得的残余物经硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯=4/1)进行分离纯化,即可得目标化合物。

3,4-二氨基甲苯的应用

作为一种染料化学中间体和有机合成试剂,3,4-二氨基甲苯可以通过一系列的化学转化反应用于染料分子和功能有机小分子的合成过程中。例如,它可用于生产分散荧光黄,这是一种高强度分散染料,具有色光艳丽、匀染性好等特点,主要用于涤纶及其混纺织物的染色和印花,也可用于塑料的着色。

参考文献

[1] Cai, Haiyan; et al European Journal of Medicinal Chemistry (2015), 90, 241-250.

 
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