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Anti-BCMA Antibody的应用及检测原理? 1个回答.17人已关注
Anti-BCMA Antibody是一种可以特异性结合BCMA的多克隆抗体,主要用于进行多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 ...
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连枝姑娘 ,暂无简介 2020-08-23回答

Anti-BCMA Antibody是一种可以特异性结合BCMA的多克隆抗体,主要用于进行多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理是通过双抗体夹心法来测定标本中的BCMA水平。首先,在微孔板上包被纯化的BCMA抗体,形成固相抗体。然后,依次加入BCMA样品和HRP标记的BCMA抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中BCMA的含量,可以通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中的BCMA浓度。

BCMA(B细胞成熟抗原)是一种肿瘤坏死因子受体超家族的成员,主要在浆细胞和成熟B淋巴细胞中表达,而在其他正常人体细胞中很少检测到。

BCMA在多发性骨髓瘤患者的浆细胞表面可检测到,而在正常细胞中主要由浆细胞和一部分成熟B细胞表达。BCMA的缺乏会导致浆细胞无法长期存活。因此,BCMA是治疗具有CAR表达T细胞的多发性骨髓瘤的合适靶抗原。

BLyS和APRIL在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

BLyS(B淋巴细胞刺激因子)和APRIL(增殖诱导配体)是肿瘤坏死因子家族的新成员,与BCMA和TACI受体密切相关。BLyS和APRIL通过与受体结合,影响B和T淋巴细胞的激活、增殖和存活,参与免疫调节和体液免疫功能。

研究发现,BLyS/APRIL系统的异常与肿瘤和多种自身免疫性疾病的发生和发展有关。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),可以检测和分析多发性骨髓瘤患者血清中BLyS和APRIL的水平,并探讨其与肿瘤负荷和预后指标的相关性。

研究方法是采集多发性骨髓瘤患者和健康成年人的血清样本,通过ELISA检测血清中BLyS、APRIL和IL-6的浓度变化。研究结果可以揭示BLyS/APRIL系统在多发性骨髓瘤发病中的作用及其临床意义。

参考文献

[1] Rajkumar SV, Kyle RA. Multiple myeloma: diagnosis and treatment. Mayo Clinic Proceedings. 2005.

[2] Richardson P, Anderson K. Immunomodulatory analogs of thalidomide: an emerging new therapy in myeloma. Journal of Clinical Oncology. 2004.

[3] Paola N, Shaji K, Mariateresa F, et al. Neutralizing B-cell activating factor antibody improves survival and inhibits osteoclastogenesis in a severe combined immunodeficient human multiple model. Clinical Cancer Research. 2007.

[4] Moore PA, Belvedere O, Orr A, et al. BLyS: Member of the tumor necrosis factor family and B lymphocyte stimulator. Science. 1999.

[5] 李超. B淋巴细胞刺激因子及增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中表达及临床意义的研究[D]. 河北医科大学, 2009.

什么是Anti-ACTA2 Rabbit Monoclonal Antibody? 1个回答.5人已关注
Anti-ACTA2 Rabbit Monoclonal Antibody是一种特异性结合Anti-ACTA2的单克隆抗体,可用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELI...
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语卉公子 ,暂无简介 2020-08-22回答

Anti-ACTA2 Rabbit Monoclonal Antibody是一种特异性结合Anti-ACTA2的单克隆抗体,可用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理:采用双抗体夹心法来测定样本中的Anti-ACTA2水平。首先,在微孔板上包被纯化的Anti-ACTA2抗体,形成固相抗体。然后,依次加入样本中的Anti-ACTA2和HRP标记的Anti-ACTA2抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中的Anti-ACTA2浓度呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中Anti-ACTA2的浓度。

ACTA2(actin alpha 2)是一种肌动蛋白,也被称为α-肌动蛋白、α-肌动蛋白-2、主动脉平滑肌或α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。Actins是一类球状多功能蛋白质家族,可以形成微丝。ACTA2是其中的一种亚型,参与平滑肌的收缩。ACTA2在各种哺乳动物中都有发现,具有高度保守性。在人类中,ACTA2基因位于10q22-q24区域。该基因的突变与多种血管疾病有关,如胸主动脉疾病、冠状动脉疾病、中风、烟雾病和多系统平滑肌功能障碍综合征。ACTA2(α-SMA)目前被认为是肌成纤维细胞的标志。

Anti-ACTA2 Rabbit Monoclonal Antibody的应用

用于乳腺癌转移中MMP1通路轴的研究

该研究旨在寻找调控乳腺癌肺转移的基础和实验研究的靶点,重点研究调控MMP1分泌的相关分子和调控方式。

研究方法:

  1. 使用免疫共沉淀技术,将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和V2M4细胞总蛋白与MMP1特异性抗体共沉淀,寻找与MMP1直接作用的蛋白。通过质谱分析和Western Blot验证,发现其中有差异表达的蛋白(包括ACTA2)。
  2. 使用实时定量PCR检测相关蛋白的mRNA水平变化。
  3. 使用激光共聚焦显微镜证明细胞内MMP1与ACTA2蛋白的结合。
  4. 通过蛋白表达和Pull down实验验证蛋白相互作用的直接性。
  5. 构建ACTA2基因沉默质粒并稳定转染V2M4细胞,进一步检测MMP1的表达,并进行细胞侵袭实验、增殖实验和三维凝胶实验。
  6. 在免疫缺陷鼠乳房中注射转染细胞,观察体内肿瘤的生长和肺转移情况。
  7. 构建ACTA2病毒过表达载体,转染MDA-MB-435和MDA-MB-231细胞,筛选稳定转染细胞,并进行ACTA2基因沉默质粒构建和转染V2M4细胞,进一步检测MMP1的表达,并进行细胞侵袭实验、增殖实验和三维凝胶实验。
  8. 利用含钙和无钙的DMEM培养基检测钙对MMP1分泌的影响。
  9. 构建肌动蛋白特异性载体(pro-50),检测ACTA2聚合与解聚对MMP1分泌的影响。筛选钙特异性配体门控通道,获得TRPV6表达差异。
  10. 构建TRPV6基因沉默载体并稳定转染Vb细胞,进行体内和体外实验证明钙通道对MMP1分泌的影响。进一步验证实验结果,使用TRPV6的兴奋剂和抑制剂。

参考文献

[1] Difference gel electrophoresis[J]. Jonathan S. Minden, Susan R. Dowd, Helmut E. Meyer, Kai Stühler. ELECTROPHORESIS. 2009(S1)

[2] G-Protein–Coupled Receptors as Signaling Targets for Antiplatelet Therapy[J]. Susan S. Smyth, Donna S. Woulfe, Jeffrey I. Weitz, Christian Gachet, Pamela B. Conley, Shaun G. Goodman, Matthew T. Roe, Athan Kuliopulos, David J. Moliterno, Patricia A. French, Steven R. Steinhubl, Richard C. Becker. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2009(4)

[3] Increased expressions of cannabinoid receptor-1 and transient receptor potential vanilloid-1 in human prostate carcinoma[J]. Gabriella Czifra, Attila Varga, Katalin Nyeste, Rita Marincsák, Balázs I. Tóth, Ilona Kovács, László Kovács, Tamás Bíró. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology. 2009(4)

[4] Functional genomics of cancer[J]. Edison T Liu. Current Opinion in Genetics & Development. 2008(3)

[5] 石鹏程. MMP1通路轴对乳腺癌转移的研究[D]. 复旦大学, 2010.

如何使用Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit进行定量检测? 1个回答.2人已关注
在这篇文章中,我们将介绍如何使用Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit进行定...
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醉梅来了 ,暂无简介 2020-01-05回答

在这篇文章中,我们将介绍如何使用Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit进行定量检测。该试剂盒可以用于测量血清、血浆和其他相关液体样本中人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)的含量。

基本信息

英文名称:Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit

保存条件:2-8℃

用途:用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)的含量。

特点:具有高灵敏性、强特异性和良好的重复性。

试剂盒种属:适用于羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。

实验原理

该试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中人髓磷脂碱性蛋白(MBP)的水平。首先,在微孔板上包被纯化的人髓磷脂碱性蛋白(MBP)抗体,形成固相抗体。然后,依次加入髓磷脂碱性蛋白(MBP)和HRP标记的髓磷脂碱性蛋白(MBP)抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。样品中的髓磷脂碱性蛋白(MBP)浓度与颜色的深浅呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算出样品中髓磷脂碱性蛋白(MBP)的浓度。

操作步骤

1. 加样:在酶标包被板上设空白孔和待测样品孔。先加入样品稀释液40μl,然后再加入待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。轻轻晃动混匀。

2. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔。按照一定的稀释比例加入标准品和标准品稀释液,混匀。

3. 温育:封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释后备用。

5. 洗涤:揭掉封板膜,加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次。

6. 温育:操作同3。

7. 洗涤:操作同5。

8. 显色:加入显色剂A和显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

9. 加酶:加入酶标试剂。

10. 终止:加入终止液,终止反应。

11. 测定:以空白空调零,使用酶标仪在450nm波长下测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

主要参考文献

[1] 孙晓菁,陈旻,赵明辉。Rho GTP酶参与S1P诱导的MPO-ANCA阳性IgG介导的人肾小球内皮细胞的活化。第十三届全国免疫学学术大会。

moe 同源建模? 1个回答.10人已关注
奶气 ,研发工程师 2019-01-06回答
是有点奇怪,你的MOE是什么版本的?有Antibody Enginerring模块吗?
如何选择notch1的抗体? 2个回答.17人已关注
鹊巢. ,设备维修 2019-03-11回答
notch1的抗体综述,你可以看看,不同公司的抗体所对应的sci报道情况也都有,你可以直接参考文献中的实验条件和结果:https://www.labome.com/review/gene/human/Notch1-antibody.html 
HIF? 1个回答.20人已关注
https://www.labome.com/review/ge ... alpha-antibody.html 这是HIF-1alpha抗体的sci报道综述,你可以根据你的实验物种和实验类型找下相应...
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雷锋塔下 ,实验室主任 2019-03-18回答
https://www.labome.com/review/ge ... alpha-antibody.html
这是HIF-1alpha抗体的sci报道综述,你可以根据你的实验物种和实验类型找下相应的抗体,点击货号可以查看相应的sci报道文献,建议选用别人sci报道较多的抗体并参考相应文献中的实验条件。
为什么人抗体或人源化抗体测序服务对抗体治疗如此重要? 1个回答.5人已关注
人抗体或人源化抗体测序服务是为客户提供专业的人抗体或人源化抗体测序服务的服务。通过利用鸟枪法与抗体数据库相结合的技术"Database Ass...
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晨风欣可 ,暂无简介 2020-01-12回答

人抗体或人源化抗体测序服务是为客户提供专业的人抗体或人源化抗体测序服务的服务。通过利用鸟枪法与抗体数据库相结合的技术"Database Assisted Shotgun Sequencing"(DASS),我们建立了一种专业、新型的抗体测序平台。这种平台可以获得高特异性和亲和性的人或人源化抗体,对于许多疾病的抗体治疗具有越来越重要的作用。

人抗体或人源化抗体测序服务可以根据客户的需求提供专业的测序服务。我们保证对所有人或人源化抗体进行准确率高达99%以上的测序。人源化抗体是从非人类物种中获得的抗体,通过修饰增加其与人体内天然抗体的序列相似性。人源化过程对于在非人类免疫系统中生产特异性抗体是十分必要的。单抗技术经过35年的发展,经历了鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体四个阶段。

人源化抗体与嵌合抗体不同,尽管生产嵌合抗体是为了获得与人抗体更相似的抗体,但这种类型的简单嵌合体并不能被认为是人源化的。通过CDRs(complementarity-determining regions)使抗体结合到目标抗原上,人源化抗体的蛋白序列本质上其实是人抗体的变种。通过"人源化"的方法,通常是要开发用于人类的单克隆抗体药物。

目前的人源化抗体主要用于肿瘤、自身免疫性疾病和心血管疾病的治疗以及抗移植排斥反应和抗病毒感染等方面。在全球单抗市场中,人源单抗是其未来的发展方向。已经上市的32个单抗中,有9个是全人源单抗。随着转基因小鼠和噬菌体技术的成功应用,全人源单克隆单抗的比重将逐渐增大。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。

人抗体或人源化抗体测序服务的应用领域是什么?

人抗体或人源化抗体测序服务可以应用于鼠源单抗人源化抗体测序服务。

鼠源抗体对人体来说具有较强的免疫反应,会产生人抗鼠抗体反应(Human anti-mouse antibody response, HAMA response),从而影响鼠源单抗在临床上的安全性和治疗效果。通过基因改造,抗体人源化使鼠源抗体具有与人体内抗体类似的结构,从而逃避免疫系统的识别,避免诱导HAMA。鼠源单抗人源化抗体测序服务的目的是将小鼠抗体分子的互补决定区序列移植到人抗体可变区框架中,制成抗体。这种抗体可以明显降低由鼠源单克隆抗体引起的人抗鼠抗体反应,从而大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。

参考文献

[1]Single-Dose versus fractionated radioimmunotherapy of human colon carcinoma xenografts using 131I-labeled multivalent CC49 single-chain Fvs.Goel A,Augustine S,Baramowska-kortylewicz J,et al.Clinical Cancer Research.2001

[2]Affinity maturation of natural antibody using a chain shuffling technique and the expression of recombinant antibodies in Escherichia coli.Park SG,Lee JS,Je EY,et al.Biochemical and Biophysical Research Communications.2000

[3]Construction and high cytoplasmic expression of a tumoricidal single-chain antibody against hepatocellular carcinoma.Sandee D,Tungpradabkul S,Tsukio M,et al.BMC Biotechnology.2002

[4]Improvod production and function of llama heavy chain antibody fragments by molecular evolution.Van der Linden RH,de Geus B,Frenken GJ,et al.Journal of Biotechnology.2000

[5]Directed in vitro evolution and crystallographic analysis of a peptide-binding single chain antibody fragment(scFv)with low picomolar affinity.Zahnd C,Spinelli S,Luginbuhl B,et al.Journal of Biological Chemistry.2004

[6]肝癌细胞特异性结合抗体的筛选及序列测定[J].李赏,胡宝成,绳纪坡,黄培堂.免疫学杂志.2002(S1)

[7]抗肝癌单链抗体的构建及其结合特性[J].毕向军,杨冬华,崔俊,李鹏,宁晓燕,范子荣,覃汉荣.上海免疫学杂志.2001(05)

[8]叶刚,刘丽,杨冬华,汤绍辉,周旻,丁世华,韦宏成,钟健.基于同源模建技术的抗肝癌单链抗体人源化抗体库设计[J].中国老年学杂志,2015,35(16):4467-4470.

如何检测一个蛋白的乙酰化水平? 1个回答.13人已关注
很简单 目的蛋白加tag比如FLAG。转染后加药刺激什么,再做IP(不是什么co-IP)拉下flag-目的蛋白,然后用广谱pan-acetylation抗体验证目的...
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shallow. ,给排水工程师 2019-03-12回答
很简单 目的蛋白加tag比如FLAG。转染后加药刺激什么,再做IP(不是什么co-IP)拉下flag-目的蛋白,然后用广谱pan-acetylation抗体验证目的蛋白乙酰化变化,用pan-acetylation抗体检测。有一个缺憾,如果你的目的蛋白 乙酰化位点很多,即使某个位点受药物刺激乙酰化变化很明显(即使这个位点乙酰化很重要),但用pan-acetylation抗体还是看不出差异,因为如果其他位点有乙酰化 并且位点比较多并且不受你药物刺激影响的话pan-acetylation很可能是看不出差异。这个时候 就需要有针对目的蛋白某个位点乙酰化的antibody来验证。
哪些单抗药物需要降低ADCC和CDC活性? 1个回答.18人已关注
在4个IgG亚类中,IgG1具有较长的体内半衰期,同时具有较强的抗体依赖细胞毒性(antibody-dependentcellular cytotoxicity, ADCC)和补体依...
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书生 ,工艺专业主任 2019-05-04回答
在4个IgG亚类中,IgG1具有较长的体内半衰期,同时具有较强的抗体依赖细胞毒性(antibody-dependentcellular cytotoxicity, ADCC)和补体依赖细胞毒性(complement-dependentcytotoxicity, CDC)活性;IgG2和IgG3只有CDC活性,不具有ADCC活性;IgG4既没有ADCC活性也没有CDC活性,这是我在文献上看来的。IgG2具有比较好的中和和调理作用,临床批的igG4抗体是与药物偶联的,所以可以通过抗体的亚型选择来调节抗体的细胞毒性。同时抗体的类型应该也可以,据文献报道抗体可分为I和II型,II型抗体的CDC活性比较低,但是其诱导细胞凋亡的能力较强。例如GA1O1就属于II型抗体,其CDC活性较弱。
为什么C型钠尿肽抗体在心血管疾病中起着重要的作用? 1个回答.16人已关注
在心血管疾病中,C型钠尿肽抗体(N-Term CNP Antibody)是一种重要的检测工具。它是一种兔源多克隆抗体,可用于免疫组织化学(IHC)和West...
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霹雳弘扬 ,暂无简介 2020-05-18回答

在心血管疾病中,C型钠尿肽抗体(N-Term CNP Antibody)是一种重要的检测工具。它是一种兔源多克隆抗体,可用于免疫组织化学(IHC)和Western Blotting (WB)等检测方法。该抗体的英文名字是CNP Antibody (N-Term),中文名称是C型钠尿肽抗体。

钠尿肽家族中的C型钠尿肽(natriuretic peptide type C,CNP)是第三个成员,它在人类和一些低等生物体内广泛存在。与循环血液中的心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)不同,CNP通过旁分泌/自分泌的方式发挥作用。

CNP具有多种心血管效应,包括扩张血管、抑制平滑肌细胞增殖和迁移、抑制细胞外基质形成、抑制血管内膜和心肌细胞增殖、减少动脉硬化和斑块形成、抑制重塑以及抑制炎症反应等。CNP主要由血管内皮分泌,并与钠尿肽受体B(NPR-B)特异结合,通过提高第二信使鸟苷酸环化酶的水平,促进细胞内环磷酸鸟苷水平的升高。

最近的研究还发现,CNP在脊椎骨和长骨生长中也起着特殊的作用。在多种病理情况下,如心力衰竭、妊娠高血压综合征和心脏移植等,患者血浆中CNP的水平升高。因此,CNP在高血压、心肌肥厚和动脉粥样硬化斑块的发生和发展过程中具有重要的保护作用。

主要参考文献

[1]黄晓,程晓;C型钠尿肽与心血管疾病。《中华高血压杂志》

 
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