四丁基氟化铵的概述是什么? 【英文名称】Tetra-n-Butylammonium Fluoride 【分子式】C16H36FN 【分子量】261.46 【CA登录号】429-41-4 【缩写和别名】TBAF 【物理性质】通常以水合物形式存在,例 如 :TBAF-3H20, TBAF-xH20。其中,TBAF-xH20 mp 62?63 °C。1.0 mol/L THF 标准溶液:d 0.903 g/mL (25 °C)。质量分数为75% 水溶液:d 0.953g/mL(25°C)。溶于水、乙腈、THF。 四丁基氟化铵为三水合物或不同溶剂和不同浓度的标准溶液,例如:1.0 mol/L的THF溶液、质量分数为75%的水溶液等。也可以通过氢氟酸水溶液与溴化四丁基铵的水溶液在离子交换树脂中反应制备而成。反应完毕后,将树脂用水反复洗涤,将洗脱液中水分蒸干即得油状产物。 【注意事项】须在通风橱中进行操作。 四丁基氟化铵的应用有哪些? 氟化四丁基铵(TBAF)[1]在反应中可解离为(n-Bu)4N+与F- 离子。它是一类常用的氟代试剂,可取代硝基、卤素等基团,但其取代性能比氰基弱。它还是一类常用的去硅烷基试剂。 氟取代反应 TBAF可用于绝大部分的氟取代反应。例如:由2-硝基-4-溴-吡啶制备2-氟-4-溴-吡啶(式1)[2]。温和的反应条件和较高的反应产率是采用TBAF为氟代试剂的主要原因。 去硅烷基反应 TBAF广泛用于去硅烷基的反应,这类反应通常可以在比较温和的条件下进行,且产率很高。不仅是断裂Si-O(式2)[3]、Si-N等共价键的常用方法,也适用于杂原子(式3)[4]、羧基(式4)[5]的去硅烷基化反应。 TBAF 还是一种很强的脱硅烷化试剂,广泛用于断裂 Si-C键,特别是与双键或三键相邻的sp2-C-Si与sp3-C-Si键(式5)[6]。若将TBAF与过渡金属催化剂合用时,还可以使脱硅烷基反应与偶联反应同时进行(式6)[7]。 催化亲核取代反应 TBAF 可以催化二硝基苯上的亲核取代反应,例如:对二硝基苯与三氟乙醇的反应(式7)[8]。其催化机理是先用氟取代一个硝基,然后三氟乙醇的羟基亲核进攻与氟相连的碳原子而得到目标产物。 参考文献 1. Amantini, D.; Beleggia, R,; Fringuelli, F.; Pizzo, F.; Vaccaro, L. J. Org. Chem. 2004, 69,2896. 2. Kuduk, S. D.; DiPardo, R. M.; Bock, M. G. Org. Lett. 2005, 7,577. 3. Wen, K.; Chow, S.; Sanghvi, Y. S.; Theodorakis, E. A. J. Org. Chem. 2002, 67,7887. 4. Kimura, T.; Murai, T. J. Org. Chem. 2005, 70, 952. 5. Jonathan, C. T.; Carl, H. S.; Dennis, P. C. J. Am. Chem. Soc. 2005,127, 5518. 6. Heitzman, C. L.; Lambert, W. T.; Mertz, E.; Shotwell, J. B.; Tinsley, J. M.; Va, P.; Roush, W. R. Org. Lett. 2005, 7, 2405. 7. Denmark, S. E.; Tymonko, S. A. J. Am. Chem. Soc. 2005,127, 8004. 8. Tejero, I.; Huertas, I.; Gonzalez-Lafont, A.; Lluch, J. M.; Marquet, J. J. Org. Chem. 2005, 70, 1718. 查看更多
微量蛋白沉淀试剂盒的操作方法和应用领域是什么? 背景 [1-3] 微量蛋白沉淀试剂盒是一种用于微量沉淀浓缩蛋白质样品的试剂盒。它通过酸使蛋白质变性,溶解度降低,在离心条件下沉淀,从而实现蛋白变性、蛋白浓缩和蛋白去盐的目的。此外,它还可以去除污染的盐离子和其他小分子。 微量蛋白沉淀试剂盒是一种方便迅速的操作方法,只需要混匀后离心,无需其他仪器。它具有稳定的特点,可以在室温下长期放置。此外,它适用于处理各种液体样品,包括细胞或细菌培养物、细胞裂解物和蛋白质提取物等。它的浓缩效果强,可以浓缩浓度低达1μg/mL的蛋白。对于含有SDS的样品,它也可以使用,但灵敏度稍低(5μg/mL)。通过使用微量蛋白沉淀试剂盒,可以得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验,但需要注意的是蛋白已经变性,没有活性。 使用方法:用于不含SDS的样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL 1、将100μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。 2、加入10μL溶液A,涡旋激烈震荡10-30秒混匀。 3、冰上放置15分钟。 4、加入10μL溶液B,轻轻混匀。 5、冰上放置60分钟。 6、4℃12000~15000×g离心10分钟。 7、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。 8、加入1mL冰浴的溶液C,震荡混匀后4℃12000~15000×g离心15分钟。 9、小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。 10、短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。 11、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液,直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。 应用 [4][5] 用于从双液相棉粕中制备浓缩蛋白和分离蛋白研究 棉籽浓缩蛋白的制备在双液相棉粕中,棉壳约占30%。为了制备棉籽浓缩蛋白,本研究利用棉壳和棉仁密度上的差异,通过比较选定了K2CO3溶液作为液选剂制得棉籽浓缩蛋白,并考察了浓度和预处理方式对分离效果的影响。 棉籽蛋白的功能特性分析了棉籽浓缩蛋白、沉淀蛋白、溶解蛋白三种蛋白产品中的蛋白质含量、植酸含量,并考察了三种蛋白产品的功能特性,包括溶解性、吸水性、吸油性、乳化性与乳化稳定性、起泡性与泡沫稳定性等。结果显示,棉籽浓缩蛋白、沉淀蛋白、溶解蛋白的蛋白质含量依次为74.8%、93.6%和83.3%,植酸含量依次为2.69%、1.66%和2.18%。棉籽溶解蛋白的氮溶指数低于菜籽溶解蛋白(91.42%)。当pH偏离7.0时,棉籽沉淀蛋白的NSI急剧增加,pH=10.5时,NSI=90%。棉籽沉淀蛋白和浓缩蛋白的吸水性和吸油性均随温度的升高而增大。在吸水性方面,与菜籽沉淀蛋白相比,棉籽蛋白产品的吸水性要低,但高于大豆沉淀蛋白。在吸油性方面,棉籽蛋白均低于菜籽蛋白和大豆蛋白。 参考文献 [1]Suitability of commercial cottonseed for producing edible high protein flours by liquid classification[J].R.J.Hron,S.P.Koltun,A.V.Graci.Journal of the American Oil Chemists’Society.1982(5) [2]Food uses for cottonseed protein[J].James J.Spadaro,Homer K.Gardner.Journal of the American Oil Chemists’Society.1979(3) [3]Cottonseed protein food products[J].C.M.Cater,K.F.Mattil,W.W.Meinke,M.V.Taranto,J.T.Lawhon,B.B.Alford.Journal of the American Oil Chemists’Society.1977(2) [4]Aqueous solvents for extracting glanded cottonseed protein without gland rupture[J].L.L.Muller,T.J.Jacks,T.P.Hensarling.Journal of the American Oil Chemists’Society.1976(9) [5]崔志芹.从双液相棉粕中制备浓缩蛋白和分离蛋白[D].南京工业大学,2004.查看更多
9-Fluorenylmethyl Choroformate: A Versatile Reagent for Peptide Synthesis? 9-Fluorenylmethyl Choroformate, also known as Fmoc-Cl or 9-fluorenylmethyl chloroformate, is a reagent commonly used in peptide synthesis and derivatization for amino acid and amine protection. It has the molecular formula C15H11ClO2 and a molecular weight of 258.70. Fmoc-Cl is a white crystalline solid with a melting point of 62~64 oC and is soluble in organic solvents such as CH2Cl2, THF, and dioxane. However, it should be handled with caution as it is moisture-sensitive, corrosive, and can cause severe irritation to the skin and eyes. One of the main applications of Fmoc-Cl is the protection of the N-terminus of amino acids. It can be used in conjunction with sodium bicarbonate or sodium carbonate as a base in solvents such as dioxane and DMF/water mixture to protect amino acids and similar compounds. The Fmoc protecting group can be removed by treatment with 20%~30% piperidine in DMF. Unlike other protecting groups, Fmoc protection does not require the use of harsh acids such as HF or trifluoroacetic acid. Protecting Amines and Hydroxyl Groups Fmoc-Cl can also be used for the protection of primary and secondary amines, similar to the protection of amino acid N-termini. The reaction conditions are generally the same as those used for amino acid protection. Protection of Amines and Hydroxyl Groups in Nucleosides, Sugars, and Natural Products Fmoc-Cl is also employed for the protection of amino groups in various nucleosides, including adenosine, cytidine, guanosine, and their corresponding 2'-deoxy derivatives. It can also be used for the protection of hydroxyl groups in sugars (as shown in the figure below). Fmoc derivatives are widely used in fluorescence detection and analysis. Fmoc-protected amino acids and other primary and secondary amines can be analyzed by HPLC, taking advantage of their high UV sensitivity. References 1. Jorgensen, M. R.; Olsen, C. A.; Mello, I. R.; Usherwood, P. N.R.; Witt, M.; Franzyk, H.; Jaroszewski, J. W. J. Med. Chem.,2005, 48, 56. 2. Brun, M.-P.; Bischoff, L.; Garbay, C. Angew. Chem., Int. Ed.,2004, 43, 3432. 3. Johannesson, P.; Erdelyi, M.; Lindeberg, G.; Frandberg, P.-A.;Nyberg, F.; Karlen, A.; Hallberg, A. J. Med. Chem., 2004, 47,6009. 4. Danner, P.; Bauer, M.; Phukan, P.; Maier, M. E. Eur. J. Org.Chem., 2005, 317. 5. Chehade, K. A. H.; Spielmann, P. H. J. Org. Chem., 2000, 65,4949. 6. Wang, X. J.; Xu, B.; Mullins, A. B.; Neiler, F. K.; Etzkorn, F.A. J. Am. Chem. Soc., 2004, 126, 15533. 7. Hannachi, J.-C.; Vidal, J.; Mulatier, J.-C.; Collet, A. J. Org.Chem., 2004, 69, 2367. 8. Sierzchala, A. B.; Dellinger, D. J.; Betley, J. R.;Wyrzykiewicz, T. K.; Yamada, C. M.; Caruthers, M. H. J. Am.Chem. Soc., 2003, 125, 13427. 9. Fletcher, S.; Jorgensen, M. R.; Miller, A. D. Org. Lett., 2004,6, 4245. 查看更多