如何使用人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒进行检测? 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行检测。该方法通过将抗体包被于酶标板上,样品或标准品中的抗原与包被抗体结合,然后加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合,生物素与亲和素特异性结合,形成免疫复合物。加入显色底物(TMB)后,TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。 使用酶标仪在450nm波长处测量OD值,抗原浓度与OD450值呈正比。通过绘制标准曲线,可以计算出样品中指标的浓度。 如何进行人脂阿拉伯甘露聚糖的检测? 以下是操作步骤: 1. 加入标准品:在标准品孔和样本孔中加入不同浓度的标准品。 2. 加入样品:在待测样品孔中先加入样品稀释液,然后再加入待测样品。加样时要轻轻晃动混匀。 3. 加入酶标试剂:每孔加入酶标试剂,除了空白孔。 4. 温育:封板后置于37℃温育60分钟。 5. 洗涤:揭掉封板膜,加入洗涤液,重复洗涤步骤5次。 6. 显色:加入显色剂A和显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。 7. 终止:加入终止液终止反应。 8. 测定:以空白孔调零,依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 人脂阿拉伯甘露聚糖的应用 人脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其在肺结核诊断中的价值 通过提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM),并将其用于血清标本检测,评价其在肺结核诊断中的价值。通过一系列方法,成功提取到LAM抗原,并用免疫金渗滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体。结果显示,血清LAM抗体检测对肺结核诊断具有较高的敏感性和特异性。 参考文献 [1] Kang PB, Azad AK, Torrelles JB, Kaufman TM, Beharka A, Tibesar E, DesJardin LE, Schlesinger LS. The human macro-phage mannose receptor directsMycobacterium tuberculosisli-poarabinomannan-mediated phagosome biogenesis. The Journal of Experimental Medicine. 2005. [2] Chan J, Fan XD, Hunter SW, Brenanan PJ, Bloom BR. Lipoara-binomannan, a possible virulence factor involved in persistence of Mycobacterium tuberculosis within macrophages. Infection and Immunity. 1991. [3] Patel VB, Bhigiee Al, Paruk HF, Singh R. Utility of a novel lipoarabinomannan assay for the diagnosis of tuberculous men-ingitis in a resource-poor high-HIV prevalence setting. Cerebrospinal Fluid Res. 2009. [4] Hamasur B, Kallenius G, Svenson SB. A new rapid and simple method for large-scale purification of mycobacterial lipoarabinomannan. FEMS Immunology and Medical Microbiology. 1999. [5] 彭荣, 乐军, 金瑞良, 景玲杰, 韩敏. 脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其对肺结核的诊断价值. 中国防痨杂志, 2011, 33(03): 149-152.查看更多
如何制备2-溴-5-氟苯甲酸乙酯? 2-溴-5-氟苯甲酸乙酯是一种有机中间体,可以通过不同的方法合成。其中一种方法是通过2-溴-5-氟苯甲酸与乙醇进行酯化反应,或者通过5-氟苯甲酸乙酯与NBS进行溴代反应。 制备方法一 将2-溴-5-氟苯甲酸(1.0 g,4.56 mmol),乙醇(10 mL)和少量的H 2 SO 4 混合物置于15 mL压力管中,进行回流反应。反应12小时后,将反应混合物冷却至室温,并加入饱和碳酸氢钠溶液进行中和。然后用乙酸乙酯进行萃取,干燥后通过旋转蒸发得到2-溴-5-氟苯甲酸乙酯。 制备方法二 将5-氟苯甲酸乙酯(1.68 g,1.0当量),NBS(1.87克,1.05当量),Pd(OAc) 2 (78.5毫克,0.035当量)和Na 2 S 2 O 8 (2.86 g,1.2当量)溶解在二氯乙烷(12 mL)中,然后加入TfOH(2.2mL,2.5当量)。将反应混合物在80℃下搅拌9小时。反应完成后,将混合物冷却至室温,并加入饱和碳酸氢钠溶液进行中和。然后用二氯甲烷稀释反应混合物,并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次。将有机相经过Na 2 SO 4 干燥,并通过旋转蒸发仪减压浓缩。最后,通过硅胶纯化得到2-溴-5-氟苯甲酸乙酯(产率为70%)。 参考文献 [1] Md, Emdadul, Hoque, et al. Noncovalent Interactions in Ir-Catalyzed C–H Activation: L-Shaped Ligand for Para-Selective Borylation of Aromatic Esters[J]. J.am.chem.soc, 2017. [2] Sun X Y , Sun Y H , Rao Y . A gram-scale synthesis of multi-substituted arenes via palladium catalyzed C–H halogenation[J]. Chinese Chemical Letters, 2014, 25(5):667-669. 查看更多
胡椒醇的合成及生产设备? 胡椒醇的概述 胡椒是一种传统中药,属于胡椒科植物。胡椒的成熟果实含有生物碱、挥发油、木脂素、有机酸、酚类化合物和微量元素。胡椒醇是从胡椒中提取得到的化合物,具有两个电化学氧化信号。胡椒醇常被用作胡椒醛的起始原料。 胡椒醇的合成 胡椒醇的合成方法是将十硼烷和3-硝基苯乙酮与胡椒醛反应,经过一系列的化学反应得到胡椒醇。具体的合成路线请参考图1。 胡椒醇的生产设备 胡椒醇的生产过程中需要剥离胡椒的外壳,然而传统方法中将剥离后的外壳直接焚烧,造成资源的浪费和制造成本的增加。最近研究人员提出了一种废料循环利用装置,可以将剥离的外壳导入碾碎装置进行碾碎工作,将外壳废料碾碎成肥料,实现胡椒醇的废料循环利用,从而降低制造成本。 参考文献 [1] F. Cortes-Salazar, E. Avella-Moreno, M.T. Cortes, M.F. Suarez-Herrera, Study of the electrochemical oxidation process of 3,4-(methylenedioxy)phenylmethanol in non-aqueous solvents, JOURNAL OF ELECTROANALYTICAL CHEMISTRY 606(1) (2007) 1-7. [2] A. Srinivas, M. Sunitha, Synthesis of piperonyl triazoles as anti-microbial agents, INDIAN JOURNAL OF CHEMISTRY SECTION B-ORGANIC CHEMISTRY INCLUDING MEDICINAL CHEMISTRY 55(1) (2016) 102-109. [3] Borzatta, Valerio; et al. Process for synthesising heliotropine (piperonal) and its derivatives from corresponding chloromethyl analogs via acetoxylation, hydrolysis, and oxidation. World Intellectual Property Organization, WO2005042512 A1 2005-05-12. [4] 樊彬. 一种用于生产胡椒醇的运送装置[P]. 福建:CN207191125U,2018-04-06. 查看更多