ATP调节钾离子通道ROM K抗体的特性与应用? 背景 [1-3] ATP调节钾离子通道ROM K抗体是一种能够特异性结合ATP调节钾离子通道ROM K的多克隆抗体。这些抗体由成千上万种不同的免疫球蛋白(Ig)分子组成,它们在形状、大小、结构和氨基酸组成上有相似之处,但也存在差异。抗体与抗原的结合具有特异性,这是因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位。同时,抗体本身也是一种蛋白质,对异种动物来说,它也是抗原。 ATP调节钾离子通道ROM K蛋白是一种完整的膜蛋白和内向整流型钾通道。它被内部ATP激活,可能在细胞内钾稳态中发挥重要作用。该基因的突变与产前Bartter综合征有关,该综合征的特征包括食盐浪费、低钾性碱中毒、高钙尿症和低血压。已经发现了该基因的多个转录物变体。 应用 [4][5] 用于配体门控钾离子通道MthK的结构生物学研究 钾离子通道在生物体的生命活动中起着重要作用,如调节膜电位、神经传导、心脏搏动等。配体门控的钾离子通道是钾离子通道的一类重要类型。MthK通道是一种钙激活的配体门控钾离子通道,最早从古生甲烷杆菌中发现。本研究以MthK为研究对象,通过生物化学和X-射线晶体学等方法,探索了MthK通道的门控机制和通道膜孔的异常摩尔分数效应(AMFE)机制。 本研究的目标是解析MthK离子通道蛋白在封闭状态下的结构,以及带有一个突变(F232A)的门控环和通道孔部分在不同离子组合下的结构。通过基因工程技术对MthK基因进行定点突变,构建表达质粒,然后利用原核表达系统大量表达突变体MthK蛋白。通过纯化和晶体衍射等方法,获得了MthK通道的结构信息。 参考文献 [1] Crystal Structure of a Ba 2+-Bound Gating Ring Reveals Elementary Steps in RCK Domain Activation[J]. Frank J.Smith, Victor P.T.Pau, Gino Cingolani, Brad S.Rothberg. Structure. 2012(12) [2] TPC Proteins Are Phosphoinositide-Activated Sodium-Selective Ion Channels in Endosomes and Lysosomes[J]. Xiang Wang, Xiaoli Zhang, Xian-ping Dong, Mohammad Samie, Xinran Li, Xiping Cheng, Andrew Goschka, Dongbiao Shen, Yandong Zhou, Janice Harlow, Michael X.Zhu, David E.Clapham, Dejian Ren, Haoxing Xu. Cell. 2012(2) [3] An Epilepsy/Dyskinesia-Associated Mutation Enhances BK Channel Activation by Potentiating Ca 2+Sensing[J]. Junqiu Yang, Gayathri Krishnamoorthy, Akansha Saxena, Guohui Zhang, Jingyi Shi, Huanghe Yang, Kelli Delaloye, David Sept, Jianmin Cui. Neuron. 2010(6) [4] On the Origin of Ion Selectivity in the Cys-Loop Receptor Family[J]. Steven M.Sine, Hai-Long Wang, Scott Hansen, Palmer Taylor. Journal of Molecular Neuroscience. 2010(1) [5] 付权.配体门控钾离子通道MthK的结构生物学研究[D].浙江大学,2013.查看更多