如何制备4-碘-5-甲基异恶唑并应用于药物合成领域? 概述 [1][2] 4-碘-5-甲基异恶唑是一种有机中间体,常用于药物合成。它可以通过5-甲基异恶唑与N-碘代丁二酰亚胺碘代反应制备得到。 制备 [1] 制备4-碘-5-甲基异恶唑的方法如下:将5-甲基异恶唑(820.6μL,10.0mmol,1.0当量)缓慢加入到NIS(2.25g,10mmol,1.0当量)在三氟乙酸(10mL)中的溶液中。在室温下搅拌1小时后,通过加入H 2 O(50mL)小心地淬灭反应。加入己烷(50mL),然后加入固体NaHSO 3 (以减少残留的碘,如颜色所示)。 分离各层,用H 2 O淬灭,然后用盐水洗涤有机物,干燥并浓缩,得到澄清无色油状物(1.68g,80%),其无需进一步纯化即可使用。 Rf 0.38(10%EtOAc /己烷); IR(薄膜)1588,1466,1060cm -1 ; 1 H NMR(500MHz,CDCl 3 )δ8.14(s,1H,ArH),2.48(s,3H,CH 3); 13 C NMR(125MHz,CDCl 3 )δ170.2,154.8,54.9,11.9; HRMS(ESI-TOF)m/z计算值C4H5INO([M+H] + )209.9410,实测值209.9410。 应用 [2] 研究表明,4-碘-5-甲基异恶唑可以与2,4-二氯嘧啶偶联,用于制备异恶唑联嘧啶类化合物。 主要参考资料 [1] Jui N T , Lee E C Y , Macmillan D W C . Enantioselective Organo-SOMO Cascade Cycloadditions: A Rapid Approach to Molecular Complexity from Simple Aldehydes and Olefins[J]. Journal of the American Chemical Society, 2010, 132(29):10015-10017. [2] PCT Int. Appl., 2016044781, 24 Mar 2016查看更多
如何制备2-三氟甲基苯腈? 2-三氟甲基苯腈是一种常用的医药合成中间体,可以通过不同的方法制备得到。 制备方法一 首先,将2-三氟甲基苯甲醛(2.0mmol,1.0当量),H 2 NOH·HCl(153mg,2.2mmol),Na 2 CO 3 (117mg,1.1mmol)和DMSO(10mL,0.2M)加入烘箱干燥的配有搅拌棒的反应管(30mL)中。在室温下反应30-60分钟,并通过TLC监测反应进程。当醛完全反应后,添加另一部分Na 2 CO 3 (1.06g,10mmol),用塑料塞子盖住反应管。然后,在室温下缓慢鼓泡SO2F2气体,搅拌12小时。接下来,用水稀释反应混合物,用二氯甲烷(3×20mL)萃取混合物,用盐水洗涤有机层,用无水Na 2 SO 4 干燥混合物,最后将混合物浓缩至干。通过硅胶色谱法纯化残留物,使用石油醚/乙酸乙酯=10:1(v/v)的混合物作为洗脱剂,得到2-三氟甲基苯腈。 制备方法二 首先,将2-三氟甲基碘苯(0.50mmol),[(2,2'-bipyridine) 2 Cu][O 2 CCF 2 Cl](631mg,1.25mmol,2.5当量),NaOH(60mg,1.5mmol),CsF(228mg,1.50mmol))和DMF(6mL)加入装有搅拌棒的特氟龙螺帽的反应管中。密封试管,并将溶液放入预热的75°C油浴中反应3小时。然后,从油浴中取出试管,冷却至室温,并加入(三氟甲氧基)苯(65mL,0.50mmol)作为内标。最后,通过硅藻土层过滤反应混合物,得到2-三氟甲基苯腈。 参考文献 [1] Cascade Process for Direct Transformation of Aldehydes (RCHO) to Nitriles (RCN) Using Inorganic Reagents NH2OH/Na2CO3/SO2F2 in DMSO [2] Trifluoromethylation of (hetero)aryl iodides and bromides with copper(I) chlorodifluoroacetate complexes 查看更多
兔抗AKT多克隆抗体的应用及检测原理? 兔抗AKT多克隆抗体是一种可以特异性结合Anti-JAK1的多克隆抗体,主要用于检测Anti-JAK1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。 检测原理:双抗体夹心法测定标本中Anti-JAK1水平。用纯化的Anti-JAK1抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Anti-JAK1,再与HRP标记的Anti-JAK1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Anti-JAK1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中Anti-JAK1浓度。 PKB是一种相对分子约为6.0×10^4的Ser/Thr蛋白激酶,与PKA和PKC均有很高的同源性,故又称为PKA与PKC的相关激酶(related to the A and C kinase,RAC-PK),该激酶被证明是反转录病毒安基因v-akt的编码产物,故又称Akt。 蛋白激酶B,即Akt,又称PKB或Rac,在细胞存活和凋亡中起重要作用。胰岛素等生长和存活因子都可以激活Akt信号途径。Akt的Thr308可以被PDK1磷酸化。PI3 Kinase-Akt信号途径是一条经典的信号途径,LY294002等PI3 kinase的抑制剂抑制PI3 kinase时,通常就会抑制Akt激活。 兔抗AKT多克隆抗体的应用研究 MiR-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌侵袭转移的机制研究 探讨miR-21、PTEN/PI3K/AKT信号转导通路相关蛋白在结直肠癌(CRC)中的表达及临床意义。 方法:应用实时荧光定量RT-PCR(real-time fluorescence quantitiveRT-PCR,real time FQ-PCR)检测结直肠癌组织中的miR-21表达水平,应用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)SP法检测结直肠癌组织中PTEN、PI3K、AKT的表达水平。 并探索他们之间的关系,以及与临床病理参数之间的相关性。结果:与癌旁正常组织比较,miR-21的表达水平明显增高(p<0.05),PTEN的表达水平明显降低(p<0.05),PI3K、AKT的表达水平均明显增高(p<0.05),miR-21、PTEN、PI3K、Akt表达与患者年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。 miR-21与PTEN的表达之间呈负相关(r=-0.396,p<0.05);PTEN与PI3K蛋白阳性表达之间呈负相关(r=-0.354,P<0.05);PTEN与Akt蛋白阳性表达之间呈负相关(r=-0.365,P<0.05);PI3K与Akt蛋白阳性表达之间呈正相关(r=0.645,P<0.05)。结论:miR-21可通过抑制PTEN激活P13K/Akt信号通路,进而促进CRC的发生发展。 参考文献 [1]miR-21 modulates chemosensitivity of tongue squamous cell carcinoma cells to cisplatin by targeting PDCD4[J].Wenhao Ren,Xiaolong Wang,Ling Gao,Shaoming Li,Xiaojing Yan,Jin Zhang,Chen Huang,Yincheng Zhang,Keqian Zhi.Molecular and Cellular Biochemistry.2014(1-2) [2]Cancer statistics,2014[J].Rebecca Siegel,Jiemin Ma,Zhaohui Zou,Ahmedin Jemal.CA A Cancer Journal for Clinicians.2014(1) [3]The MicroRNA-21/PTEN Pathway Regulates the Sensitivity of HER2-Positive Gastric Cancer Cells to Trastuzumab[J].Kojiro Eto,Masaaki Iwatsuki,Masayuki Watanabe,Satoshi Ida,Takatsugu Ishimoto,Shiro Iwagami,Yoshifumi Baba,Yasuo Sakamoto,Yuji Miyamoto,Naoya Yoshida,Hideo Baba.Annals of Surgical Oncology.2014(1) [4]Targeting miR-21 enhances the sensitivity of human colon cancer HT-29 cells to chemoradiotherapy in vitro[J].Jun Deng,Wan Lei,Jian-Chun Fu,Ling Zhang,Jun-He Li,Jian-Ping Xiong.Biochemical and Biophysical Research Communications.2013 [5]熊兵红.MiR-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调控结直肠癌侵袭转移的机制研究[D].重庆医科大学,2014.查看更多