沙氏琼脂培养基的应用研究? 沙氏琼脂培养基(SDA)是一种常用于分离培养黑曲霉和白念珠菌的培养基。此外,它还可以用于一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测。沙氏琼脂培养基的配方中,蛋白胨提供碳源和氮源,葡萄糖提供能源,琼脂是培养基的凝固剂,氯霉素则可以抑制细菌的生长。 沙氏琼脂培养基的使用方法 1、将65.1g的沙氏琼脂培养基加入1L的蒸馏水或去离子水中,搅拌加热至完全溶解,然后分装至三角瓶中。将三角瓶在115℃高压条件下灭菌15分钟。 2、取样液接种于平皿中,每个平皿中加入1mL的样品,然后加入约15mL已溶化并保温至45℃左右的沙氏琼脂培养基,摇匀后凝固。将平皿置于25±2℃下培养7天。 3、在培养7天后,观察平板上的菌落数,并计算平均值。 白念珠菌是一种条件致病菌,平时存在于人体的皮肤、粘膜、消化道及其他脏器中。当机体抵抗力降低时,白念珠菌会繁殖并引发疾病。 沙氏琼脂培养基在念珠菌耐药研究中的应用 念珠菌ERG3基因突变对抗真菌药物耐药的作用研究 侵袭性真菌感染的发病率不断上升,其中念珠菌感染占主要比例,尤其是白念珠菌感染。然而,由于抗真菌药物的预防性使用,非白念珠菌尤其是对氟康唑天然耐药的克柔念珠菌感染也呈上升趋势。 随着白念珠菌和克柔念珠菌对唑类抗真菌药物耐药现象的加剧,有必要深入研究其耐药机制。 本研究旨在了解白念珠菌和克柔念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性,并对白念珠菌耐药菌株和敏感菌株的ERG3基因进行扩增、测序和生物信息学分析,以明确白念珠菌ERG3基因突变与抗真菌药物耐药之间的关系。 研究方法包括收集患者无菌体液标本,使用沙氏琼脂培养基、玉米吐温80琼脂培养基、CHROMagar念珠菌显色培养基和API 20C AUX鉴定系统进行念珠菌的分离和鉴定。从中选取35株白念珠菌和20株克柔念珠菌进行体外药物敏感性试验,并对白念珠菌ERG3基因进行PCR扩增、测序,最后应用BLAST软件进行比对分析。 研究结果显示,在163株检出的真菌中,白念珠菌占54.61%,非白念珠菌占42.94%,霉菌占2.45%。其中,非白念珠菌中克柔念珠菌的比例最高,为16.57%。 通过Logistic多因素回归分析,研究还发现性别、病程、体温、预防性使用抗真菌药物、免疫抑制剂、有创伤的检查和治疗、患者预后和地域因素是住院患者无菌体液标本中侵袭性真菌感染的独立危险因素。 参考文献 [1] Candida bloodstream infections: comparison of species distribution and resistance to echinocandin and azole antifungal agents in Intensive Care Unit (ICU) and non-ICU settings in the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program (2008-2009) [J]. Michael A. Pfaller, Shawn A. Messer, Gary J. Moet, Ronald N. Jones, Mariana Castanheira. International Journal of Antimicrobial Agents. 2011(1). [2] Epidemiology and treatment approaches in management of invasive fungal infections [J]. James Ito, Kriengkauykiat, Sanjeet Dadwal, Kriengkauykiat. Clinical Epidemiology. 2011(Issu). [3] Trends in the postmortem epidemiology of invasive fungal infections at a university hospital [J]. T. Lehrnbecher, C. Frank, K. Engels, S. Kriener, A. H. Groll, D. Schwabe. Journal of Infection. 2010(3). [4] Antifungal drug resistance of oral fungi [J]. Masakazu Niimi, Norman A. Firth, Richard D. Cannon. Odontology. 2010(1). [5] 乔祖莎. 念珠菌ERG3基因突变对抗真菌药物耐药的作用[D]. 山西医科大学, 2012. 查看更多