什么是HUH-7人肝癌细胞? HUH-7人肝癌细胞是一种人类肝细胞癌细胞系,最早于1982年从一名56岁的日本男性的肝脏肿瘤中提取。这种细胞系由上皮样和致瘤细胞组成,是一种永生细胞系。大多数HUH-7细胞具有高度异质性,染色体数在55至63之间。这些细胞可以附着在烧瓶或平板的表面。 HUH-7人肝癌细胞的应用领域是什么? HUH-7细胞可以产生甲胎蛋白、胰酶α抗体、血浆铜蓝蛋白、纤维蛋白原和纤连蛋白等物质。因此,在涉及相关研究的过程中,基因编辑敲除细胞HUH-7可以提供帮助。HUH-7作为成人肝细胞癌细胞系,在丙型肝炎和登革热病毒等领域得到广泛应用,尤其是在涉及丙型肝炎基因敲除的研究中。实验室培养HUH-7细胞,并利用CRISPR/Cas9技术创建CRISPR敲除细胞,可以开展相关研究。近年来,引入HUH-7细胞系使得筛选针对实验室培养的丙型肝炎病毒的候选药物得以顺利开展研究,并且为开发针对丙型肝炎的新药物提供了可能。 HUH-7人肝癌细胞在肝炎病毒研究中的作用是什么? HUH-7对丙肝病毒(HCV)非常敏感,迄今为止,HUH-7及其衍生细胞株是唯一能够有效复制丙型肝炎病毒(HCV)的细胞系。因此,HUH-7常被用作研究HCV的模型。它可以用于筛选抗丙型肝炎病毒的候选药物,并开发抗丙型肝炎的新药。 HUH-7人肝癌细胞在异种移植模型中的应用是什么? HUH-7可以用于建立细胞系来源的异种移植(Cell Line Derived Xenograft, CDX)小鼠模型,即HUH-7 CDX模型。这个模型可以用于研究临床前肿瘤生长抑制。 HUH-7人肝癌细胞在药物研究中的作用是什么? HUH-7可以用于研究肝癌药物的药效、代谢,并探讨药物的分子机制。 将HUH-7人肝癌细胞与CRISPR-Cas9技术相结合,可以为癌症、药物代谢和冠状病毒等研究提供什么新思路? 利用CRISPR/Cas9敲除HUH-7的病毒复制关键宿主因子,可以探索冠状病毒复制的关键基因。 主要参考文献 [1] Qiu BQ, Lin XH, Ye XD, et al. Long non-coding RNA PSMA3-AS1 promotes malignant phenotypes of esophageal cancer by modulating the miR-101/EZH2 axis as a ceRNA. Aging (Albany NY). 2020;12(2):1843‐1856. [2] Zhao, Wen-Si et al. “Genome-scale CRISPR activation screening identifies a role of ELAVL2-CDKN1A axis in paclitaxel resistance in esophageal squamous cell carcinoma.” American journal of cancer research vol. 9,6 1183-1200. 1 Jun. 2019 查看更多
如何选择合适的内参抗体用于免疫学实验? ANTI-BETA-ACTIN抗体是一种特异性结合BETA-ACTIN的免疫抗体,可用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。β-actin是一种由375个氨基酸组成的蛋白,分子量约为42-43kDa。作为内参,β-actin在大多数组织和细胞中广泛分布,表达量丰富,占所有细胞总蛋白的50%。然而,在某些情况下,如脂肪组织或细胞内,β-actin的表达量较低。 选择合适的内参抗体需要考虑目的蛋白的大小。推荐选择与目的蛋白分子量相差5KD以上的内参。由于β-actin的分子量约为42kD,因此该内参抗体不适合用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验。此外,虽然β-actin是最常用的内参抗体之一,但在某些条件下,样品间的β-actin含量也会发生变化。特别需要注意的是,在脂肪组织中,β-actin的表达量非常低,不适合作为内参。 应用于大鼠GAPDH、β-actin mRNA降解与死亡时间推断的相关性研究 该研究利用一步法荧光标记逆转录-聚合酶联反应技术,检测了大鼠死后不同时间间隔脑、肝、脾、肾中GAPDH和β-actin mRNA的降解情况,旨在为死后时间的推断提供新的指标。 通过观察大鼠死后不同时间脑、肝、脾、肾中GAPDH和β-actin mRNA的降解规律,确定了各组织中GAPDH和β-actin mRNA的检测时限,并探讨了它们在死后时间推断中的应用价值。实验结果显示,大鼠死后7天脑组织、48小时肝组织、32小时脾组织、40小时肾组织内均可检测到GAPDH mRNA,8天脑组织、72小时肝组织、40小时脾组织、48小时肾组织内均可检测到β-actin mRNA,且它们的量均呈规律性下降趋势。 参考文献 [1] Is there recent progress in the estimation of the postmortem interval by means of thanatochemistry?[J]. Burkhard Madea. Forensic Science International. 2005(2) [2] Artificial Neural Network and Tissue Genotyping of Hepatocellular Carcinoma in Liver-Transplant Recipients: Prediction of Recurrence[J]. Hector Rodriguez-Luna, Hugo E. Vargas, Thomas Byrne, Jorge Rakela. Transplantation. 2005(12) [3] Artificial neural networks in urolithiasis[J]. Prabhakar Rajan, David A. Tolley. Current Opinion in Urology. 2005(2) [4] Estimation of the time since death in the early post-mortem period[J]. Forensic Science International. 2004(2) [5] 朱方成. 大鼠GAPDH、β-actin mRNA降解与死亡时间推断的相关性研究[D]. 华中科技大学, 2006. 查看更多