生物素标记肿瘤坏死因子抗体的应用及检测原理? 生物素标记肿瘤坏死因子抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合肿瘤坏死因子,并广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理是利用双抗体夹心法测定标本中肿瘤坏死因子水平。首先,将纯化的肿瘤坏死因子抗体包被在微孔板上,形成固相抗体。然后,依次加入肿瘤坏死因子和HRP标记的肿瘤坏死因子抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色反应。最终,通过酶标仪测定吸光度(OD值)并利用标准曲线计算样品中肿瘤坏死因子浓度。 抗体生物素-亲和素系统是一种高亲合力的结合系统,可以与各种标记物结合,并具有多级放大效应。这使得生物素标记肿瘤坏死因子抗体在微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究中更加灵敏和可靠。 α肿瘤坏死因子(TNFα)是一种由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子,参与正常炎症反应和免疫反应。在许多病理状态下,TNFα的产生会增加,如败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病。重症类风湿关节炎患者的血液和关节中也可发现增多的肿瘤坏死因子。 非致死性机械创伤大鼠血清肾上腺素、肿瘤坏死因子-α的变化及其意义研究 本研究通过制备大鼠非致死性机械创伤模型,研究了创伤后大鼠血清肾上腺素(EPI)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化,并探讨了它们与肺损伤的关系,以及可能的机制和临床意义。 实验使用8周龄健康雄性Wistar大鼠,将其随机分为伪创伤组、创伤组、正常对照组、盐酸肾上腺素组和肿瘤坏死因子-α组。其中,伪创伤组和创伤组制备非致死性机械性创伤模型;盐酸肾上腺素组和肿瘤坏死因子-α组通过腹腔注射制备药物肺损伤模型;正常对照组注射生理盐水作为对照。在造模成功后6小时,采集大鼠腹主动脉血液,观察肺组织病理变化,检测肺组织中细胞凋亡指数,并测定血清中肾上腺素和TNF-α的含量变化。 结果显示,创伤组的血清肾上腺素含量(1.7306±0.1394 ng/ml)明显高于伪创伤组(0.1712±0.0193 ng/ml),差异具有统计学意义(p<0.01)。 参考文献 [1]ATTENUATION OF REPERFUSION LUNG INJURY AND APOPTOSIS BY A2A ADENOSINE RECEPTOR ACTIVATION IS ASSOCIATED WITH MODULATION OF Bcl-2 AND Bax EXPRESSION AND ACTIVATION OF EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASES[J].Julia Rivo,Evelyne Zeira,Eithan Galun,Sharon Einav,Joel Linden,Idit Matot.Shock.2007(3) [2]The key role of apoptosis in the pathogenesis and treatment of pulmonary hypertension[J].Emin Gurbanov,Xiao Shiliang.European Journal of Cardio-Thoracic Surgery.2006(3) [3]Systemic Inflammation and Disseminated Intravascular Coagulation in Early Stage of ALI and ARDS:Role of Neutrophil and Endothelial Activation[J].Satoshi Gando,Takashi Kameue,Naoyuki Matsuda,Atsushi Sawamura,Mineji Hayakawa,Hirokatsu Kato.Inflammation.2004(4) [4]Lung Inflammatory Responses and Hyperinflation Induced by an Intratracheal Exposure to Lipopolysaccharide in Rats[J].Anne-Helene Jansson,Christina Eriksson,Xiangdong Wang.Lung.2004(3) [5]贾国平.非致死性机械创伤大鼠血清肾上腺素、肿瘤坏死因子-α的变化及其意义[D].山西医科大学,2011.查看更多