志贺氏菌显色培养基的应用及相关研究? 背景信息 志贺氏菌显色培养基是一种用于快速检测食品和病人粪便样品中志贺氏菌的培养基。该培养基能够区分不同细菌的显色特征,如志贺氏菌显白色或无色,大肠杆菌和大肠菌群显绿色或黄色,沙门氏菌显黄色或无色等。此外,该培养基还能抑制变形杆菌和铜绿假单胞菌的生长,因此被广泛应用于快速检测领域。 培养基的原理是通过提供碳氮源和微量元素,维持均衡的渗透压,使用凝固剂凝固培养基,抑制剂抑制杂菌的生长,以及pH指示剂和混合色素对应的酶反应来实现显色。具体配方包括蛋白胨、酵母膏粉、氯化钠、糖类、琼脂、酚红、混合色素、抑制剂和添加剂。 使用方法 1. 称取适量的志贺氏菌显色培养基,加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,冷却至适宜温度备用。 2. 溶解添加剂并过滤除菌,将其加入已冷却的培养基中,充分混匀后倾注于平板。 3. 取样及前增菌后,将增菌液划线接种于制备好的培养基上,于适宜温度下培养一段时间后观察结果。 应用及相关研究 用于水中肠道致病菌活的非可培养状态及致病性的研究 该培养基被应用于研究肠道致病菌在水中的非可培养状态及其致病性。研究内容包括探索肠道细菌进入非可培养状态的诱导因素、研究非可培养状态下细菌的细胞毒性和蛋白表达特性、以及寻找使非可培养状态的细菌复苏的条件。 研究方法包括使用低温、低营养、低渗透压和氯处理等方式诱导细菌进入非可培养状态,使用平板计数法和核酸荧光染色法检测细菌数量和活菌数量,利用细胞培养和蛋白质分析技术研究细菌的毒性和蛋白表达特性,以及采用复苏培养方法提高非可培养状态细菌的检出率。 参考文献 [1] LysM, a widely distributed protein motif for binding to (peptido)glycans[J]. Jan Kok. Molecular Microbiology. 2008(4) [2] Resuscitation of Viable But Not Culturable Sinorhizobium meliloti 41 pRP4-luc: Effects of Oxygen and Host Plant[J]. Marina Basaglia, Silvana Povolo, Sergio Casella. Current Microbiology. 2007(3) [3] Survival of enterococcal species in aquatic environments[J]. Maria del Mar Lleò, Barbara Bonato, Dennis Benedetti, Pietro Canepari. FEMS Microbiology Ecology. 2005(2) [4] Solid phase cytometry as a tool to detect viable but non-culturable cells of Campylobacter jejuni[J]. I. Cools, E. D'Haese, M. Uyttendaele, E. Storms, H. J. Nelis, J. Debevere. Journal of Microbiological Methods. 2005(2) [5] 孙宗科. 水中肠道致病菌活的非可培养状态及致病性的研究[D]. 中国疾病预防控制中心, 2009. 查看更多
如何制备L-氮杂环丁烷-2-羟基? 氮杂环丁烷(Azetidine)是一种重要的饱和四元含氮杂环化合物。它在1888年首次通过化学方法合成出来,并经过了130年的发展,现在已经开发出了多种合成方法。此外,氮杂环丁烷结构也被广泛应用于许多天然和合成的生物活性或药物活性化合物中。其中,L-氮杂环丁烷-2-羧酸(又称S-氮杂环丁烷-2-羧酸或L-Aze或L-A-2-C)是一种非常重要的医药中间体。而(S)-1-BOC-2-氮杂环丁烷甲醇是一种与之相关的化合物。 制备方法 制备L-氮杂环丁烷-2-羟基的方法如下: 首先,以2-吡咯烷酮为原料,经过硫酸二甲酯和三乙基氧氟硼酸盐的处理,得到2-甲氧基吡咯啉和2-乙氧基-1-吡咯啉。然后,将产物与等量的N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)在四氯化碳溶剂中回流反应,得到3-溴-2-烷氧基-1-吡咯啉。接下来,在碱液中回流反应发生环化反应,得到L-氮杂环丁烷-2-羧酸。 其次,将L-氮杂环丁烷-2-羧酸置于甲醇溶液中,加入钯碳催化剂,并通入氢气,进行回流反应过夜。然后,冷却到室温,过滤、洗涤、收集沉淀并干燥,得到L-氮杂环丁烷-2-羟基。 最后,将L-氮杂环丁烷-2-羟基与等物质量的二碳酸二叔丁酯的甲醇溶液反应。加热到40-60℃,促使其溶解,然后加入甲醇,搅拌1小时。冷却到室温,继续搅拌16小时。最后,在真空下蒸发水分,过滤并用异丙醇洗涤,最终得到(S)-1-BOC-2-氮杂环丁烷甲醇。 参考文献 [1] Kirk I. New use of melagatran: WO, 2000041716[P]. 2000-01-13. 查看更多