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为什么高纯度的手性化合物在药学研究中如此重要? 高纯度的手性化合物对于化学、生物学以及药学都具有重要意义,特别是在药学研究中,对映体药物可以拓宽用途,减少剂量和代谢负担,提高活性和专一性,减少与其他药物的相互作用,并降低由其对映体可能引起的副作用。随着消旋体药物逐渐被淘汰,消旋体的拆分和手性化合物的合成就显得更为重要了。 右旋环氧氯丙烷作为一种重要的手性原料和合成中间体,在有机化工和制药领域发挥着日益重要的作用。外消旋环氧化合物的动力学拆分是获得光学活性环氧化合物的有效方法之一. 性质 溶解性:不溶 分子量:92.52420 熔点:?57 °C(lit.) 密度:1.183 g/mL at 25 °C(lit.) 沸点:92-93 °C360 mm Hg(lit.) 用途 右旋环氧氯丙烷作为潜在的代谢调节剂,可用以合成脂肪酸氧化抑制剂;用于Macquarimicins的全合全合成;用于对映选择性合成羟基异噁唑烷和(+)-顺式-sylvaticin(一种有潜力的抗肿瘤剂)的手性结构单元. 拆分方法 采用笼状烯胺和钴的复合物作催化剂,对混旋环氧氯丙烷进行动力学拆分,得到右旋环氧氯丙烷,光学纯度达到99%,可用于合成左卡尼汀. 查看更多
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聚蔗糖的应用领域有哪些? 简介 在交联剂的作用下,将小分子的蔗糖分子直接共聚而得到的高分子产物统称聚蔗糖,商品名为Ficoll或Dormacoll。目前,我国生产的具有国际先进水平的产品有:Ficoll-70,Ficoll-100,Ficoll-200,Ficoll-400,Ficoll-700,Ficoll-800等系列产品,常采用的是相对分子质量为400000的Ficoll-400. 应用情况 聚蔗糖具有粘度高、渗透压低的特点。在细胞的密度梯度分离、功能食品的添加剂等领域有所应用。比如用作细胞分离的密度梯度剂可以分离各种细胞包括血细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞、鼠肝细胞等。 聚蔗糖水凝胶的制备 准确称取5.0g聚蔗糖,置于三口烧瓶中,按一定配比加入蒸馏水,搅拌至聚蔗糖完全溶解,在搅拌下加入2.0mL环氧氯丙烷和2.0mL质量分数为50%的氢氧化钠,使氢氧化钠与环氧氯丙烷的摩尔比为1:1。继续搅拌0.5h,将粘稠的聚蔗糖溶液装入称量瓶中,置于一定温度的水浴中固化,4小时后取出凝胶。用去离子水浸泡除去未反应的单体,观察凝胶的固化程度及凝胶的强度,真空干燥至恒重后备用. 参考文献 [1]张春艳. 聚蔗糖缓释载体的研制[D]. 广西:广西大学,2012. DOI:10.7666/d.y2161103. 查看更多
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乳酸薄荷酯的制备与应用有哪些特点? 简述 乳酸薄荷酯(Menthyl Lactate,简称ML)又称为2-羟基丙酸-5-甲基-2-异丙基环己酯、乳酸孟酯、 乳酸薄荷酯等,是一种薄荷衍生物,属于清凉型产品,有轻微的薄荷香气,尝起来几乎没有味道,但伴有持久的,令人愉快的清凉效果,它被认定为极好的没有不良反应如灼烧感、刺激感和刺痛感的清凉剂,主要应用于日化产品、药物制备、口腔产品和糖果等产品。通常情况下,乳酸薄荷酯表现为无色液体或白色结晶,不溶于水,溶于乙醚、乙醇和油脂。 应用 为改善卷烟抽吸时容易产生的干燥感,增加卷烟的生津感和甜润感,提高卷烟抽吸舒适性,采用化学合成方法并选用合适的复配比例,制备得到具有较好清甜味的新型甜味剂——紫苏葶和乳酸薄荷酯复配物。将该甜味滴丸添加到卷烟滤棒中,通过烟气气流的带动缓慢释放出其中的甜味物质。对添加有该种滴丸的卷烟各项理化指标及烟气中甜味剂转移率进行测试评价。结果显示:在卷烟滤棒中添加0.15 mg/支的该新型甜味剂,烟气较协调,而且烟气变细腻柔和,有较强的清甜味,刺激性降低。烟支外观和常规理化指标均能满足产品要求,烟气中甜味剂有效成分转移率达到2.5‰以上. 除上述应用,在凉味剂领域,尤其是食品用复配凉味剂方面。针对现有的凉味剂清凉效果差,持续时间短问题,有关研究提出如下改进方案,其包括以下重量份的原料:乙基薄荷烷甲酰胺30-40份,N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺20-30份,乙酸薄荷酯15-20份,乳酸薄荷酯15-20份,薄荷酰胺5-10份,茶多酚1-5份,乳酸链球菌素0.1-0.5份,溶菌酶0.1-0.5份,吐温1-5份,黄原胶1-5份,碳酸氢钠1-5份,丙三醇2-8份。本发明的清凉效果持久,温和无刺激,制备方法简单. 制备与纯化 乳酸薄荷酯的制备与纯化包括以下步骤:(1)选取薄荷醇和乳酸直接酯化反应产生的包含乳酸薄荷酯的混合物,加入低极性烷烃,搅拌萃取;(2)用碱性饱和食盐水洗涤有机层至中性,静置分层,减压蒸干有机溶剂,得萃取浓缩物;(3)将萃取浓缩物溶于低级醇中配制成萃取物的醇溶液,然后上样至大孔树脂HP20层析柱中,随后用不同浓度的低级醇进行梯度洗脱,GC检测洗脱液,将乳酸薄荷酯段合并浓缩并回收溶剂得到乳酸薄荷酯粗品;(4)将乳酸薄荷酯粗品溶于异丙醇的水溶液中,过滤,将上清液降温进行析晶,过滤,烘干即得纯化的乳酸薄荷酯。该纯化方法选择性高,高效,成本低,所得乳酸薄荷酯纯度高. 参考文献 [1]宋旭艳,罗诚浩,岳海波,等.紫苏葶和乳酸薄荷酯滴丸在卷烟中的应用研究[J].香料香精化妆品, 2012(1):6.DOI:10.3969/j.issn.1000-4475.2012.01.003. [2]周泳含,陈清,周军学.一种食品用复配凉味剂及其制备方法:CN202211584163.X[P].CN115769883A. [3]杜阳吉,许锦雄,卫娜.一种乳酸薄荷酯的纯化方法:CN202011118987.9[P].CN112409179A. 查看更多
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1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯有哪些化学应用? 1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯是一种多卤代苯类化合物,其结构中的含有两个卤素原子,表现出丰富的化学转化性质,主要用于官能团化的三氟甲氧基取代苯类衍生物的制备,在有机化学基础研究和药物化学合成领域有一定的应用,例如有文献报道该物质可用于治疗阿尔茨海默病药物分子的结构改造。 化学性质 1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯结构中含有碘原子和溴原子,具有丰富的化学转化活性,它可在过渡金属例如钯或者铜的催化作用下和芳基硼酸,格式试剂,有机胺类物质或者酚类化合物发生交叉偶联反应,该类反应广泛地应用于碳碳和碳杂键的构建。 偶联反应 图1 1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯的偶联反应 在一个干燥的反应烧瓶中将1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯(2.0 g, 5.7 mmol)、硫苯甲酸 (0.67 ml, 5.7 mmol)、1,10-菲罗啉(0.21 g, 1.08 mmol)的甲苯溶液中加入DIPEA (2 ml)和CuI (0.11 g, 0.57 mmol)的混合溶液中。然后用鼓泡氩气的方式对反应混合进行脱气处理大约2 min,所得的反应混合物在110 ℃下于氩气氛围下剧烈搅拌单元大约24 h。反应结束后将反应混合物冷却至室温,然后将反应混合物通过硅藻土进行过滤处理并将所得的滤液在减压下进行浓缩处理,所得的残余物通过硅胶柱色谱法进行分离纯化(5% ~ 15%乙烷-己烷梯度)即可得到偶联的目标产物分子。[1] 化学应用 1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯在化学合成领域中主要用作有机合成的中间体,是许多三氟甲氧基取代的苯类衍生物的重要合成中间体。通过其与不同试剂的反应,可以引入不同的官能团从而合成具有特定结构和性质的有机化合物。有文献报道1-溴-3-碘-5-三氟甲氧基苯可用于治疗阿尔茨海默病的药物分子的结构改造,这表明它在药物化学合成领域具有一定的应用潜力。 参考文献 [1] Scott, Ian L.; et al, United States Patent, Patent Number:GB2463151.查看更多
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氯化铈有哪些性质和用途? 简介 氯化铈,化学式为CeCl?,通常指的是三氯化铈(III),是无水氯化铈或者氯化铈的多水化合物的简称。它是一种白色晶体,具有刺激眼睛、呼吸系统和皮肤的特性,因此在操作时需要穿戴适当的防护服。氯化铈具有多种物理和化学性质,如易溶于冷水(热水中分解)、乙醇和乙酸,不溶于四氯化碳和苯等有机溶剂。 氯化铈的性状 制备方法 碳酸铈与盐酸反应法:将碳酸铈溶解在盐酸中,蒸发至干,再将残渣与氯化铵混合,在赤热下煅烧得到氯化铈。这种方法操作简单,原料易得,是工业化生产常用的方法之一。 铈金属与氯气反应法:通过铈金属与氯气直接反应,生成氯化铈。这种方法需要严格控制反应条件,以防止生成其他副产物。 用途 催化剂领域:氯化铈是石油催化剂和汽车尾气催化剂的重要成分。在石油加工过程中,氯化铈能够提高催化裂化反应的活性和选择性,从而提高产品质量和收率。在汽车尾气处理中,氯化铈能够催化氮氧化物等有害气体的转化,减少环境污染。 金属制备:氯化铈是制备金属铈及其化合物的重要原料。通过电解法或金属热还原法,可以将氯化铈转化为金属铈,进而用于制备其他铈基材料。 有机合成:无水氯化铈在有机合成中展现出良好的应用前景。它可以与有机锂试剂和格氏试剂共用,用于羰基的亲核加成反应,有效抑制副反应的发生,提高产率和选择性。此外,氯化铈还可以促进多种有机反应,如烷基化、酰化等,为有机合成提供了有力的工具。 医药领域:氯化铈在医药领域也有一定应用。它可以作为药物合成的中间体,参与合成治疗糖尿病、皮肤病等疾病的药物。同时,氯化铈还具有一定的抗菌和抗氧化性能,有望在医药领域发挥更广泛的作用。 参考文献 [1]储钟稀,牟梦华.氯化铈对螺旋藻光合放氧,色素和蛋白质形成的影响[J].中国稀土学报, 1994, 12(4):344-347. [2]程驿,刘峁子,李友,等.经消化道吸收的氯化铈诱导Wistar大鼠红细胞膜"畴"结构的形成[J].科学通报, 1999, 44(14):4. [3]张云霞.氯化铈对镁合金在NaCl溶液中的缓蚀作用[J].腐蚀与防护, 2011, 32(6):4 查看更多
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如何合成2,2′,4′-三氯苯乙酮? 本文将介绍高效合成 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的方法,通过这项研究,希望能够为 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的合成提供新思路和新方法。 背景:目前, 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的生产主要是以间二氯苯为起始原料,在路易斯酸(如 ZnCl2 、 AlCl3 、 FeCl3 及 TiCl4 等)催化下,与氯乙酰氯经过傅克酰基化反应得到。然而,该方法存在一些弊端,比如大部分催化剂都有自身的局限性,如腐蚀性强、无法回收、产生污染环境的酸性物质等。此外,反应过程中容易产生同分异构体,而异构体的沸点与目标产物极为接近,因此单纯通过精馏和重结晶方式很难将其分离提纯。 合成: 1. 方法一: 以间二氯苯为起始原料,负载型三氯化铝为催化剂,与氯乙酰氯经傅克酰基化反应和结晶分离提纯等过程得到高含量的 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮,收率为 92.01%( 以间二氯苯计 ) ,纯度在 99.8% 以上。该路线原料易得,操作方便,具有一定的工业化应用前景。具体步骤如下: ( 1 )负载型催化剂的制备 取 15g 聚苯乙烯树脂 (Ps) ,放入研钵中研碎至粉末状,过 80 目筛,得到较为均匀的粉末载体。将 30g 无水 AlCl3 、预处理好的载体加入到 150mL 二氯甲烷中,加热至回流 1h 。待冷却后加 150mL 水至混合液中,水解过量的 AlCl3 ,搅拌混合液至深橙色逐渐变为浅黄色。过滤上述聚合相,依次用水和丙酮洗涤,聚合物在 60℃ 真空烘箱中干燥 12h ,即得到 AlCl3/Ps 负载型催化剂。 ( 2 ) 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的合成 将间二氯苯 20g 和二氯甲烷 100g 加入到 250mL 干燥的烧瓶中,开启搅拌,加入负载型催化剂 30g ,室温滴加氯乙酰氯 20g ,滴加过程控制温度不超过 30℃; 滴完后 30℃ 保温,中控检测至间二氯苯质量分数 <0.3% ,停止反应,过滤回收催化剂,然后用 100g 5% 的稀盐酸水溶液对反应液进行淬灭,分层,有机层用 2×50mL 水水洗,废水用少量二氯甲烷萃取,合并有机层,减压浓缩得到棕褐色产品 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮 28.0g ,气相色谱法检测产品纯度为 97.9% ,产品中同分异构体的质量分数为 1.5% ,收率为 92.01%( 以间二氯苯计 ) 。 ( 3 ) 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的结晶提纯 开启水浴,升温至 54℃ ,接冷凝管开启热水循环,从底部往倒置的冷凝管 ( 顶部加塞子 ) 倒入 100g 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮物料,待完全溶解,降温至 53℃ 保温 30min ,待不再结晶时,降至 52℃ 保温, 20min 后观察到底部稍有结晶,维持该温度养晶 5h( 见图 2 左 ) 。养晶毕,物料表面稍有湿润,倒置,在 54℃ 条件下,用烧杯接收融化的发汗液 ( 见图 2 右 ) ,发汗时间 1h 结束。结晶体和发汗液分别加热化料,取样检验。将一次结晶体加热化掉后按照上述操作再进行二次结晶,可进一步提纯 ( 结晶温度可提至 53℃) 。 2. 方法二: 在离子液体 [Bmim]Cl-FeCl3 中,间二氯苯与氯乙酰氯经过 Friedel-Crafts 酰化反应生成 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮 (6) 。具体步骤如下: 称取 29.4 g(0.20 mol) 间二氯苯和 28.3 g(0.25 mol) 氯乙酰氯加入到 50 mL 离子液体 [Bmim]CL-FeC3 中,装上冷凝管,并在冷凝管顶部装上氯化钙吸水装置。搅拌升温反应定时间后,用环已烷提取生成的 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮,减压旋蒸除溶剂得到产物 42.1g ,产率 94.1% ,测其熔点为 48-50℃ 。 参考文献: [1]吴文良,杨江宇,尹新等 . 2 , 2′ , 4′- 三氯苯乙酮的合成及结晶分离研究 [J]. 精细与专用化学品, 2022 , 30 (01): 23-24+45. DOI:10.19482/j.cn11-3237.2022.01.06. [2]孙兵 . 苯醚甲环唑及其中间体的合成工艺研究 [D]. 南京理工大学, 2013. 查看更多
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如何制备妊娠双烯醇酮醋酸酯? 制备妊娠双烯醇酮醋酸酯是一项复杂的化学合成过程,包括酰化、异构化、氧化和水解等多个步骤。本文将介绍制备妊娠双烯醇酮醋酸酯的详细合成方法及其反应条件。 简介:妊娠双烯醇酮醋酸酯(又称为双烯)是合成甾体激素类药物的重要中间体,可用于制备多种甾体抗炎类、避孕类和糖皮质激素类药物。具有典型的甾体化合物结构,是制备大部分甾体激素类药物的原料,约 70% 的甾体激素类药物可以通过双烯合成得到。双烯的生产主要采用半合成方法,通常以从植物中提取的薯蓣皂素或茄次碱为原料,经过裂解、氧化和水解(消除)三步反应后,再经过精制得到最终产品双烯。 合成:目前,妊娠双烯醇酮醋酸酯的生产主要是以两种不同的天然化合物为原料,再经过几步常见的化学反应而制得。这两种天然化合物分别为:薯蓣皂苷元和茄次碱,它们分别是从薯蓣属植物和刺天茄等植物的块茎或果实中提取出来的甾体化合物。 1. 以茄刺碱为原料的工艺路线 茄次碱 (Solasodine) 是从茄科植物的果实中提取的一种生物碱,晶体呈片状。以茄次碱为原料合成双烯的工艺路线如图所示。 以茄次碱为原料合成双烯的工艺包括酰化、异构化、氧化和水解(消除)四步反应。首先,在 NaOAc 和 Et3N 存在的条件下,以吡啶 - 甲苯或吡啶 - 环己烷的体系为溶剂,在 50-100 ℃ 反应 10-12 h 得到茄次碱的 O,N- 二乙酸酯。随后,将二乙酸酯加入到醋酸中回流 1 h ,经异构化开环得到假茄次碱的 O,N- 二乙酸酯。接下来,将所得反应液进行氧化反应,可以使用 CrO3 、 HOAc 和 NaOAc 配置成的氧化液或以 Na2Cr2O7 、 HOAc 和 NaOAc 配置成的氧化液,在小于 20℃ 的条件下滴加到反应液中,保温反应 3 h 后,得到氧化产物。最后,将反应液升温回流 2.5 h ,得到水解产物,停止反应。反应液冷却至室温后,用环己烷或石油醚萃取,所得有机层水洗,干燥、浓缩得粗品,再在乙醇中重结晶得到最终产品双烯。 2. 以薯蓣皂素为原料的工艺路程 我国由于天然的薯蓣科植物非常丰富,且薯蓣皂素的提取工艺已经较为成熟,以薯蓣皂素为原料生产双烯在国内已得到了广泛的应用。 以薯蓣皂素为原料合成双烯的工艺路线包括裂解、氧化和水解消除三步反应。首先进行裂解反应,在高压釜中加入薯蓣皂素、乙酸酐和乙酸,升温至 180-200 ℃ 反应 1 h ,整个反应过程中压力约为 0.5 MPa 。 反应完后,所得反应液经冷却后转入氧化釜进行氧化反应,当反应液降至 5-20 ℃ 时,向反应釜内滴加由铬酐和硫酸组成的氧化液,低温下反应至反应物转化完全。最后,升温至回流,进行水解消除反应。反应完全后,将反应液倒入水中,析出产品,过滤,得粗品,再用乙醇重结晶得到双烯纯品。 强西怀等人对以假薯蓣皂素为原料通过醋酐酰化和氧化反应合成妊娠双烯醇酮醋酸酯的合成工艺进行改进。以实验室自制的硅胶固载的 12 -钨硅酸代替硫酸为催化剂,以双氧水代替传统的六价铬盐氧化剂进行实验。结果表明:在 5℃ ~ 10℃ 用双氧水氧化反应 5h 后,回流水解 1.5h ,得到妊娠双烯醇酮醋酸酯粗品.经分离,产品总收率达到 80.3 %。改进后的工艺方法成本降低,产品总收率提高,减少了环境污染,是一种经济效益良好的具有工业化应用前景的绿色合成工艺。 参考文献: [1]吴云龙 . Study on the New Preparation Process of 16-dehydropregnenolone Acetate[D]. 武汉工程大学 , 2016. [2]强西怀 , 李朦 , 韩建明等 . 妊娠双烯醇酮醋酸酯合成工艺的改进 [J]. 陕西科技大学学报 ( 自然科学版 ), 2014, 32 (02): 74-77+87. [3]罗华军 . 妊娠双烯醇酮醋酸酯的合成工艺研究 [J]. 化工时刊 , 2006, (11): 28-29+45. DOI:10.16597/j.cnki.issn.1002-154x.2006.11.009 查看更多
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Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1: A Unique Chemokine with Diverse Functions? Introduction Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1, also known as lymphotactic factor, is the sole member of the C-type chemokine family. It is primarily produced by CD8+ T cells and natural killer cells. Unlike other chemokines, Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 possesses unique sequence features and two interconvertible protein conformations, which contribute to its distinct functions. The specific receptor for XCL1, XCR1, belongs to the G-protein coupled receptor family. The interaction between XCL1 and XCR1 plays a crucial role not only in negative selection and establishment of self-immune tolerance in the thymus but also in cross-presentation of antigens and mediation of cytotoxic immune responses. Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 is involved in immune system regulation, maintenance of intestinal immune homeostasis, and is associated with various diseases such as autoimmune diseases, nephritis, tuberculosis, and human immunodeficiency virus infection. Recent studies have shown that XCR1 is selectively expressed on CD8+ dendritic cells with antigen-presenting ability, leading to numerous applications and promising results in the field of Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1-related research, including mucosal immunity, anti-tumor immune therapy, and targeted vaccine development. Molecular Structural Features of Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 Gene Structure of Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 The gene encoding human C-type chemokine XCL1 is located on chromosome 1 and consists of three exons and two introns. The first exon encodes the signal peptide, while the third exon encodes a product highly homologous to C C chemokines. There is an E1 promoter sequence upstream of the transcription start site, and multiple transcription factor binding sites, including NF-κB/c-REL, TCF2/ETS-1/PEA3, and TATA box, are distributed between the promoter and the transcription start site. The mouse Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 gene is also located on chromosome 1 and is linked to genes such as FasL, At3, Sele, and Otf1. Although the upstream transcription factor binding sites similar to humans are present in the transcription start site of mouse Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1, the regulatory region of mouse Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 is more similar to IL-8 in terms of the spacing between transcription factor binding sites. Another difference is that the 3' untranslated region of humans contains two or more polyadenylation signal sequences, while mice have only one polyadenylation signal sequence. The mouse XCL1 mRNA is 0.9 kb long, encoding a precursor of 114 amino acids. After signal peptide cleavage, it becomes 93 amino acids in size with a molecular weight of only 10 kDa. Humans have two homologous isoforms, XCL1 and XCL2 (also known as SYC1 and SCYC2), which differ by only two amino acids. Compared to other chemokine families, Recombinant Rat Lymphotactin/XCL1 has two notable structural features: 1. Lack of the first and third conserved cysteine residues, forming only one disulfide bond between the second and fourth cysteine residues; 2. Possession of a C-terminal mucin-like domain that is 20-30 amino acids longer than other chemokines. References [1] Buyong J, Lubkowski J, Nussinov R. Homology modeling and molecular dynamics simulations of lymphotactin. Protein Sci 2000; 9: 2192-2199 [PMID: 11152129 DOI: 10.1110/ps.9.11.2192] [2] Research Progress on C-type Chemokine XCL1. Yu Lei 查看更多
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你知道IgG纯化树脂的特点和使用方法吗? 简介 [1] IgG纯化树脂是一种高效的纯化和抗体结合蛋白的工具。它采用经过活化的琼脂糖凝胶作为基质,通过共价连接人的IgG来实现纯化和结合。这种纯化树脂适用于纯化多种蛋白,包括Protein A、Protein G和含有人工合成的Z抗体结合区的融合蛋白。该纯化树脂以悬浮液形式提供,纯度达到50%。 特点 [1] 1. 该纯化树脂的配体为人IgG,每毫升纯化树脂的载量为6-10毫克人IgG。 2. 该纯化树脂的结合量大于2毫克Protein A每毫升纯化树脂。 3. 该纯化树脂的pH范围为3-10,保存温度为2-8摄氏度,含有20%的乙醇。 4. 该纯化树脂具有刚性强、流速快(300 cm/h、100 kpa)的特点。 5. 该纯化树脂的基团脱落少,结合特异性强,载量高,寿命长。 运输和保存条件 [1] 该纯化树脂在常温下进行运输,保存时需要存放在4摄氏度,保质期为两年,不可冻存。 实验前准备 [1] 推荐使用以下缓冲液: 结合液:Tris-saline Tween 20 (TST): 50 mM Tris缓冲液、 pH 7.6、150 mM NaCl和0.05% Tween 20。 洗脱液:0.5 M CHCOOH (HAc) 用 CHCOONH4 调节 pH 到 3.4,或 0.1 M Glycine-HCl pH 3.0。 洗涤液:5 mM NH4Ac, pH 5.0 操作步骤 1. 使用至少5倍柱床体积的TST清洗IgG纯化树脂,以去除残留的乙醇。 2. 使用至少2倍柱床体积的以下溶液依次平衡IgG纯化树脂:1) 0.5 M HAc, pH 3.4;2) TST; 3) 0.5 M HAc,pH 3.4;最后再用2倍柱床体积的TST平衡IgG纯化树脂两次。 3. 将待纯化的含有目的蛋白的样品调整到中性pH后,加入含有IgG纯化树脂的纯化柱中。 4. 静置5分钟后,使用5倍柱床体积的TST清洗IgG纯化树脂两次,再使用2倍柱床体积的5 mM NH4Ac pH 5.0清洗两次。 5. 使用0.5 M HAc pH 3.4或者0.1 M Glycine-HCl pH 3.0洗脱收集目的蛋白,并使用1 M的Tris-HCl(pH 9.0左右)调节pH到中性。 6. 使用BCA法(C503021)或(C503061)定量测定蛋白浓度,并使用SDS-PAGE确定蛋白的大致纯度。 参考文献 [1]IgG抗体纯化树脂产品介绍查看更多
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SUMO蛋白的分布及其制备方法? 人类基因组编码了四种SUMO蛋白亚型,分别是SUMO1、SUMO2、SUMO3和SUMO4。SUMO1~3在各种组织中广泛表达,而SUMO4主要在肾、脾和淋巴结中表达。SUMO1和SUMO2具有较高的序列同源性,SUMO2和SUMO3也非常相似。因此,抗SUMO2抗体和抗SUMO3抗体在实验中的反应性相似。本文介绍了抗人SUMO3抗体的制备方法。 制备方法 抗人SUMO3抗体的制备步骤如下: 1)引物的设计与合成 根据SUMO3蛋白的编码序列,设计引物对目的片段进行PCR扩增。引物的序列为FP:TTA AGA AGG AGA TAT ACC ATG TCCGAG GAG AAG CCC AAA GAG和RP:GTG GTG GTG GTG GTG CTC GAG GAA ACTGTG CCC TGC CAA GCT。 2)人SUMO3基因原核表达载体的构建 利用PCR扩增SUMO3蛋白的DNA片段,并将其与含有His标签序列的pET-28A质粒进行双酶切。将扩增的PCR产物与酶切后的质粒混合,导入大肠杆菌培养。通过筛选阳性单克隆并进行PCR扩增,得到含有目的DNA片段的重组质粒。 3)人SUMO3蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 将重组质粒转化至大肠杆菌BL21-DE3,选择阳性单克隆进行培养。在37℃的条件下,分别在IPTG的诱导下进行培养。通过SDS-PAGE电泳检测,确定最适合的诱导表达条件。 4)人SUMO3蛋白的分离与纯化 将菌体取出,用裂解缓冲液重悬,并进行超声破菌。通过亲和层析柱和超滤管进行蛋白的纯化。最后,将目的蛋白制成蛋白干粉并保存。 主要参考资料 [1] 抗SUMO抗体在原发性胆汁性胆管炎临床诊疗中的价值 查看更多
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成纤维细胞的形态结构及功能? 成纤维细胞是疏松结缔组织中最常见的细胞类型,其形态结构和功能状态密切相关。在功能活动旺盛时,成纤维细胞呈扁平星形,胞核呈卵圆形,胞质内含有丰富的细胞器和结构,表明其具有合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和多糖蛋白的能力。而在功能活动不活跃时,成纤维细胞转化为纤维细胞,形态和功能均发生改变。纤维细胞较小,呈梭形,胞质少,细胞器不发达。然而,在创伤修复和结缔组织再生等条件下,纤维细胞可以重新转化为功能活跃的成纤维细胞,参与组织修复和蛋白质合成。 小鼠肺动脉成纤维细胞是从肺动脉组织中分离得到的。肺动脉是起源于心脏的一条主干动脉,将含有二氧化碳较多的静脉血送到肺脏进行气体交换。小鼠肺动脉成纤维细胞的形态特征包括圆形、折光性良好,并能在培养基中悬浮。随着时间的推移,细胞逐渐贴壁并伸出伪足,最终形成梭形。这些细胞具有构造和维持肺动脉形态的功能,同时也合成和释放细胞外基质,以及参与组织损伤后的修复过程。 主要参考资料 [1] 运动解剖学、运动医学大辞典 [2] 人类学辞典 查看更多
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为什么上皮细胞对机体防御功能至关重要? 上皮细胞是覆盖身体表面和体内空腔器官腔面的细胞,具有明显的极性。它们一面朝向身体表面或腔面,称为游离面,另一面朝向深部的结缔组织,称为基底面。上皮细胞具有强大的角质形成和更新能力,对机体的保护、吸收、分泌和排泄等功能起着重要作用。当上皮细胞受损时,会影响机体的防御功能。子宫颈作为子宫的最下部最细部,对于女性生殖系统也具有重要意义。它分为上部和下部,内腔呈梭形,含有大量分泌腺。这些分泌腺在月经周期的不同阶段分泌不同的粘液,起到自洁作用并有利于精子通过和成活。 人子宫颈上皮细胞的培养是研究子宫颈相关疾病的重要手段。在进行细胞培养之前,需要观察细胞是否已长成致密单层,然后进行传代培养。人子宫颈上皮细胞的培养条件包括基础培养基、FBS和双抗的组合。此外,冻存液的配方也需要特别注意。在细胞培养过程中,要注意避免细菌、真菌、支原体等微生物的污染。传代建议为1:2~1:3传代,每2~3天换液1次。 如何进行细胞培养? 人子宫颈上皮细胞的来源包括ATCC、DSMZ、ECACC以及一些国内外大学。这些细胞具有年轻活性好、不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体等特点。在进行细胞培养之前,需要观察细胞是否已长成致密单层,如已长成单层,则可以进行细胞的传代培养。细胞培养条件包括基础培养基、FBS和双抗的组合。冻存液的成分为DMSO、FBS和基础培养液的组合。在细胞培养过程中,要注意避免细菌、真菌、支原体等微生物的污染。传代建议为1:2~1:3传代,每2~3天换液1次。 主要参考资料 [1] 儿科学辞典 [2] 中国女性百科全书·婚姻家庭卷 查看更多
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天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的制备方法是什么? 天竺葵素-3-O-葡萄糖苷(Pg3G)是一种水溶性的花色苷化合物,具有抗氧化和防护氧化应激损伤的功效。它主要存在于草莓等果蔬中,是一种理想的提取物。Pg3G不仅可以作为天然色素用于食品加工,还可以作为天然抗氧化剂和功能食品因子用于保健食品的开发。 制备方法 天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的制备方法如下: 首先,在真空下干燥山奈酚-3-(6-O-乙酰基)葡糖苷和Zn粉,并将它们放入反应器中。然后,引入Ar气氛并在0℃下加入3.5%氯化氢-无水甲醇溶液。进行超声波照射和强力搅拌后,过滤反应混合物并得到滤液。将滤液与干燥空气接触反应3.5小时,然后倒入水中。 将反应混合物倒入填充有"AmberliteXAD-7凝胶"的柱中,并用0.5%TFA水溶液洗涤柱子。随后,用含有0.5%TFA的90%乙腈水溶液洗脱柱中吸附的染料。通过制备分离ODS-HPLC精制颜料级分,得到天竺葵苷-3-(6-O-乙酰基)葡糖苷和天竺葵素-3葡萄糖苷。最后,将天竺葵素-3葡萄糖苷与盐酸反应制备天竺葵素-3-氯化葡萄糖苷。 以上就是制备天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的方法。 主要参考资料 [1]CN201610733849.9一种分离制备天竺葵素-3-O-葡萄糖苷的方法 [2]FromJpn.KokaiTokkyoKoho,2009137904,25Jun2009 查看更多
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足叶草脂是否是一种有效治疗尖锐湿疣的植物化合物? 据医疗专家指出,足叶草脂具有强大的细胞毒性作用,可以通过抑制细胞的正常有丝分裂,从而引起尖锐湿疣患处的组织坏死,达到治疗的效果。此外,体育锻炼对于尖锐湿疣的治疗也有帮助。 然而,性病治疗专家指出,足叶草脂的毒性特别大,可能导致恶心呕吐、肠梗阻、白细胞和血小板减少等不良反应。因此,在使用足叶草脂药物时必须小心谨慎,一旦出现不良反应,应立即停止用药。 此外,性病专家提醒慢性尖锐湿疣患者应避免食用具有滋补功效的食物,以免影响治疗效果。 如何使用足叶草脂? 具体使用方法为,在患处涂抹20%的足叶草脂之前,最好先使用抗菌药膏保护周围正常部位。4小时后,用肥皂水清洗。如果症状未缓解,可在三天后再次涂抹药物。然而,足叶草脂也有副作用,可能导致溃疡和中毒,如恶心、尿路不畅和心跳问题。如果出现这些问题,必须停止用药并咨询医生。 查看更多
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雷米普利是什么药物? 雷米普利是一种长效、强效血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI),用于治疗中轻度及原发性高血压和肾性高血压以及中度和恶性充血性心力衰竭。该药物具有快速而强效的药效,持续时间长且毒副作用较小。雷米普利首次在法国上市,并已在20多个国家销售。它是由德国赫斯特公司研制开发的首选药物,于1999年在中国上市并广泛应用。 雷米普利的制备方法 方法一 根据化合物的结构,雷米普利的制备方法如下图所示: 方法一的步骤包括: 化合物VI和化合物V在催化剂的作用下进行缩合反应,生成化合物IV。 化合物IV与烯胺类化合物III进行加成反应,制得化合物II。 化合物II与苄醇在酸性溶液中进行水解环化反应和酯化反应,然后经还原剂还原,制得雷米普利的关键中间体I。 方法二 雷米普利的另一种制备方法如下图所示: 方法二的步骤包括: 化合物II在酸性条件下水解成丙二酸单乙酯单酰胺III。 化合物III在碱性条件下与甲醛缩合生成2-亚甲基丙二酸单乙酯单酰胺IV。 化合物IV在碱性条件下与环戊烯吗啉V发生加成反应得到化合物VI。 化合物VI在碱性条件下发生霍夫曼重排并水解生成化合物VII。 化合物VII在酸性苄醇溶液中环化并酯化,然后经还原剂还原得到雷米普利的关键中间体I。 主要参考资料 [1] [中国发明,中国发明授权] CN201510148808.9 一种雷米普利中间体的合成方法 [2] [中国发明,中国发明授权] CN200910020931.7 一种制备雷米普利中间体的新方法【公开】/一种制备雷米普利中间体的方法【授权】 查看更多
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氯雷他定与地氯雷他定有哪些区别? 一、 作用机制上的区别 氯雷他定属于第二代三环类抗组胺药物,而地氯雷他定属于第三代三环类抗组胺药物。氯雷他定是高效、作用持久的三环类抗组胺药,选择性外周H1受体拮抗剂,能缓解过敏反应引起的各种症状。地氯雷他定是氯雷他定的活性代谢物,同样能缓解过敏反应引起的各种症状。 二、 适用人群的区别 地氯雷他定只适用于12岁以上的人群,而氯雷他定没有这个限制。 三、 适用范围的区别 氯雷他定片和地氯雷他定片都能有效缓解过敏性鼻炎相关的症状,如喷嚏、流涕、鼻痒、鼻塞以及眼部痒和烧灼感。口服药物后,鼻和眼部症状及体征能迅速缓解。它们也适用于缓解慢性荨麻疹、瘙痒性皮肤病和其他过敏性皮肤病的症状和体征。 四、服用这两种药需要注意哪些 1.严重肝功能不全的患者请在医生指导下使用。 2.妊娠期及哺乳期妇女慎用。 3.在做皮试前约48小时左右应中止使用本品,因为抗组胺药能阻止或降低皮试的阳性反应发生。 4.对本品过敏者禁用,过敏体质者慎用。 5.当药物发生性状改变时禁止使用。 6.请将本品放在儿童不能接触的地方。 7.儿童必须在成人监护下使用。 8.如正在使用其他药品,使用本品前请咨询医师或药师。 参考资料 1、 氯雷他定说明书 2、 地氯雷他定说明书 来源:BOE药学科 查看更多
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细胞裂解液对实验的影响及红细胞裂解液的配方? 细胞裂解液在细胞上游操作中起着重要作用。RIPA是最常用的裂解液,用于提取细胞和组织中的可溶性蛋白。然而,近年来有报道称裂解液对实验有影响,例如RIPA裂解液对IFN抗原抗体间的结合有强烈影响,不适用于ELISA检测IFN时的细胞和组织样本的裂解。 红细胞裂解液在动物试验中被广泛使用,与PBS、生理盐水和细胞培养基并称为实验室四大液体耗材。然而,红细胞裂解液如何实现裂解红细胞而不破坏其他有核细胞的效果呢? 红细胞裂解液的配方 常用自配红细胞裂解液的主要成分包括碳酸氢钾、氯化铵和EDTA.2Na。配方中的碳酸氢钾(1g)、氯化铵(8.3g)和EDTA.2Na(0.037g)经过KOH和HCl的调节,使pH值达到7.2-7.4(此配方为配制1000ml红裂液)。然后将其低温储存备用。 由于EDTA.2Na用量很小,称取0.037g会造成较大的误差。因此,我通常会准备一瓶EDTA.2Na的储存液(0.37gEDTA.2Na溶于1000ml ddH2O中),每次配制1000ml红裂液时从中吸取100ml储存液。 红细胞裂解液各个成分在裂解过程中的作用 红细胞裂解液中,氯化铵是主要的效应物质。铵根离子无法透过细胞膜,而其他离子可以通过,导致细胞内外离子浓度差异,形成渗透压差。外部的水分会扩散至胞内,使细胞膨胀。由于红细胞结构相对简单,膨胀的耐受能力较差,大部分红细胞会被涨破。碳酸盐的主要作用是缓冲pH值。EDTA与镁离子和钙离子形成的螯合物主要破坏细胞膜稳态,对白细胞影响较小,因此这种裂解液在裂解红细胞的同时对白细胞的影响较小。 查看更多
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如何合成(1R,2R)-(-)-2-苯甲氧基环己胺的中间体? 1R,2R-N-乙酰基环己氨基醇是一种常用的医药合成中间体,尤其在心血管、肿瘤和神经系统等领域的新药研发中扮演着重要角色。然而,目前关于(1R,2R)-(-)-2-苯甲氧基环己胺的合成方法报道较少,现有的报道主要集中在氨基环己醇的合成上。 国外文献报道了几种合成(1R,2R)-(-)-2-氨基环己醇的方法,包括化学和酶拆分法以及不对称合成法。化学拆分法使用酒石酸进行拆分,可以得到高纯度的(1R,2R)-(-)-2-氨基环己醇,但效率较低且无法回收,导致生产成本增加。酶拆分法可以得到高纯度的产物,但容易残留微量酶并且成本较高。不对称合成法可以得到目标产物,但光学纯度较低,催化剂价格昂贵且易爆炸,不适合工业化生产。 因此,我们提出了一种新的合成方法,通过将(1R,2R)-(-)-2-氨基环己醇的氨基保护,制备得到(1R,2R)-N-乙酰基环己氨基醇。具体步骤如下:向反应器中加入12g化合物(III),100ml无水乙醇。将22g醋酐慢慢滴加进去,滴加完毕,回流30min,减压抽干溶剂,得到化合物(1R,2R)-N-乙酰基环己氨基醇。 最后,(1R,2R)-N-乙酰基环己氨基醇可以用作制备(1R,2R)-(-)-2-(N-乙酰基)苯甲氧基环己胺的中间体。具体步骤如下:将1R,2R-N-乙酰基环己氨基醇与氯化苄在催化剂的作用下完成(1R,2R)-(-)-2-氨基环环己醇环上羟基的苯甲氧基化反应,然后通过重结晶处理得到目标产物。 参考资料 [1] (CN101293841)(1R,2R)-(-)-2-苯甲氧基环己胺的合成方法查看更多
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人抗IGE受体抗体ELISA试剂盒的应用范围是什么? 人抗IGE受体抗体ELISA试剂盒可用于测定各种样本中待测物质的含量,包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 人抗IGE受体抗体ELISA试剂盒的基本信息 产品名称: 人抗IgE受体抗体elisa试剂盒 英文名称: Human anti-IgE receptor antibody Elisa Kit 产品用途: 仅用于科研实验,严禁用于临床诊断 样本体积: 50-100ul 保存条件: 2-8℃下,可放置6个月。 检测样本: 血清、血浆细胞上清液、灌洗液。 检测方法: 双抗夹心法 组 成: 人抗IGE受体抗体ELISA试剂盒的实验原理是什么? 人抗IGE受体抗体ELISA试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。首先,在微孔板上包被纯化的待测物质抗体,形成固相抗体。然后,依次加入待测物质和HRP标记的待测物质抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的待测物质浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并根据标准曲线计算样品中待测物质的浓度。 主要参考文献 [1]陈家琪,瞿爱东,祝婧烨,黄海武。阻断型抗人IgE单克隆抗体的制备及其表位分析。《中华微生物学和免疫学杂志》2012年32卷10期 845-849页。查看更多
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如何进行转基因食品的检测与标识? 转基因食品的安全性备受关注,许多国家都采取了谨慎措施,要求对转基因食品进行明确标识。然而,由于经济利益和政治目的的驱使,一些不法商家仍然不遵守这一规定。这可能导致未经标识的外源基因混入食品中,侵犯人们的知情权。因此,检验机构需要及时发现并杜绝这种现象的发生。为了维护国家的安全,许多国家还规定了转基因食品中转基因成分的下限,并要求在出口之前提供含量检测报告。这进一步对检测机构提出了严格要求,因此完善检验标准变得非常迫切。 转基因大豆品系DP305423的用途是什么? 转基因大豆品系DP305423用于检测转基因大豆品系DP305423。 操作流程: 第一步,制备模板;第二步,添加模板;第三步,进行扩增反应。 在进行转基因食品检测时需要注意哪些事项? 1. 本试剂具有高灵敏度。为了防止污染,实验应进行分区操作。第一区:样本制备区。第二区:扩增及产物检测区。最好在分区之间进行物理性隔离,以避免人为因素引起的污染。 2. 在实验过程中,应穿戴工作服和乳胶手套,并使用移液器。所有实验产生的废弃物应及时处理。 3. 严格按照操作步骤进行实验,试剂配制和加样等步骤应在冰上进行。 4. 反应液中的成分对光敏感,应避光保存。不需要使用的试剂应避免解冻,推荐在使用前将反应液离心30秒。 5. 反应结束后,扩增管应置于密封袋内丢弃,并在当天清理。禁止开盖,因为开盖容易造成气溶胶污染。 6. 不同批号的试剂请勿混合使用,应在有效期内使用。 主要参考文献 [1]曲秋颖。转基因大豆、玉米、油菜品系鉴定方法。中国海洋大学硕士学位论文。 查看更多
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