基因组DNA提取试剂盒的应用及优势? 基因组DNA提取试剂盒是一种能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。它利用氯化苄的特性,通过破坏细胞壁来提取DNA。相比传统方法,这种试剂盒省去了繁琐的步骤,并且能够一次性处理大量样品。此外,经过改良的制品只需短短的时间就能完成热处理和水相回收。 通过基因组DNA提取试剂盒提取的DNA可以进行PCR扩增和限制酶处理等操作。纯化后的DNA长度可达50kb左右,最短可至100bp。如果需要更长的基因组DNA,可以使用适用于哺乳动物样品的基因组DNA提取试剂盒。通过该试剂盒提取的总DNA,其OD260/OD280通常在1.7至1.9之间。 基因组DNA提取试剂盒主要分为多个类别,包括小量全血、中量全血、组织/细胞、中量/大量组织/细胞、全血/组织/细胞、CTAB植物、新型植物、酵母和M13噬菌体单链基因组DNA提取试剂盒。 基因组DNA提取试剂盒在旋毛虫DNA检测中的应用 用于环介导等温扩增(LAMP)技术检测旋毛虫DNA的研究 通过建立不同剂量旋毛虫感染小鼠模型,收集肌肉、血液和粪便样本进行LAMP检测,验证了该方法的高度敏感性和特异性。特别是在肌肉中幼虫密度非常低的情况下,该技术显示出重要的检测和诊断价值。 与PCR法相比,研究证明LAMP法更敏感、快速、简便,有望在提高人及动物旋毛虫病的早期诊断、现场检测、肉类检疫和流行病学调查等方面发挥更大作用。实验中使用了旋毛虫河南猪源株、北方旋毛虫、伪旋毛虫和南方旋毛虫等虫种。 此外,实验还使用了其他人体寄生蠕虫标本,如似蚓蛔线虫、蛲虫、鞭虫、十二指肠钩口线虫、华支睾吸虫、布氏姜片虫、日本血虫、猪带绦虫、牛带绦虫和曼氏迭宫绦虫。 实验中使用了6周龄健康雄性昆明小鼠作为实验动物,并使用了血液/组织/粪便基因组DNA提取试剂盒提取旋毛虫及其他样本的基因组DNA。 参考文献 [1] Comparison of three molecular detection methods for detection of Trichinella in infected pigs[J].Zhibing Lin,Jie Cao,Houshuang Zhang,Yongzhi Zhou,Mingjun Deng,Guoqing Li,Jinlin Zhou.Parasitology Research.2013(5) [2] A loop-mediated isothermal amplification method for a differential identification of Taenia tapeworms from human:Application to a field survey[J].Agathe Nkouawa,Yasuhito Sako,Tiaoying Li,Xingwang Chen,Minoru Nakao,Tetsuya Yanagida,Munehiro Okamoto,Patrick Giraudoux,Francis Raoul,Kazuhiro Nakaya,Ning Xiao,Jiamin Qiu,Dongchuan Qiu,Philip S.Craig,Akira Ito.Parasitology International.2012(4) [3] Differential detection of Trichinella papuae,T.spiralis and T.pseudospiralis by real-time fluorescence resonance energy transfer PCR and melting curve analysis[J].Chairat Tantrawatpan,Pewpan M.Intapan,Tongjit Thanchomnang,Viraphong Lulitanond,Thidarut Boonmars,Zhiliang Wu,Nimit Morakote,Wanchai Maleewong.Veterinary Parasitology.2011(2-4) [4] Rapid genotyping of carcinogenic human papillomavirus by loop-mediated isothermal amplification using a new automated DNA test(Clinichip HPV?)[J].Toyomi Satoh,Koji Matsumoto,Takuma Fujii,Osamu Sato,Nobuhiro Gemma,Mamiko Onuki,Hiroshi Saito,Daisuke Aoki,Yasuo Hirai,Hiroyuki Yoshikawa.Journal of Virological Methods.2012 [5] 李雪莲.环介导等温扩增(LAMP)技术检测旋毛虫DNA的研究[D].郑州大学,2016.查看更多
BRADFORD蛋白定量试剂盒的原理和应用? BRADFORD蛋白定量试剂盒是一种简单快速的方法,用于测定样品中的蛋白质浓度。该试剂盒利用考马斯亮蓝G250与蛋白质结合的原理,通过测定光吸收值来定量测定蛋白质含量。与传统的Lowry法相比,BRADFORD蛋白定量试剂盒具有更高的灵敏度和快速的反应速度。 BRADFORD蛋白定量试剂盒的特点包括: 1. 显色反应迅速,节省时间。 2. 兼容性好,不受大多数化学物质的影响。 3. 检测范围广,可测定50-1000ug/ml的蛋白质浓度。 BRADFORD蛋白定量试剂盒的应用 人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母中的共表达及其纯化研究 骨形成蛋白(BMPs)是一类生长调节因子,对于组织器官的胚胎发生和形态形成起重要作用。研究人员利用BRADFORD蛋白定量试剂盒,对人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母细胞中的共表达和纯化进行了研究。 通过制备转基因酵母菌株,研究人员成功实现了人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母细胞中的共表达。经过摇瓶培养和甲醇诱导,成功表达了目的蛋白,并通过斑点印迹和蛋白质印迹进行了验证。 利用BRADFORD蛋白定量法和其他纯化方法,研究人员得到了纯度达到80%以上的目的蛋白。 参考文献 [1] Whole‐exome sequencing: a powerful technique for identifying novel genes of complex disorders[J]. SS Sanders. Clinical Genetics. 2011(2). [2] Disorders of dysregulated signal traffic through the RAS‐MAPK pathway: phenotypic spectrum and molecular mechanisms[J]. Marco Tartaglia, Bruce D. Gelb. Annals of the New York Academy of Sciences. 2010(1). [3] Perinatal Exposure to Hazardous Air Pollutants and Autism Spectrum Disorders at Age 8[J]. Amy E. Kalkbrenner, Julie L. Daniels, Jiu-Chiuan Chen, Charles Poole, Michael Emch, Joseph Morrissey. Epidemiology. 2010(5). [4] Immune Therapy in Autism: Historical Experience and Future Directions with Immunomodulatory Therapy[J]. Michael G. Chez, Natalie Guido-Estrada. Neurotherapeutics. 2010(3). [5] 陈雅娟. 人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母中的共表达及其纯化[D]. 福建师范大学, 2004.查看更多