ANTI-IL-23抗体的应用及检测原理? ANTI-IL-23抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合IL-23,并广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理:采用双抗体夹心法来测定样本中的IL-23水平。首先,在微孔板上包被纯化的IL-23抗体,形成固相抗体。然后,依次加入样本中的IL-23和HRP标记的IL-23抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成黄色。样品中IL-23的浓度与颜色的深浅呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中IL-23的浓度。 IL-23是一种由p19亚单位和IL-12p40亚单位通过二硫键连接形成的异源二聚体分子,主要来源于活化的单核巨噬细胞和B细胞。它在机体的抗肿瘤免疫、抗感染免疫以及自身免疫性疾病中发挥重要作用。 IL-23能够作用于CD4+Tm细胞,诱导Th0细胞分化为Th1细胞并产生IFN-γ,同时也能够作用于Th17细胞诱导IL-17的产生。IL-17是一种炎性细胞因子,能够激活T细胞并作用于多种组织和细胞,尤其在炎症早期发挥重要作用。 白细胞介素-23由p19和IL-12的40kD亚基组成,由活化的DC分泌。它能够促进CD45RO+记忆T细胞增殖并产生γ干扰素。 ANTI-IL-23抗体在胃癌研究中的应用 胃癌发生发展及转移能力的影响及其分子机制 本研究旨在探讨ANTI-IL-23抗体对胃癌发生发展及转移能力的影响,并研究其潜在的分子机制。 研究方法包括免疫组织化学染色法、ELISA法、时间分辨免疫荧光分析法等。通过检测IL-23在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴肠化生和胃癌患者组织中的表达,以及血清IL-23水平和胃蛋白酶原水平,来评估ANTI-IL-23抗体在胃癌中的作用。 此外,还通过检测未转移胃癌组和转移胃癌组患者IL-23的表达,以及血清IL-23、VEGF和MMP9的表达水平,来研究ANTI-IL-23抗体对胃癌转移的影响。 体外实验使用胃癌细胞株进行,通过处理细胞株的方式,检测MMP9和VEGF的表达,以及胃癌细胞迁移能力的变化。 参考文献 [1] Sara Chiaretti, Ivan de Curtis. Role of Liprins in the Regulation of Tumor Cell Motility and Invasion. Current Cancer Drug Targets. 2016(3). [2] Hassan Akrami, Fatemeh Mahmoodi, Somaye Havasi, Amene Sharifi. PlGF knockdown inhibited tumor survival and migration in gastric cancer cell via PI3K/Akt and p38MAPK pathways. Cell Biochemistry and Function. 2016(3). [3] Zhihao Zhang, Mengmeng Dou, Xiaofang Yao, Hao Tang, Zhubo Li, Xiaoyan Zhao. Potential Biomarkers in Diagnosis of Human Gastric Cancer. Cancer Investigation. 2016(3). [4] Xinwei Zhao, Lina Xu, Lingli Zheng, Lianhong Yin, Yan Qi, Xu Han, Youwei Xu, Jinyong Peng. Potent effects of dioscin against gastric cancer in vitro and in vivo. Phytomedicine. 2016. [5] 孙鹏. 白细胞介素23对胃癌发生发展及转移能力的影响及其分子机制的研究[D]. 江苏大学, 2016.查看更多
重组人白细胞介素18抗体的应用及研究进展? 背景 [1-3] 重组人白细胞介素18抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合人白细胞介素18蛋白,并广泛应用于实验室中检测人白细胞介素18蛋白的活性。 白细胞介素18(Interleukin 18,IL-18)是一种重要的细胞因子,属于白介素家族。它在免疫细胞间起到信息传递、免疫细胞激活与调节、T、B细胞活化、增殖与分化以及炎症反应中的调节作用。 重组人白细胞介素18(IL-18)是一种新近克隆的细胞因子,是IFN-γ的强诱导因子,对Th1型免疫应答具有重要作用。通过逆转录PCR从人单核细胞系THP-1中获得了人成熟IL-18(hIL-18)cDNA,并成功克隆和表达了重组hIL-18蛋白。 应用 [4][5] 重组IL-18的表达及其抗肿瘤作用的研究 通过RT-PCR技术,从人单核细胞THP上克隆了人白细胞介素18(IL-18)的编码cDNA,并在大肠杆菌中高效表达和纯化了具有活性的重组IL-18蛋白。 在设计PCR引物时,去掉了IL-18的引导序列和3'端非编码区。在编码成熟IL-18的第一个氨基酸密码子前加入了起始蛋氨酸密码子,以保证在大肠杆菌中的原核表达。 通过高效的双酶切定向克隆,成功得到了阳性的重组子。将人IL-18 cDNA克隆至原核表达载体pBV220的EcoRI和BamHI位点,使其在启动子的控制下表达。在启动子上游存在温度敏感的转录遏制物CIts857,在热诱导条件下去除遏制,使IL-18基因得以表达。将重组子导入大肠杆菌DH5a,建立了人IL-18的原核表达工程菌,并对工程菌的形态学、遗传稳定性和靶蛋白表达水平进行了稳定性检测。 参考文献 [1] Immunoadjuvant activities of a recombinant chicken IL-12 in chickens vaccinated with Newcastle disease virus recombinant HN protein[J]. Bor Sheu Su, Hsien Sheng Yin, Hua Hsien Chiu, Li Hsiang Hung, Ji Ping Huang, Jui Hung Shien, Long Huw Lee. Veterinary Microbiology. 2011(3). [2] Adjuvant effects of chicken interleukin-18 in avian Newcastle disease vaccine[J]. Li-Hsiang Hung, Hsin-Pei Li, Yi-Yang Lien, Mei-Li Wu, Hso-Chi Chaung. Vaccine. 2009(5). [3] Genomic Organization and Regulation of the Human Interleukin‐18 Gene[J]. U. Kalina, K. Ballas, N. Koyama, D. Kauschat, C. Miething, J. Arnemann, H. Martin, D. Hoelzer, O. G. Ottmann. Scandinavian Journal of Immunology. 2008(6). [4] 2-Deoxyglucose: An anticancer and antiviral therapeutic, but not any more a low glucose mimetic[J]. Hyun Tae Kang, Eun Seong Hwang. Life Sciences. 2005(12). [5] 顾申. IL-18的重组、表达及其抗肿瘤作用的研究[D]. 第二军医大学, 2001.查看更多
三丁基氯化锡的合成及应用有哪些? 三丁基氯化锡的合成及应用 简介 三丁基氯化锡是一种无色液体,可溶于乙醇、庚烷、苯和甲苯,但不溶于冰水,在热水中会水解。它被广泛应用于杀鼠剂、拒鼠电缆涂料以及合成中间体等领域。此外,它还具有亲脂性,能够轻易穿过血脑屏障,表现出强烈的神经毒性,可导致神经元细胞凋亡[1]。 合成 三丁基氯化锡的合成可通过以下步骤进行:在PTFE烧瓶中混合三正丁基氟化锡、乙酸乙酯和盐酸水溶液,然后在室温下用磁力搅拌器搅拌反应混合物,最后通过分离、洗涤和干燥等步骤得到三丁基氯化锡。具体的合成路线可参考图1[2]。 另一种合成三丁基氯化锡的方法是将氢氧化三丁基锡与邻二甲苯层反应,经过蒸馏、冷却、搅拌和分离等步骤得到产物。具体的合成路线可参考图2[2]。 用途 三丁基氯化锡在工业、农业、交通、化工和卫生等领域有广泛的应用。它具有防腐、杀菌和防霉等作用,主要用于船舶油漆中的防污涂料,以防止海洋生物的附着和生长。此外,它还被用作聚氯乙烯的稳定剂、木材的防腐剂以及医药行业的中间体。因此,三丁基氯化锡在环境中广泛存在,并且已在多种食品、日用品和海洋生物体内被检测到,包括奶制品、鱼、肉以及斑马鱼、贻贝等海洋动物[1]。 参考文献 [1] 刘健翠. 三丁基氯化锡对鱼类粘膜免疫的影响[D].山东师范大学,2011 [2] Aalla, Sampath; et al. An Efficient and Telescopic Process for Valsartan, an Angiotensin II Receptor Blocker. Organic Process Research & Development (2012), 16(4), 682-686. 查看更多