ANTI-BCL-2抗体的应用及其检测原理? 背景 [1-3] ANTI-BCL-2抗体是一种多克隆抗体,能够特异性地结合ANTI-BCL-2。它主要用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理:采用双抗体夹心法来测定样本中ANTI-BCL-2的水平。首先,在微孔板上包被纯化的ANTI-BCL-2抗体,形成固相抗体。然后,依次加入样本中的ANTI-BCL-2和HRP标记的ANTI-BCL-2抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的ANTI-BCL-2浓度呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中ANTI-BCL-2的浓度。 B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)是细胞凋亡研究中的一个重要癌基因。Bcl-2能够抑制多种细胞毒因素引起的细胞死亡,并增强细胞对大多数细胞毒素的抵抗性。这一发现揭示了凋亡信号转导途径的一个共同调节点,即Bcl-2。 实验结果表明,Bcl-2可以增强细胞对大多数DNA损伤因子的抵抗性,抑制化疗药物引起的细胞凋亡。然而,Bcl-2本身并不能抑制这些因子对细胞的损伤,也不能促进DNA修复。 p53蛋白是DNA损伤的一个分子传感器,研究证实Bcl-2能够抑制p53介导的凋亡,但不能抑制p53向核内转位或者p53介导的生长停滞。Bcl-2的作用可能是在DNA损伤后,阻止激活凋亡机制的信号到达其靶分子。 在细胞毒性T细胞中,凋亡不依赖于Bcl-2,而是由颗粒酶B激活Caspases家族的一个或多个半胱氨酸蛋白酶所诱导。这表明Bcl-2在凋亡途径中的作用位点位于信号分子和效应蛋白酶之间。 应用 [4][5] P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡、Bcl-2、Caspase-3表达及其学习记忆能力的影响研究 研究发现,减少Bcl-2的表达和增加Bax的表达可以激活Caspase-3和p53,进而诱导大鼠海马区神经元的凋亡。Bcl-2和Caspase-3是调节细胞凋亡的两个重要分子,Bcl-2的过量表达可以有效抑制Caspase-3的激活,最终导致海马区细胞凋亡。p38MAPK是缺血低灌注损伤引起神经元凋亡的重要信号转导通路之一,它可以通过调节Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达来影响细胞凋亡。 本研究旨在观察血管性痴呆大鼠海马区p38MAPK磷酸化的变化,探讨p38MAPK在血管性痴呆发病机制中的作用。研究使用p38MAPK抑制剂SB202190来干预血管性痴呆大鼠,通过Western Blot蛋白印迹法、免疫荧光法和激光扫描共聚焦显微镜等技术观察大鼠海马区神经元凋亡、Bcl-2和Caspase-3凋亡因子的表达变化,以及大鼠学习记忆能力的改变。研究结果将探讨p38MAPK信号通路对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响,并初步探讨其作用机制。 参考文献 [1] Li W, Huang R, Shetty RA, et al. Transient focal cerebral ischemia induces long-term cognitive function deficit in an experimental ischemic stroke model[J]. Neurobiology of Disease, 2013. [2] Jayaraman V, Rambhadran A. Mechanism of Activation in NMDA Receptors[J]. Biophysical Journal, 2011. [3] Filomeni G, Piccirillo S, Rotilio G, et al. p38 MAPK and ERK1/2 dictate cell death/survival response to different pro-oxidant stimuli via p53 and Nrf2 in neuroblastoma cells SH-SY5Y[J]. Biochemical Pharmacology, 2012. [4] Wang X, Chen Q, Xing D. Focal Adhesion Kinase Activates NF-κB via the ERK1/2 and p38MAPK Pathways in Amyloid-β25-35-Induced Apoptosis in PC12 Cells[J]. Journal of Alzheimer's Disease, 2012. [5] 杨申. P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡、Bcl-2、Caspase-3表达及其学习记忆能力的影响[D]. 山东大学, 2013.查看更多
氢溴酸西酞普兰的医药用途和应用转化? 氢溴酸西酞普兰是一种常温常压下为白色固体粉末的化学药品,被广泛应用于治疗抑郁症。作为选择性的血清素再摄取抑制剂 (SSRI) 类的抗抑郁药,氢溴酸西酞普兰已被FDA批准用于治疗抑郁症。此外,它还可以用作有机合成和医药化学中间体,用于药物分子和生物活性分子的制备和修饰。 氢溴酸西酞普兰的医药用途 氢溴酸西酞普兰片,又名喜普妙,是一种抗抑郁药物,主要用于治疗抑郁性精神障碍。虽然氢溴酸西酞普兰是该类药品的初级版本,但后来研制出的草酸艾司西酞普兰更强效、更安全,被认为是最纯的五羟色胺再摄取剂,因此成为许多医生首选的药物。 氢溴酸西酞普兰的应用转化 图1 展示了氢溴酸西酞普兰的应用转化过程。通过将氨水加入氢溴酸西酞普兰的悬浮液中,然后进行反应和萃取,最终得到游离的西酞普兰。在氩气环境下,将西酞普兰与α-氯乙基氯甲酸酯反应,经过一系列步骤,最终得到目标产物。 图2 展示了另一种氢溴酸西酞普兰的应用转化方法。通过在乙醇中进行反应,最终得到目标产物分子。 参考文献 [1] Kumar, Vivek et al ACS Medicinal Chemistry Letters, 5(6), 696-699; 2014 [2] Godek, Dennis Michael and Howard, Harry Ralph U.S. Pat. Appl. Publ., 20150038507, 05 Feb 2015 查看更多