小黄静--盖德问答-化工人互助问答社区

小黄静

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齿轮泵出口安全阀计算？ 查看更多 2个回答 . 7人已关注

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史义安催化剂合成？各位大大，有么做过史义安催化剂合成，我现在卡在氧化反应上了，拿不到终产物，求指教。我用pcc氧化的，TLC看不到原料了，2,4-二硝基苯荆显示产物生成，处理后用石油醚尝试重结晶失败（没有正己烷了）。查看更多 5个回答 . 10人已关注

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精细化工可以增加竞争力？精细化工作为一门新兴的技术，企业可以通过加强精细化工的技术和研究来进行市场的竞争，重点发展具有优势的精细化学品，以巩固和扩大市场份额，提高经济效益和国际竞争力查看更多 1个回答 . 13人已关注

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靶向药物研究相关文献求助？ 如题，刚接触靶向药物研究这个领域，有没有相关的文献打包发我一下呢？非常感谢！768579199@qq.com查看更多 2个回答 . 20人已关注

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Olex2各向异性选项不能用了，也不显示各向异性了，怎么办？如题，最近突然发现，Olex2软件各向异性选项不能用了，也不显示各向异性了，如图，点各向异性没什么反应，解出来的单晶cif文件也不显示各向异性，这是怎么回事，重装了软件，还是这样，查了查，没找到解决方案，请问有朋友遇到过这样的问题没？前几天卸载过其他软件，不知道是不是不小心删了什么文件 1601603983(1).png查看更多 1个回答 . 13人已关注

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Zahner电化学工作站阻抗谱拟合问题？各位大神，德国Zahner电化学工作站做的阻抗谱怎么拟合？最近用ZSimpwin里面的各种电路都试了，拟合误差都很大，用Zview也一样。上传了一个ZSimpwin拟合的谱图，大家帮忙给看看。微信图片.jpg查看更多 1个回答 . 18人已关注

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COD微波消解仪哪个品牌最好？ 想买一个新的查看更多 6个回答 . 15人已关注

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Canoco 4.5 出现问题，如何解决? Canoco 4.5 出现问题，如何解决？ 111.png查看更多 3个回答 . 11人已关注

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锌空电池放电电压低？请教各位大神我在做Pt/t 锌空电池充放电测试的时候发现放电电压特别低只有0.2V 左右电流也很小只有70mA 跟文献里面差别很大请问是什么原因。下面有测试参数查看更多 2个回答 . 4人已关注

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如何判断一个材料为锂离子电池的负极还是正极。？ 要做一个材料用做锂离子电池电极，如何判断他是负极还是正极?还是说既可以做正极又可以做负极(与对电极的电势进行对比，高的为正极) 查看更多 2个回答 . 12人已关注

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电转染实验过程影响因素？ 1 电场参数电场是电转染的重要因素，细胞在电场的作用下，膜通透性增加或是形成小孔，以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此，一个适宜的电场强度至关重要。不同细胞系具有不同的最佳场强值，其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外，还可以采取较为简便的间接法。文献显示存活率在50%左右的电场参数为理想参数，故可间接测定存活率来确定最佳场强值。 2脉冲过程 1）脉冲波形脉冲波形主要分为两种：1、方波脉冲；2、指数递减波脉冲。方波脉冲是指：电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。指数递减波脉冲是指：先对电容充电，然后让电容完全放电，其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。 2）脉冲时间脉冲时间的选定主要取决与脉冲波形。在方波脉冲中，脉冲时间可直接设定。在指数递减波脉冲中，脉冲时间是指电压衰减至初始电压1/3时所用的时间，等于电容（C）与电阻（R）的乘积，单位是ms。在参数优化中，增加电压应当降低脉冲时间，而减小电压则应当增大脉冲时间。 3）脉冲次数一般而言，对于大多数细胞类型都选择单次脉冲。而在有些情况下可能会用到多次脉冲，因为低电压、短脉冲时间、多次脉冲可有效避免细胞损伤。多次脉冲建议中间间隔1min。 3细胞因素用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定期的细胞差，电转后，细胞膜的恢复能力强，而且处于有丝分裂期的细胞更容易接受外源DNA.细胞悬液浓度一般为1*106/ml，当细胞生长密度大于3*106/ml，转染效率会下降。原因除了细胞老化外，细胞过密会使相邻细胞相互作用增大，甚至使细胞相互融合，从而导致电场的局部微扰，使电场环境无法均一化，细胞体积越大对电击越敏感，所需电场强度也越小。 4 质粒因素从质粒浓度看，细胞密度为1*106/ml，DNA用量在2-5ug/ml转染效率最高。转染率在一定一定范围内随质粒浓度的上升呈线性增高，但是到达一个峰值后，随DNA用量增加而转染率逐渐下降，其原因可能为细胞吸纳DNA有一个饱和度，过量便会产生毒性，使存活率降低，不利于转染率提高。进行小分子量的分子转染时（siRNA/miRNA），应使用高电压、短脉冲时间。大分子量分子转染时（DNA），应使用低电压，长脉冲时间。从质粒的纯度看，用高纯度的DNA才能提高电转的效率，且应注意以下几点：首先DNA／RNA应该超纯(A260／A280>1．8)，其次应不含内毒素，同时质粒应溶于双蒸水而不是TE缓冲溶液。 5 温度一般情况下，电转的过程是在室温下进行，但在电击前后可对细胞进行冰浴处理。电击前冰浴的时间对转染率影响不大，但低温环境能够防止DNA被外源性DNA酶降解，并限制在电击中因Joule作用而产生的不良反应，因此，实验一般选择电击前冰浴5min。电击后冰浴，会影响DNA摄入，因为电击后冰浴可增强细胞收缩，细胞膜上的电穿孔封闭较慢，延长外源性DNA摄入时间，从而提高其摄入量。在室温环境下，虽然细胞膜上的孔封闭速度快，但在随后2h，质粒还可通过电内化进入细胞，因此摄人量不一定比4℃环境下低。而且，室温下细胞在5 min内即闭孔，在4℃的环境下穿孔状态可保持4h，穿孔封闭缓慢降低了存活率，同时细胞在低温下更容易受到损伤。因此，综合考虑摄人量和存活率，大部分文献倾向于电击后细胞仍在室温或37℃下保存。 6电转染试剂的选择电击会对细胞造成一定程度的伤害，在转染试剂的选择上要注意，应选择具有细胞膜修复成分的电转染试剂，如engreen的Entranster-E，将电击对细胞的损伤降到最低。 7电转后培养液的选择细胞在电击后十分脆弱，其培养液的选择应注重提高细胞的存活率，一般选择低渗的RPMI 1640+10％FCS。除此之外，可参考加入50 mmol／L海藻糖+1.25％DMSO，因为海藻糖具有稳定DNA、蛋白质以及细胞膜的作用，并提高电转后细胞特别是淋巴细胞的存活率。此外，有文献显示凋亡是细胞电击后死亡的主要原因，电击后的培养液还可加入Caspase抑制剂和SCFGM-CSF等细胞因子。查看更多 1个回答 . 14人已关注

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甲醛气体？在一个相对较小的密闭空间内，甲醛气体能自己挥发的很均匀吗？因为甲醛气体密度大于空气，如果任其自由挥发的话，我担心会不会都在下层？查看更多 2个回答 . 2人已关注

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5-氨基四唑？ 求5-氨基四唑的合成方法查看更多 1个回答 . 11人已关注

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diamond3.2画的图不能保存，如何解决？ RT。 yourlicense.lic文件存在也保存不了，求一个可以保存的版本。 360截图20191224095933243.jpg查看更多 3个回答 . 1人已关注

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精馏塔课设？ 咋弄啊查看更多 3个回答 . 13人已关注

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铜纳米线的紫外分光光谱是什么样子呢? 铜纳米线的紫外分光光谱在（水或者乙醇）的溶液中的紫外分光光谱一般是什么样子？波峰在哪个范围？查看更多 1个回答 . 10人已关注

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焦油脱水？ 请教各位师父们，是不是焦油温度加热越高，越容易脱水，还是脱水温度就控制在80至90度合适！！查看更多 2个回答 . 18人已关注

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化工工艺热安全？ 有没研究化工工艺热安全的朋友，可以介绍下相关文献吗？查看更多 1个回答 . 20人已关注

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找一款耐高温树脂？ 有没有推荐一款耐180度树脂的，用于纸巾袋包装油墨的，酯溶的最好查看更多 12个回答 . 5人已关注

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请问常见的高分子材料，比如PP的链段长度在哪能查到？ 请问常见的高分子材料，比如PP的链段长度在哪能查到查看更多 2个回答 . 16人已关注

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简介

职业：江苏明化合晟生物科技有限公司 - 售后技术工程师

学校：广东财经职业学院 - 文化应用与传播系

地区：云南省

个人简介：你要知道科学方法的实质，不要去听一个科学家对你说些什么，而要仔细看他在做什么。查看更多

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