什么是HUT 102细胞系? HUT 102细胞系是一种T细胞淋巴瘤细胞系,具有成熟T细胞系的特征。它表面表现出IL-2活性,E花环阳性,同时表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT反应阴性。此外,HUT 102细胞系还可以释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转病毒HTLVI病毒。 T细胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤的一种类型,约占非霍奇金淋巴瘤的10%~15%。在我国,T细胞淋巴瘤的比例更高。根据2008年世界卫生组织(WHO)的分类,T细胞淋巴瘤被分为不同的病理亚型,包括T细胞、NK细胞淋巴瘤/白血病。它们可以原发于淋巴结、结外组织或皮肤。与侵袭性B细胞淋巴瘤相比,成熟或外周T细胞淋巴瘤的预后较差。 淋巴细胞是白细胞中体积最小的一类,是淋巴系统免疫功能的主要执行者。它们由淋巴器官产生,主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞,它们最初的来源相同,都来自造血组织。 如何研究T-淋巴瘤干细胞及其对中药提取物长春花碱的耐药性? 用于诱导T-淋巴瘤干细胞及其对中药提取物长春花碱的耐药性研究 本研究采用CHIR99021和PD173074来筛选和培养T淋巴瘤肿瘤干细胞,并观察诱导后具有肿瘤特征的HUT 102细胞球是否对中药提取物长春新碱具有较强的耐受性,并初步探讨其耐受性的机制。 方法:通过非贴壁细胞球无血清培养法,在体外构建和鉴定T-淋巴瘤干细胞,并观察诱导的T-淋巴细胞瘤细胞球对中药抗肿瘤药长春新碱的耐受性,并初步探讨其耐受性的机制。 筛选富集肿瘤干细胞:通过悬浮细胞培养法回收大量HUT 102细胞中的细胞球,并使用分化抑制剂CHIR99021和PD173074来提取癌症干细胞。 鉴定肿瘤干细胞:通过逆转录PCR检测干细胞特征基因Sox2、OCT4、Nanog、Klf4、Bmil、C-Myc的表达;通过Western blot验证细胞内OCT4蛋白的表达;通过流式细胞术分析细胞表面抗原CD34、CD44的表达;通过溴化乙锭法检测细胞内周期分布情况;通过CFDA-SE荧光染料观察淋巴细胞增殖情况;通过尾静脉移植到裸鼠异体内验证已富集到的HUT 102细胞球具有体内移植能力。 观察耐受性并初步探讨机制:使用CCK8观察诱导的T-淋巴细胞瘤细胞球对抗肿瘤药阿霉素和中药长春新碱的耐受性;使用PCR检测诱导的T-淋巴细胞瘤细胞球耐药相关基因的表达。 参考文献 [1] Screening for Marine Natural Products with Potential as Chemotherapeutics for Acute Myeloid Leukemia[J]. Espen Hansen, Jeanette H. Andersen. Current Pharmaceutical Biotechnology. 2016(1) [2] LncRNA‐Hh Strengthen Cancer Stem Cells Generation in Twist‐Positive Breast Cancer via Activation of Hedgehog Signaling Pathway[J]. Mingli Zhou, Yixuan Hou, Guanglun Yang, Hailong Zhang, Gang Tu, Yan‐e Du, Siyang Wen, Liyun Xu, Xi Tang, Shifu Tang, Li Yang, Xiaojiang Cui, Manran Liu. Stem Cells. 2016(1) [3] Multiple ABC Transporters Efflux Baicalin[J]. Bernadett Kalapos‐Kovács, Balázs Magda, Márton Jani, Zsolt Fekete, Pál T. Szabó, István Antal, Péter Krajcsi, Imre Klebovich. Phytother.Res.. 2015(12) [4] ABCC5 is required for cAMP-mediated hindgut invagination in sea urchin embryos[J]. Shipp Lauren E., Hill Rose Z., Moy Gary W., Go?k?rmak Tufan, Hamdoun Amro. Development. 2015(20) [5] 王珊珊. 诱导T-淋巴瘤干细胞及其对中药提取物长春花碱的耐药性研究[D]. 北京中医药大学, 2015. 查看更多