难.--盖德问答-化工人互助问答社区

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烟叶表面微生物总DNA我提不出来，怎么办? 样品是经过陈化的烟叶，比较干燥的，其表面有一定量的微生物，我需要提取这些微生物的总DNA，经过buffer浸泡和摇1h左右，得到烟叶浸出液，然后双层纱布过滤，离心收集沉淀，进行常规的细菌基因组提取步骤，就是裂解、抽提什么的，大致上按照文献所述。但是我死活提取不出来，nanodrop只有很低的浓度，跑电泳没有完整的条带。我的下一步是要扩增16s的，有一两次有基因组条带，但是PCR也没有出来。试剂盒公司说用叫纯化试剂盒就可以纯化基因组了，我试了，但是结果还是没有PCR出来。之前想买个试剂盒，但是试剂和公司的人说他们之前试过提取这个样品，也没有成功。老板说让我用乙醇沉淀的方法纯化，别用试剂盒了。好吧！但是我现在连完整的基因组都没有啊~估计是富集得不够多，浸出液离心得到的沉淀也是杂质居多，我用过滤的方法，中速滤纸，去掉部分杂质，再离心，提取得到有一点点条带，但是很弱，PCR也没有出来，想纯化一下，估计纯化之后就没有了。崩溃！...老板说这个星期有就要往下做，没也要往下做...各位有没有什么好主意？有人做过这个吗？求助~ 查看更多 1个回答 . 11人已关注

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产物A跟杂质B比溶解度小很多，但在析晶过程中，B总是跟着一块析出? 请教各位大虾一个关于重结晶的问题：产物A跟杂质 B比溶解度小很多，但在析晶过程中，B总是跟着一块析出查看更多 1个回答 . 10人已关注

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含药血浆如何处理? 给动物灌胃给药后，采出的含药血浆一般应如何处理？用氮气吹干一步，可否用压缩空气代替？查看更多 1个回答 . 7人已关注

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C-Met磷酸化检测是否需要饥饿处理 ? 想要检测一种异常蛋白质对于C-Met可能的磷酸化诱导作用，是否需要提前无血清饥饿处理细胞呢？有谁知道血清对于C-Met磷酸化影响大么？总觉得无血清处理不是一种生理状态。。。谢谢啦查看更多 1个回答 . 20人已关注

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TLR4如何下调呢? 求助，怎么样让TLR下调或是阻断呢？有什么方法？查看更多 1个回答 . 13人已关注

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两端固结跟两端铰接的H截面梁构件，腹板高厚比控制上有何区别? 两端固结跟两端铰接的H截面梁构件腹板高厚比控制上的区别是什么？查看更多 1个回答 . 1人已关注

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底板抗浮采用锚杆还是抗浮桩比较好? 以前一般都用抗浮锚杆抗浮。最近咨询了一些专家，都说锚杆施工不方便，效果也不好，建议用抗浮桩。说造价抗浮桩比锚杆多不了多少。请大家说说这2种方法的对比好吗？查看更多 1个回答 . 5人已关注

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用普通方法大提的质粒线性化在切胶回收后还会含有内毒素吗? 想请教各位，用普通方法大提的质粒线性化在切胶回收后还会含有内毒素吗？如果还有残留，那么这个量会影响转染效果吗？谢谢！查看更多 1个回答 . 10人已关注

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MER，ERK，跟MAPK什么联系? MER，ERK，跟MAPK什么联系？是ERK/MAPK信号通路还是还是ERK1/2/MAPK通路？ ERK1/2是什么意思？查看更多 5个回答 . 7人已关注

#MAP

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thermoHERcell 150i气体培养箱面板参数不稳定怎么办? 过完年，再开培养箱参数不稳定，两个箱子，co2数值一直在闪～养细胞，37℃，5%CO2,请问各位大神有知道咋回事的～还有面板上各种符号啥意思？查看更多 1个回答 . 20人已关注

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剪切破坏模式下岩石地基极限承载力的确定方法? 剪切破坏模式下岩石地基极限承载力的确定方法？查看更多 4个回答 . 7人已关注

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海南岛中生代构造环境归属问题? 海南岛在中生代是归属于印支板块还是华南板块？查看更多 1个回答 . 13人已关注

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汽轮机轴承箱呼吸帽喷油现象原因是什么? 车间有一台青岛捷能的汽轮机，轴承箱呼吸帽总是往外喷油，调了调油箱负压值效果不明显，有谁能帮我分析一下原因么？？查看更多 5个回答 . 6人已关注

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求助。关于甲基丙烯酸甲酯的悬浮聚合。？求助各位朋友。我现在想做甲基丙烯酸甲酯和苯乙烯的聚合，查过几篇文献上面的聚合方法很简单，但我操作起来却总也聚合不成颗粒状，都是乳液状的东西，我就是把MMA和苯乙烯混合，以AIBN为引发剂，在聚乙烯醇溶液中悬浮聚合。请问有相关经验的朋友指导一下，问题出在哪里？查看更多 1个回答 . 10人已关注

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如何找调节MMP-7的miRNA? 求助，要做miRNA的实验，现已知可以查某个特定miRNA的有哪几个调节靶点，那反过来，如果要查调节某个特定蛋白（如MMP-7）的miRNA，该如何查呢？谢谢！查看更多 2个回答 . 12人已关注

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铝电解电容充放电太频繁，会导致防爆阀打开？为什么啊? 在查看铝电解电容失效的资料时，看到对电容器失效的分析：失效模式： 1．防暴阀打开：现象：内压增加，内部温度上升。原因：在使用过程中，施加过电压，纹波电流过大，施加反向电压，“频繁充放电”？，施加交流电，使用温度过高。请问铝电解电容充放电太频繁，会导致防爆阀打开？为什么啊！，如何理解这里的频繁（指大于多大的频率），这里和纹波电流有什么关系？查看更多 4个回答 . 19人已关注

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如何区分环丁烷的对位顺反取代？ 碰到区分环丁烷的对位顺反取代的问题查看更多 4个回答 . 8人已关注

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AZ或者BZO导电玻璃上如何能很好的焊接铜线？ 最近在做导电膜，现在有个棘手的问题，导电玻璃如何能很好的把铜线焊接牢固。很急！！！！查看更多 1个回答 . 3人已关注

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鄂托克前旗推进宁夏宝丰煤制烯烃项目落地？鄂托克前旗推进宁夏宝丰煤制烯烃项目落地作者/来源：亚化煤化工日期： 2019-02-21 点击率：82月18日，鄂托克前旗旗委副书记、政府旗长布仁其木格与宁夏宝丰能源集团股份有限公司董事、常务副总裁高建军一行，就项目建设合作事宜进行座谈交流。布仁其木格对宁夏宝丰能源集团股份有限公司关注鄂前旗、投资鄂前旗表示感谢。布仁其木格说，煤炭精深加工是推动经济高质量发展的必然趋势。宁夏宝丰能源集团有限公司是宁夏行业龙头企业，在相关领域具有丰富经验和雄厚资本，总规模180万吨烯烃项目的落地建设，将进一步优化上海庙能源化工基地项目结构，对延伸产业发展链条、完善煤炭产业发展体系、打造煤化工产业集群具有积极的推动作用。鄂托克前旗将在政策保障、部门协调方面全力予以支持。希望宁夏宝丰能源集团股份有限公司加强与各相关部门的沟通对接，尽快做好项目前期工作，为项目落地建设打好基础、做好准备。高建军表示，宁夏宝丰能源集团有限公司将加强与旗委、政府的精诚合作，进一步加强产业发展环境、政策的研究对接，拿出切实可行的具体办法,尽快完善项目研究论证、规划衔接、资源配置等工作，全面落实好项目建设相关事宜，全力推动烯烃项目落户鄂前旗。刘树禄、尤俊宝、吕耀峰、石君，旗人民政府办公室主任尤建兵及政府部门有关负责同志参加座谈。查看更多 1个回答 . 12人已关注

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实时定量PCR步骤？ 哪位大侠有实时定量PCR的详细操作步骤，我是初学者。谢谢查看更多 1个回答 . 7人已关注

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简介

职业：佛山市金辉高科光电材料有限公司 - 技术员（储备干部）

学校：平顶山工业职业技术学院 - 自动化系

地区：安徽省

个人简介：我又这样的无聊了，毫无征兆的，但我十分开心，真心的无聊总是难得。·☆查看更多

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