人表皮角蛋白(EK)ELISA KIT的应用？ 背景 [1-3] 人表皮角蛋白(EK)ELISA KIT采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。该试验通过在预先包被抗体的包被微孔中加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育和洗涤，然后用底物TMB显色。颜色的深浅与样品中的角蛋白含量呈正相关。最后，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）来计算样品的活性。 角蛋白是构成生皮表皮、毛皮毛囊的主要蛋白质。角蛋白是中间纤维蛋白(intermediate protein,IP)家族的重要成员。角蛋白肽链为多结构域肽链，分为高度保留的棒状的中间区域和端肽区域。棒状结构域的肽链存在8肽重复的周期性序列结构。所有的中间纤丝蛋都具有相似的肽链构造。角蛋白肽链是典型的a螺旋。酸性和碱性角蛋白肽链相互结合形成的异体复合螺旋是角蛋白的特征构象形式。现已发现的角蛋白肽链超过20种，毛角蛋白和表皮角蛋白分别由不同的角蛋白肤链构成。角蛋白含有较高的半胱氨酸，半胱氨酸的交联是角蛋白的主要交联结构，角蛋白的物理和化学性质主要与该交联结构相关。 角蛋白是外胚层细胞的结构蛋白，包括毛发、指甲、羽毛等。角蛋白是一种不能直接为畜禽吸收利用的硬蛋白，主要存在于动物的毛发、羽毛和蹄中，资源非常丰富。它必须经过高温、高压、酸、碱或酶处理，变成短肽或游离氨基酸，才能被畜禽利用。羽毛主要由角蛋白构成，蛋白质含量及必需氨基酸含量极高，氨基酸组成相对稳定，是一种公认的具有较高营养价值、质量稳定的潜在优质蛋白源。 应用 [3] 用于表皮干细胞的体表分布及其分离、培养和鉴定 表皮干细胞在人体不同部位皮肤的分布差异。本研究从18-45岁成年男性志愿者身上取得头部、胸部、背部、臀部、大腿内侧、大腿外侧、上臂内侧、上臂外侧、手掌、足底、包皮及阴囊皮肤标本。标本经过固定、包埋和切片后，采用免疫组织化学EnVision法检测皮肤组织中表皮干细胞标志物角蛋白19和整合素β1的表达。通过观察免疫组化结果并记录阳性细胞数，使用SPSS软件分析不同部位皮肤表皮基底层中角蛋白19和整合素β1阳性细胞率的差异。 本研究还对表皮干细胞进行了分离、培养、鉴定和生长特性观察。通过DispaseⅡ酶和胰蛋白酶的分离方法，将表皮细胞分为10分钟粘附组和24小时粘附组。通过流式细胞仪检测转录因子p63和角蛋白19的标记率，并比较两组细胞标记率的差异。同时，观察细胞的克隆形成率和在不同时间点的表达特征。 参考文献 [1]Recovery and repopulation in vivo by mouse skin epithelial cells during fractionated irradiation. Withers H R. Radiation Research . 1967 [2]Stem cells in the skin: waste not, Wnt not. Alonso L,Fuchs E. . 2003 [3]牛云飞. 表皮干细胞的体表分布及其分离、培养和鉴定[D].第二军医大学,2004. 查看更多
Anti-Cyclooxygenase 1抗体的应用及检测原理？ Anti-Cyclooxygenase 1抗体是一类多克隆抗体，能够特异性结合Anti-Cyclooxygenase 1。它主要用于多种免疫学实验，如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理是通过双抗体夹心法来测定标本中Anti-Cyclooxygenase 1的水平。首先，将纯化的Anti-Cyclooxygenase 1抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，依次加入样本中的Anti-Cyclooxygenase 1和HRP标记的Anti-Cyclooxygenase 1抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，然后在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中的Anti-Cyclooxygenase 1浓度成正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中Anti-Cyclooxygenase 1的浓度。 环氧化酶（Cyclooxygenase, COX）是一种双功能酶，具有环氧化酶和过氧化氢酶活性，是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶。目前已发现两种COX同工酶，分别是COX-1和COX-2。 COX-1是结构型酶，主要存在于血管、胃、肾等组织中，参与调节血管舒缩、血小板聚集、胃黏液分泌和肾功能等。它的功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管阻力和调节肾血流量分布有关。 COX-2是诱导型酶，当受到损伤性化学、物理或生物因子的刺激时，磷脂酶A2会水解细胞膜磷脂生成花生四烯酸，然后经COX-2催化加氧生成前列腺素。 COX-1基因与吸烟交互作用对缺血性卒中预后的相关性研究 阿司匹林是临床上用于缺血性卒中二级预防的常用药物。然而，有些患者对常规剂量的阿司匹林反应不足，出现不良结局，这被称为“阿司匹林抵抗”。遗传因素和环境因素可能在其中起重要作用。 环氧化酶-1（COX-1）作为阿司匹林的直接作用靶点，其编码基因COX-1的遗传变异可能导致对阿司匹林不敏感。吸烟作为一种重要的环境危险因素与多种疾病相关。然而，COX-1基因和吸烟是否存在交互作用，以及交互作用对服用阿司匹林的卒中患者预后是否产生不良影响，目前还不清楚。 本研究旨在建立中国汉族服用阿司匹林的缺血性卒中队列，分析COX-1基因多态性、吸烟以及二者的交互作用对缺血性卒中患者功能预后的影响。 方法：从南京卒中注册系统中提取2009年12月至2012年10月服用阿司匹林的急性缺血性卒中患者。 采用改良多重连接酶检测反应（iMLDR）方法对COX-1基因的三个单核苷酸多态性位点（SNPs）rs1330344、rs3842788和rs5788进行基因分型。 参考文献 [1] Xingyang Yi, Chun Wang, Qiang Zhou, Jing Lin. Interaction among COX-2, P2Y1 and GPIIIa gene variants is associated with aspirin resistance and early neurological deterioration in Chinese stroke patients. BMC Neurology. 2017(1). [2] Deepak L. Bhatt, Tilo Grosser, Jing-fei Dong, Douglas Logan, Walter Jeske, Dominick J. Angiolillo, Andrew L. Frelinger, Lanyu Lei, Juan Liang, Jason E. Moore, Byron Cryer, Upendra Marathi. Enteric Coating and Aspirin Nonresponsiveness in Patients With Type 2 Diabetes Mellitus. Journal of the American College of Cardiology. 2017(6). [3] Amelia K. Boehme, Charles Esenwa, Mitchell S. V. Elkind. Stroke Risk Factors, Genetics, and Prevention. Circulation Research. 2017(3). [4] Valery L. Feigin, Bo Norrving, George A. Mensah. Global Burden of Stroke. Circulation Research. 2017(3). [5] 蔡洹. COX-1基因-吸烟交互作用与缺血性卒中预后的相关性研究[D]. 南方医科大学, 2017.查看更多
吡啶氢氟酸盐的应用及其合成方法？ 简介 吡啶氢氟酸盐化合物在农药、医药、材料领域具有广泛的应用。其独特的吡啶结构在各类药物研究中扮演着重要角色。作为重要的化工中间体，吡啶氢氟酸盐广泛应用于医药、农药、染料以及其他有机合成中。它在复杂结构的化合物骨架构建、药物中间体合成、天然产物合成以及荧光材料开发等多个领域都有应用。总之，吡啶氢氟酸盐具有特殊的化学性质和药用活性，是许多医药、农药的中间体，具有广阔的应用前景。随着有机合成化学领域的快速发展，不断涌现出新的催化剂、合成方法和合成工艺。 合成 图1 展示了吡啶氢氟酸盐的合成路线。为了合成吡啶氢氟酸盐，需要将吡啶固化后，通过入口管将无水氟化氢冷凝到瓶中。然后，将溶液加热至室温，最终得到吡啶氢氟酸盐。 运输 在吡啶氢氟酸盐的运输过程中，应避免日晒和雨淋，并且不得与有毒、有害物品混运。吡啶氢氟酸盐属于非危险品，可按照一般化学品运输的标准进行。 贮存方法 吡啶氢氟酸盐化合物应贮存在干燥、清洁、避光的环境中，严禁与有毒物质混放，以免污染。同时，应将其储存于阴凉、通风的库房，远离火源、热源和水源。吡啶氢氟酸盐也应与氧化剂分开存放，切忌混储。此外，储存区应配备相应品种和数量的消防器材，并备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。 参考文献 [1] Boateng， Kenneth A.; et al. Removal of light fluoroalkanes from hydrocarbon streams by contacting with strong acid functionality adsorbent. United States. 查看更多
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