无血清培养基的应用及其对人表皮干细胞的影响? 背景 [1-3] 无血清培养基是一种不含异源动物成分(Xeno-free)的人免疫细胞培养基,适用于各类免疫细胞的培养,如人淋巴细胞、CIK、DC、NK等。它具有高成活率、杀伤活性和扩增倍数的特点。 无血清培养基是一种不需要添加血清的合成培养基。它包含了血清中的粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等成分,可以减少血清带来的不利因素,提供更稳定的细胞培养条件。在细胞培养领域,无血清培养基已成为一种重要的趋势,它可以简化纯化和鉴定细胞产物的程序,避免病毒污染的危害。 无血清培养基在人表皮干细胞研究中的应用 [4][5] 人表皮干细胞的分离和培养方法研究 该研究旨在探索人表皮干细胞在有血清和无血清培养基中的生长特性,并寻找适合其体外培养的条件,以实现人表皮干细胞的良好增殖。 研究采用DispaseⅡ酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞,并制备了基于人成纤维细胞条件培养基的表皮干细胞培养基。通过角朊细胞培养作为对照组,观察人表皮干细胞的细胞形态、克隆形成率和克隆维持时间,并使用免疫细胞化学法检测β1整合素和K19的表达,以鉴定表皮干细胞。此外,将富集分离出的人表皮干细胞分为有血清培养基和无血清培养基两组进行培养,观察和比较细胞形态、克隆形成率、生长曲线以及β1整合素和K19的强阳性表达率。 研究结果显示,在Ⅳ型胶原快速包被的培养皿中,快速贴壁细胞经继续培养后,细胞克隆数增多,两周后可见大克隆形成。与角朊细胞相比,表皮干细胞具有更强的克隆形成能力,并能形成较大的克隆,两者的形成率分别为17.04±1.01%和8.72±0.73%,两者之间存在显著差异(P 参考文献 [1]Isolation of human epidermal stem cells by adherence and the reconstruction of skin equivalents[J].D.-S.Kim,H.-J.Cho,H.-R.Choi,S.-B.Kwon,K.-C.Park.Cellular and Molecular Life Sciences.2004(21) [2]Epidermal Stem Cells[J].V.V.Terskikh,A.V.Vasil’ev.Biology Bulletin of the Russian Academy of Sciences.2001(6) [3]An improved method for culture of epidermal keratinocytes from newborn mouse skin[J].Lari H?kkinen,Leeni Koivisto,Hannu Larjava.Methods in Cell Science.2001(4) [4]Cultivation of human keratinocyte stem cells:current and future clinical applications[J].G.Pellegrini,S.Bondanza,L.Guerra,M.Luca.Medical&Biological Engineering&Computing.1998(6) [5]邱泽亮.人表皮干细胞的分离和培养的研究[D].江西医学院,2005.查看更多