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细胞污染问题求解?
本人前三年做 细胞培养 ,跑WB相对来说都比较顺利。然后去年年初开始发生过一次支原体污染,跑出来的条带全都是杂带。使用了支原体清除试剂之后,WB的结果又OK了。到了去年年末,细胞好像对喹诺酮类的支原体药物产生了抗性。结果又不好了。 现在的细胞状态就是,形态大致不改变。细胞核周围都是小黑点(支原体污染后导致 细胞凋亡 )。培养液从皿的上方往下看是澄清的。但是从侧面看会有轻微浑浊(只是没有以前培养那么澄清了)。虽然没有像细菌污染那样 培养基 全混了,但是在提蛋白,弃培养基用PBS洗的时候,能发现细胞上面有黏糊糊的一层东西(这个我就不确定是真菌还是支原体了,支原体污染我之前清除以后,细胞核周围凋亡小体就没了,现在加了支原体清除药物,还是有小黑点,所以有没有可能是真菌污染?)。WB跑出来的条带都是杂带,磷酸化蛋白根本出不来(p-p38这种高表达的除外),泳道外很干净,所以不会是封闭问题。一抗二抗之前都OK,所以也不会抗体问题。提蛋白的时候都注意低温,而且加了抑制剂,应该不会降解。前三年跑了2000多块胶的WB,结果都还好,个人觉得也不是WB手法问题,所以觉得应该是细胞污染的问题。由于是稳定转染细胞株,筛了很多单克隆才筛到一个好的,所以想能救就救一下吧。 现在想求教几个问题:1.我的细胞是否是支原体污染?2.如果是支原体耐药了,现在还有什么办法吗?3.有没有在提蛋白前把那层白色的东西去掉(我用细胞刮刀的,能不能用胰酶消化,然后差速离心)?4.杂带是不是因为支原体污染导致细胞凋亡,蛋白产生泛素化导致的?5.能否在现在的条件下,暂时应急想办法处理细胞做WB?图片是total JNK就已经跑成这样了,磷酸化的就惨不忍睹了~求助大神们
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DCS与STC的反歧化反应都能用哪些催化剂?
面对着 多晶硅 市场的低迷,DCS与STC的反歧化反应成为一种节约成本、降低能耗的趋势。求教这个反应需要用哪些 催化剂 呢?具体是怎么反应的?
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一水乳糖的鉴别不出来,为什么?
本人在检验 一水乳糖 时,用 薄层色谱 爬板子,发现其做不出来,每次做实验时标准溶液总是只有三个点,想请教一下为什么。
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进气口能不能开在机翼上方?
米格-29的进气口开在大边条翼下,当需要机头迅速抬起时,使得进气口被屏蔽,为避免发动机停车,在机翼上方开了几个百叶窗(如图),那么进气口能不能开在机翼上方,这样不仅可使原来的进气道处用来增加油量或武器,还可以吸附机翼上的附面层,只要在进气口内侧下方的机翼上开几个百叶窗,当飞机大迎角机动时,打开百叶窗,以使得发动机吸入足够的 空气 。
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铁酸锂制备?
我是做锂电材料的,最近上级要求做 铁酸锂 材料,本人之前没有做过。按照文献来做,发现各种问题,有做过相关研究的吗?可以一起交流。
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alfa PDMS怎么固化?
最近需要用到PDMS来固化封装一个材料,因为不是很懂,所以就直接买了alfa的PDMS M.W.2000,不含 固化剂 ,现在是固化不了哦,请教各位大侠,这个alfa的PDMS需要配什么样的固化剂呢?万分感谢
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如何确定p-AKT的检测时间 ?
向各位战友求教:看过多篇英文文献,关于p-AKT的western blot检测时间,有的为1-2小时,有的却有24小时,差别之大,想知道原因。见到以前战友问过类似问题,可是关于这个时间点的把握始终弄不明白,还望实验室大虾不吝指教!
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大二做一个课题,不知道公式,求解(づ ●─● )づ?
薄层色谱 法计算物质含量的公式 和HPLC计算物质含量的公式
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文献中提到rinse这个词,不知道指的是什么?
如题,rinse指的是漂洗吗?还是冲洗?具体的操作方法是什么?
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生物医学方向有什么1分多的灌水杂志吗?
我有一水文,是关于T 细胞培养 与T细胞免疫的。 水成什么样子呢?创新性非常不够,实验方法与实验成果混杂,估计Plos one 之类的2分多的杂志是肯定不要啦。 预期投个4区杂志。不过已经写好了,实验又补了。所以就再投啦。 大家有什么建议呢? 要是建议被采纳必有微信红包啊。
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膜材料对金属离子的吸附?
请教一下,膜材料在水处理去除金属离子过程中,膜表面会不会吸附金属离子?如果吸附,如何表征膜对金属离子的吸附?有没有一种膜可以不吸附金属离子的?
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材料工程求带走?
317分,一愿报的东北大学材料工程专硕,政治68,英语45,数学69,专业课136.
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硝酸和硫酸的混合液可以水热吗,会爆炸吗?
如题,有人这么做过吗
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循环氢压缩机干气密封停机怎么处理?
汽轮机 连锁停机, 压缩机 干气密封怎么处理!
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GD1管道焊接后是否需要热处理,依据标准是什么?
工艺管道上涉及到了GD1、GD2管道焊接的问题,想咨询一下焊接后是否需要进行热处理,具体的依据标准是哪个?
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用WORKBENCH做谐响应分析,模态叠加法和完全法应力值差别问题?
用WORKBENCH做谐响应分析,分别使用模态叠加法和完全法,应力值差别几十兆帕是怎么回事?
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这个岩性怎么定,这是变粒岩吗?
麻烦帮忙看看这个岩性怎么定,这是变粒岩吗?还是怎么定名?
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默沙东亚洲研发总部成立 雇用600名科学家?
援引路透社最新更新,北京研发中心将雇用600名科学家,研发涉及从药物发现到临床试验,中心还将寻求与生物技术公司,学术实验室的战略合作。默沙东承诺未来五年内在中国投入15亿元美金的研发资金。 默沙东表示,“秉承默沙东的传统,我们期望通过在华加大直接研发投入,为中国公众带来更多的创新产品和服务。” 默沙东亚洲研发总部位于北京望京工业园,总面积为47000平方米。预计一期工程将于2014年完工,届时将有约600名工作人员在此进行药物研发、转化性研究、临床开发、注册事务及外部研发项目。 偶认为应该是600名民工
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GC 2010故障?
如图正在使用的是FPD检测器,ECD属于关闭状态,但是仍然有流量,所以会报漏气,大家能帮忙看一下是什么原因吗 微信图片_20190127095422.jpg 微信图片_20190127095430.jpg 微信图片_20190127095743.jpg
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请教一下各位朋友:药学或药厂工作的人都可以考什么职称啊 具体名字叫什么 多谢!?
请教一下各位朋友:药学或药厂工作的人都可以考什么职称啊 具体名字叫什么 多谢!我知道执业药师是可以考的
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简介
职业:液化空气有限公司 - 设备工程师
学校:威海职业(技术)学院 - 生物与化学工程系
地区:湖北省
个人简介:
持续不断地劳动是人生的铁律,也是艺术的铁律。
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