本文介绍了人微量转铁蛋白(MTF)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒的实验原理和操作步骤。

试剂盒组成

实验操作步骤

1. 加样：在酶标包被板上设空白孔和待测样品孔。将待测样品稀释液40μl加入待测样品孔底部，然后再加入待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。轻轻晃动混匀。

2. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔。按照一定比例将标准品和标准品稀释液加入不同的孔中，混匀。

3. 温育：将封板膜封板后置于37℃温育30分钟。

4. 配液：将洗涤液稀释后备用。

5. 洗涤：揭掉封板膜，加入洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次。

6. 温育：操作同3。

7. 洗涤：操作同5。

8. 显色：加入显色剂A和显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

9. 加酶：加入酶标试剂。

10. 终止：加入终止液，终止反应。

11. 测定：以空白空调零，以450nm波长测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

主要参考文献

[1] 吴惠毅 沈来龙；糖尿病患者尿液微量转铁蛋白检测的临床意义。《江苏医药》1994年 第9期。