健那绿 B,英文名为Janus green B,是一种绿色固体粉末,在常温常压下可溶于水但微溶于醇类有机溶剂。它是一种专一性活体染色剂,常用于线粒体活体染色、真菌和原虫染色、胚胎切片染色,以及作为氧化还原指示剂和铜的电镀添加剂。在生物化学和荧光染料等领域有广泛应用。
图1 健那绿 B的性状图
以4-氨基-N, N-二乙基苯胺或对苯二胺为起始原料,经过氧化剂存在的环合反应和偶合反应可制备得到健那绿B。
线粒体中的细胞色素氧化酶使健那绿 B保持氧化状态呈蓝绿色,而在细胞质中被还原成无色状态。这种原理可用于鉴别有线粒体的细胞的死活。
将0.5g健那绿 B溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏使其充分溶解。
健那绿 B可用作线粒体活细胞染料,帮助观察线粒体在细胞中的分布和形态,为细胞研究提供重要信息。除此之外,它还被广泛用作结构和生物大分子的功能探针。
[1] 吴艳. 健那绿B和铁苏木精对线粒体染色比较[J]. 中学生物学, 2015(1):2.
健那绿B(JanusgreenB)是一种专一性线粒体活细胞染料,可以在高倍显微镜下观察线粒体的分布和形态。根据前期的文献查阅,发现关键中间体亚甲基紫3RAX的合成方法没有文献报道,且国内没有大规模生产,主要依赖进口。因此,我们结合制药工艺路线设计中的模拟类推法,参考苯基吩嗪类化合物的合成方法,成功地制备了健那绿B。
健那绿B作为一种有机染料,包含偶氮嗪发色团,可以作为结构的有效探针,用于生物大分子的功能探针和一些生物过程的研究模型。近年来,染料-蛋白质相互作用引起了蛋白质化学和超分子化学的极大兴趣。此外,由于健那绿B本身带有正电荷,它在电镀材料方面也具有潜在的应用价值。
健那绿B的制备方法如下:
1)亚甲基紫3RAX的制备:首先将对苯二胺和N,N-二乙基苯胺溶解在盐酸中,然后滴入醋酸-醋酸钠缓冲溶液,加入重铬酸钾进行反应。随后加入苯胺,升温反应后过滤,洗涤滤饼,减压浓缩得到紫色粉末。
2)健那绿B的合成:将亚甲基紫3RAX溶解在盐酸中,滴加亚硝酸钠溶液,继续搅拌反应。然后加入N,N-二甲基苯胺继续反应,减压至干,分散于饱和盐水中,过滤干燥得到暗绿色固体粉末。
[1] CN201210047336.4一种健那绿B的合成工艺
[2] 健那绿B的合成及其中放流程的设计
盈峰环境5月17日晚间公告,正在筹划重大资产重组,拟发行股份购买长沙中联重科环境产业有限公司100%股权,预计交易额将超145亿元,交易对方为宁波盈峰资产管理有限公司、中联重科、弘创(深圳)投资中心等。盈峰环境股票18日起停牌。
盈峰环境(000967)5月17日晚间公告,正在筹划重大资产重组,拟发行股份购买长沙中联重科环境产业有限公司100%股权,预计交易额将超145亿元,交易对方为宁波盈峰资产管理有限公司、中联重科(000157)、弘创(深圳)投资中心等。盈峰环境股票18日起停牌。
这是盈峰环境拿下中联环境完全控制权的终极一步。此前,由盈峰控股收得中联环境51%股权。这场历时一年、谋划良久的超大并购终将落下帷幕。值此并购里程碑之际,中国水网特与读者一同回顾这场惊动行业的“恋爱史”:
2017年5月21日,中联重科晚间公告称,公司拟以116亿元的价格向盈峰控股等4家受让方,合计转让全资子公司——长沙中联重科环境产业80%的股权。中联重科同时表示,仅依靠自身积累,短期内难以为环境运营业务的快速发展提供充足支持。而引入资金实力雄厚以及项目资源广泛的新股东,可确保环境产业公司继续高速发展。另外,公司可聚焦工程机械和农用机械领域。经初步估算,此次公司交易将实现91.31亿元税前利润。
具体来看,环境产业公司所转让的80%股权中,51%股权由盈峰投资控股集团有限公司(下称“盈峰控股”)受让,对价73.95亿元。21.5517%股权由弘创(深圳)投资中心(有限合伙)(下称“弘创投资”)受让,对价31.25亿元,4%股份由广州粤民投盈联投资合伙企业(有限合伙)受让,对价5.8亿元;3.4483%股权由上海绿联君和产业并购股权投资基金合伙企业(有限合伙)(下称“绿联君和”)受让,对价5亿元。
消息公布后,引起了环境产业不小的震动。中联重科环境产业公司是国内领先的集环境装备制造、投资、运营为一体的全环境产业集团,业务涵盖环卫机械与环境装备等高新技术装备研发制造、环境项目与环卫PPP项目投资与运营。因其招牌过硬、市场占有率高,是国内环境产业,尤其是环卫领域的一面旗帜。116亿也不是一笔小数目,相当于中联重科港股市值的37%。
早在2013年,中联重科就做出重大战略调整,将环卫机械分公司更名为环境产业公司。此后,中联重科接连收购意大利LADURNER、淮安晨洁等,积极布局环境领域。公司负责人曾在股东大会上表示,未来公司将加快实现环境产业过百亿。近年来,中联环境也有着不错的成绩单:据E20环境产业俱乐部统计,2017年前三季度,中联环境累积中标额已超50亿元。(相关阅读→ 中联环境累积中标超50亿!环卫一体化PPP这么做才精彩)
彼时收下中联重科环境业务51%股权的盈峰系同样大有来头。其实控人为何剑锋,是美的集团董事长何享健独子。盈峰控股成立于1994年,旗下产业涵盖环保与高端装备、金融、消费、文化、新材料等五大板块;同时是易方达基金管理公司并列第一大股东,是广东民营投资股份有限公司(简称“粤民投”)创立发起人之一。(相关阅读→ 818新晋壕:74亿元收中联重科环境业务51%股权的盈峰系)
在制造领域,盈峰集团控股国内风机行业第一家上市公司——上风高科,后更名为盈峰环境(000967)。盈峰环境是盈峰控股旗下唯一一家面向环境产业的专业公司,盈峰控股持有盈峰环境32.23%股权。控股中联重科环境产业后,盈峰控股将拥有目前国内最全的环保产业平台,构建出覆盖环保装备、环境监测、环境治理、环境运营服务的全领域综合性环保平台。
2017年6月,盈峰控股又将收购中联重科环境51%的股权,全数转让给旗下全资子公司宁波盈峰资产管理有限公司。
如今,盈峰环境拟发起的这一笔145亿大并购,当为上回116亿并购后的进一步资产调整:自持有中联环境部分股权的几家股东手中买下股权,并将中联重科持有的剩余20%股权一并拿下。
关注中联-盈峰系列并购的行业人士大约都还记得盈峰何剑锋的那封“致员工信”,题为“更好的未来,从这里开始”。笔者从中摘取部分段落如下:“我们提倡中国梦,盈峰人也有自己的梦想。我们所为,不止为自身,更为世界而创造;我们所想,不止于明日,更为远见未来。更好的未来,从这里开始。从此,看万山红遍!”