氯化硝基四氮唑蓝 (NBT;N8140-Solarbio)是一种常用于测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和凝血因子I的底物。它还是碱性磷酸酶底物之一，在碱性磷酸酶的催化下生成不溶性的蓝色产物。NBT在免疫组化、免疫细胞化学和蛋白印迹等实验中广泛应用。此外，NBT还可作为一种筛查尿道感染的方法。在血清糖化低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的测定中，NBT还原法可以直接用光密度表示其浓度，并计算相应的指数。

氯化硝基四氮唑蓝在化学试剂领域具有重要应用价值，不仅在生化实验和临床体外诊断中广泛使用，而且在化妆品行业中也发挥着重要作用，特别是在抗氧化功效检测方面。抗氧化是美容护肤的热门话题之一，抗氧化剂是化妆品中起到抗氧化效果的关键成分。NBT法可以用于测定抗氧化剂活性或测定活性氧的消除率，从而评价化妆品的抗氧化效果。

根据已公开报道，NBT法被韩国某化妆品公司用于检测其产品的抗氧化功效。该方法利用NBT法测定黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶生成的活性氧，评价检测物消除活性氧的效果。化妆品中常见的抗氧化剂如SOD、维生素C和维生素E等都可以通过NBT法进行测定。

除了在化妆品抗氧化剂的测定中，NBT法还可以用于测定其他化妆品成分的抗氧化能力。例如，王丽丽等人使用NBT法测定了一种新型化妆品抗氧化剂的能力，并验证了其对超氧阴离子的清除能力。

参考文献：

1.人参叶提取物制造方法及包含其为有效成分的化妆品组合物 CN105267268A

2.一种特定聚合度壳寡糖的制备方法及其在化妆品上的应用 CN110387392A

简介

四氮唑是一种重要的五元杂环化合物，常用名为四唑或1H-四氮唑。其CAS号为288-94-8，分子量为70.05，具有白色至灰白色的结晶粉末状外观。四氮唑在室温下稳定，熔点范围在155-158°C之间，沸点约为220°C，密度约为1.5±0.1 g/cm3。这些基本的物理参数为我们揭示了四氮唑的基本性质，也为其在不同领域的应用奠定了基础[1]。

 

四氮唑的性状

化学性质

四氮唑的化学性质丰富多样，这主要得益于其独特的分子结构。其分子中四个氮原子以五元环的形式相连，形成了高度稳定的共轭体系。这种结构不仅赋予了四氮唑较高的熔点和沸点，还使其在某些化学反应中表现出独特的催化活性和选择性。四氮唑在水中的溶解度较好，可溶于二甲基亚砜、甲醇等有机溶剂。此外，其还具有一定的酸度系数（pKa），这意味着在适当的条件下，四氮唑可以发生质子化或去质子化反应，从而改变其化学性质[2-3]。

用途

在医药领域，四氮唑类药物展现出了强大的生命力和广泛的应用前景。截至目前，药渡数据库中已收录了126个四氮唑类药物，其中33个已经批准上市，覆盖了感染性疾病和心脑血管疾病等多个治疗领域。这些药物的靶点主要集中在细菌青霉素结合蛋白家族（PBPs）和血管紧张素II-1型受体（AT1）等关键生物分子上，通过抑制细菌生长、调节血压等机制，为患者带来了福音。

以最新上市的四氮唑类药物Cenobamate为例，该药由韩国SK biopharmaceuticals公司研发，并于2019年获得美国食品药品管理局（FDA）批准，用于治疗成人部分发作性癫痫。Cenobamate通过抑制电压门控钠电流来减少重复性神经元放电，从而有效控制癫痫发作。此外，其对于神经性疼痛、躁郁症和焦虑症的研究也正处于不同阶段的临床试验中，显示出了广阔的应用潜力[1-4]。

参考文献

[1]张海霞,方芸,葛卫红,等.四氮唑盐法肿瘤药敏试验及应用[J].中国医院药学杂志, 2005, 25(007):663-664.

[2]杜传书,芮琳.筛选红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶缺乏症的四氮唑蓝纸片法[J].新医学, 1981(4):2.

[3]冯婉玉,蔡爽.含硫四氮唑基团药物的戒酒硫反应[J].中国临床药学杂志, 2001, 10(5):2.

[4]刘瑞恒,付时雨,詹怀宇.四氮唑蓝显色检测超氧阴离子自由基的研究[J].分析测试学报, 2008, 27(4):355-359.

1. 甲氧苄啶：甲氧苄啶是一种抗菌药物，常用于治疗感染性疾病。它属于磺胺类药物，通过抑制细菌的蛋白质合成来发挥抗菌作用。甲氧苄啶广泛用于治疗呼吸道、泌尿道、皮肤和软组织等感染。

2. 多西环素：多西环素是一种广谱抗生素，可用于治疗多种感染。它属于四环素类药物，通过抑制细菌的蛋白质合成来发挥抗菌作用。多西环素常用于治疗呼吸道、泌尿道、皮肤和软组织感染，以及疟疾、淋病等疾病。

3. 阿奇霉素：阿奇霉素是一种广谱抗生素，属于大环内酯类药物。它具有抗细菌和抗病毒活性，常用于治疗上呼吸道感染、皮肤软组织感染和性传播感染等。阿奇霉素也可以用于治疗胃肠道感染和肺结核等疾病。

4. 氨基糖苷类抗生素：氨基糖苷类抗生素包括庆大霉素、妥布霉素等，具有广谱抗菌活性。它们主要用于治疗严重的细菌感染，如肺炎、败血症和尿路感染等。氨基糖苷类抗生素对于革兰阴性菌感染特别有效。

5. 磺胺类药物：除了甲氧苄啶，磺胺类药物还包括磺胺嘧啶、磺胺吡啶等。它们主要用于治疗细菌感染，如泌尿道感染、肺炎和中耳炎等。磺胺类药物通过抑制细菌的二氢叶酸合成来发挥抗菌作用。

综上所述，除了四氮唑蓝，还有其他一些具有类似功能的药物，包括甲氧苄啶、多西环素、阿奇霉素、氨基糖苷类抗生素和磺胺类药物。这些药物在治疗感染性疾病方面发挥着重要的作用。

氯化四唑蓝是一种常温常压下为黄色结晶固体的化合物，可溶于热水和丙酮，但在氯仿中溶解性较差。作为一种蓝色染料，氯化四唑蓝在微生物研究中具有重要的应用价值，可用于细菌和霉菌的染色，并在生物化学基础研究中发挥重要作用。此外，氯化四唑蓝还可用于氧化还原酶的测定，如琥珀酸脱氢酶。

图1 氯化四唑蓝的性状图

氯化四唑蓝的化学性质

氯化四唑蓝具有一定的吸湿性，并对光照较为敏感。在还原剂的作用下，它可以被还原为蓝色的四唑甲氮。蓝色的四唑甲氮可用于测定酵母菌株中琥珀酸脱氢酶的活性。通过从细胞中提取蓝色的四唑甲氮，并测试其吸收光谱，可以得到其在480-600nm范围内的宽波长吸光度，其中在540nm处具有最大吸光度。蓝色的四唑甲氮与琥珀酸脱氢酶结合。

氯化四唑蓝的应用

氯化四唑蓝是一种重要的生化试剂，广泛应用于还原糖的检测、生物化学研究和实验室中。它可用于皮质甾类和氧化还原酶（如琥珀酸脱氢酶）的测定。此外，氯化四唑蓝还在种子发芽和活力试验、细菌和霉菌染色以及还原糖含量的研究中发挥重要作用。还原糖是一类具有还原性的糖类化合物，如葡萄糖和果糖。氯化四唑蓝可以与还原糖在加热的碱性溶液中反应，生成不溶性的红色三苯福尔马散沉淀。通过观察溶液颜色的变化，可以判断其中是否存在还原糖。此外，氯化四唑蓝还可用于实验室中的细胞、细菌和组织切片染色，以便观察其形态和结构。此外，它还可用作生物化学合成试剂，用于制备DNA-阳离子络合物及抗DNA抗体的免疫吸附剂。

参考文献

[1] 刘景芝, 赵夏令. 氯化四唑蓝比色法测定微量2-脱氧-D-葡萄糖. 分析化学 1983: 40.

咔唑是一种化合物，也被称为carbazole。它有多种别名，包括二苯并吡咯、9-氮杂芴、carbaz-ole、9-azafluorene和dibenzopyrrole等。

咔唑的CAS登记号是[86-74-8]。

咔唑是一种白色单斜片状晶体，具有特殊气味，并且能够升华。它的沸点为354.75℃，熔点为244.85℃。咔唑易溶于丙酮，微溶于苯、乙醚和乙醇，难溶于氯仿、醋酸、四氯化碳和二硫化碳，不溶于水。它具有耐酸和碱的特性。咔唑类似于仲胺，其中的一个氢原子可以被碱金属取代。

咔唑可以用于制取硫化染料、色酚AS-IB、蒽醌还原染料、噁嗪染料以及杀虫剂四硝基咔唑。此外，它还可以用于制作对紫外光敏感的照相干片，以及作为木质素、糖和甲醛的试剂。

咔唑可以通过合成法和精馏法进行制取。合成法使用邻氨基二苯胺为原料，经过亚硝酸处理制得1-苯基1,2,3-苯并三唑，然后加热失去氮生成咔唑。精馏法则是利用咔唑的沸点较高，以及在吡啶、二烷基亚砜和二烷基甲酰胺中溶解度大的特点进行分离。

咔唑在皮肤上具有刺激作用，使皮肤对光敏感。某些咔唑的衍生物在动物试验中表明具有致癌作用。因此，在生产过程中需要注意通风和穿戴防护用具，以及按照化学品规定进行贮存和运输。

N-乙基咔唑是一种化合物，也被称为N-ethylcarbazole。它的别名包括9-乙基咔唑和9-ethylcarbazole。

N-乙基咔唑是无色片状晶体，具有沸点为190℃和熔点为67～68℃的特性。它可以溶解于热乙醇、乙醚、丙酮、氯苯和戊烷，但不溶于水。

N-乙基咔唑可以用作青光海昌蓝GC及永固RL等染料的中间体。它可以通过硫酸二乙酯法和氯乙烷法进行制取。

N-乙基咔唑对皮肤具有刺激作用，可能引起皮炎。在生产过程中需要注意通风和穿戴防护用具，以及按照有毒化学品规定进行贮存和运输。

背景[1-3] HS 578T人乳腺癌细胞源自乳房癌，它与正常成纤维细胞样细胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T细胞株最初是多角形的，但在传代过程中选择并克隆了星形的细胞形态。电镜下观察到酪蛋白颗粒聚集，桥粒，紧密连接，脂质体和光滑内质网小泡。与Hs 578Bst一样，未检测到雌激素受体和内生病毒。 HS 578T人乳腺癌细胞 培养步骤： 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 传代方法： 1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。 3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。 应用[4][5] 用于1，25二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株Hs578T的增殖抑制及凋亡诱导作用的研究 研究1,25二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]（VitD3）联合塞莱昔布（CELE）对乳腺癌细胞株Hs578T的增殖抑制及凋亡诱导作用。 方法：采用四唑氮蓝比色（MTT）法检测细胞增殖抑制,计算抑瘤率;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率;HE染色以及末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记（TUNEL）法观察VitD3联合CELE对肿瘤细胞凋亡的影响并计数凋亡细胞; 利用细胞免疫化学方法结合显微图像分析系统定量检测肿瘤细胞中:1)细胞增殖指标Ki-67的表达;2)凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的变化;3)与侵袭相关因子VEGF的表达;4)凋亡抑制基因survivin;4)观察细胞粘附分子COX2以及维生素D受体VDR的表达。 结果：10-7 mol/L VitD3联合5×10-5mol/L CELE、10-8 mol/L VitD3联合5×10-5mol/L CELE联合用药组作用于乳腺癌细胞株Hs578T后:1)通过MTT法测得72h对Hs578T细胞的抑瘤率分别为53.0%、48.0%;A值分别为0.517±0.045、0.572±0.022,能显著抑制Hs578T肿瘤细胞的生长,有统计学意义; 2) 流式细胞术显示72h后实验组细胞凋亡率显著高于对照组细胞凋亡率; 3) 细胞周期分析实验组可分别造成肿瘤细胞S期、G0/G1期阻滞; 4) 细胞免疫化学SP法显示实验组凋亡相关基因Bax增高,Bcl-2降低,与侵袭相关因子VEGF的表达下降以及VDR在肿瘤细胞核中的表达。 结论1)10-7 mol/L的VitD3联合5×10-5mol/L CELE与10-8 mol/L的VitD3联合5×10-5mol/L CELE用药在体外可以显著抑制乳腺癌细胞株Hs578T增殖,其机制可能为通过下调Ki-67的表达而抑制肿瘤细胞增殖活性; 2) 联合用药可改变肿瘤细胞周期时相分布,使肿瘤细胞阻滞于S期、G0/G1期; 3) 联合用药能诱导乳腺癌细胞株Hs578T调亡,其机制可能为通过抑制Bcl-2、促进Bax的表达,改善Bcl-2/Bax的平衡; 4)联合用药能抑制与侵袭相关因子VEGF的表达,提示联合用药具有抑制乳腺癌细胞株Hs578T侵袭的潜能。 参考文献 [1]Rho/ROCK pathway as a target of tumor therapy[J].R.Rattan,S.Giri,A.K.Singh,I.Singh.J.Neurosci.Res..2006(2) [2]Suppression of P-glycoprotein gene expression in Hs578T/Dox by the overexpression of caveolin-1[J].Hua Zhu,Chuanxi Cai,Jianwen Chen.FEBS Letters.2004(3) [3]Overexpression of caveolin-1 increases plasma membrane fluidity and reduces P-glycoprotein function in Hs578T/Dox[J].Chuanxi Cai,Hua Zhu,Jianwen Chen.Biochemical and Biophysical Research Communications.2004(3) [4]Depletion of membrane cholesterol causes ligand-independent activation of Fas and apoptosis[J].Robert Gniadecki.Biochemical and Biophysical Research Communications.2004(1) [5]汪勤.1，25二羟维生素D_3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株Hs578T的增殖抑制及凋亡诱导作用[D].安徽医科大学,2009.