地黄苦苷的制备方法是什么? 地黄苦苷是一种萜类化合物,来源于地黄植物的新鲜或干燥块根。地黄为多年生草本植物,最早记载于《神农本草经》,是中国著名的怀药之一。地黄苦苷是地黄中的主要化学成分,易溶于水,但热稳定性较差。为了提取地黄苦苷,可以使用水、乙醇、甲醇等极性大的溶剂。 制备方法 将干燥的地黄根切成小块并用95%乙醇进行提取。提取后的溶液经过浓缩减压处理,然后用水和甲醇依次洗脱。洗脱后得到水提取物和甲醇提取物。接下来,将甲醇提取物溶解在10%甲醇-水溶液中,然后通过柱层析分离得到五个级分。其中第三个级分即为地黄苦苷。 主要参考资料 [1]付国辉,杜鑫.地黄化学成分及药理作用研究进展[J].中国医药科学,2015,5(15):39-41. [2] Liu Y F , Liang D , Luo H , et al. Ionone glycosides from the roots of Rehmannia glutinosa[J]. Journal of Asian Natural Products Research, 2014, 16(1):9. 查看更多
什么是N,N-碳酰二咪唑? N,N-碳酰二咪唑是一种化学试剂,也被称为CDI或CO(Im)2。 它的化学式是C7H6N4O,分子量为162.15。 CDI在有机合成中被广泛应用,主要用作甲酰基转移试剂和羧酸的活化试剂。 与其他类似试剂相比,CDI具有更高的反应活性、更低的成本和更简单的后处理。 CDI可以与带有活性氢的羟基或氨基发生反应,生成碳酰衍生物或N-咪唑甲酰化合物。 它还可以与带有两个活性氢官能团的底物发生分子内碳酰化反应,生成环状产物。 CDI的制备方法简单,实验室可以按照标准的实验步骤以光气和咪唑为原料来制备。 然而,需要注意的是CDI对湿气非常敏感,建议在干燥阴凉处储存。 CDI在国内外化学试剂公司有销售,可以方便地购买到。 对于有机合成和多肽合成等领域的研究者来说,CDI是一种非常有价值的试剂。 参考文献: 1. Staab, H. A.; Wendel, K. Org. Synth., 1968, 48, 44. 2. Kishikawa, K.; Nakahara, S.; Nishikawa, Y.; Kohmoto, S.;Yamamoto, M. J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 2565. 3. Nyangulu, J. M.; Galka, M. M.; Jadhav, A.; Gai, Y.; Graham,C. M.; Nelson, K. M.; Cutler, A. J.; Taylor, D. C.; Banowetz,G. M.; Abrams, S. R. J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 1662. 4. White, J. D.; Hansen, J. D. J. Org. Chem., 2005, 70, 1963. 5. Davis, F. A.; Deng, J. Org. Lett., 2004, 6, 2789. 6. Grant, E. B.; Weiss, J. M.; Branum, S.; Hayden, S.; Johnson,S.; Guiadeen, D.; Murray, W. V.; Macielag, M. J. Tetrahedron Lett., 2005, 46, 2731. 7. Ella-Menye, J.-R.; Sharma, V.; Wang, G. J. Org. Chem., 2005,70, 463. 8. Dandapani, S.; Curran, D. P. J. Org. Chem., 2004, 69, 8751. 9. Iliev, B.; Linden, A.; Heimgartner, H. Helv. Chim. Acta, 2003,86, 3215. 10. Schlosser, K. M.; Krasutsky, A. P.; Hamilton, H. W.; Reed, J.E.; Sexton, K. Org. Lett., 2004, 6, 819. 11. Pedras, M. S. C.; Chumala, P. B.; Quail, J. W. Org. Lett.,2004, 6, 4615. 12. Vaidyanathan, R.; Kalthod, V. G.; Ngo, D. P.; Manley, J. M.;Lapekas, S. P. J. Org. Chem., 2004, 69, 2565. 查看更多
原位细胞凋亡试剂盒的原理和应用? 原位细胞凋亡试剂盒是一种用于检测细胞凋亡过程中细胞核DNA断裂情况的试剂盒。它利用生物素标记的dUTP在TdT酶的作用下连接到凋亡细胞中断裂的DNA末端,并与连接了辣根过氧化酶的链霉亲和素特异结合。在辣根过氧化酶底物DAB存在下,产生深棕色的颜色反应,可以准确地定位和计数凋亡细胞。正常或增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因此很少被染色。 原位细胞凋亡试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。 凋亡是许多正常生理过程所必需的,包括免疫系统的成熟和作用机制、组织器官和肢体的发生、神经系统的发生等。在许多病理条件下,凋亡机制的调节失衡起着重要作用,包括组织细胞的缺血、缺氧、出血、中风、心脏病、癌症、艾滋病、自身免疫缺损和中枢神经系统的退行性变等。细胞凋亡在癌基因研究中引起广泛关注,因为抗癌药物、放射和高热等可以启动细胞凋亡,并且肿瘤细胞具有启动凋亡的内在特性。 如何使用原位细胞凋亡试剂盒 1. 标记DNA链断端:使用TdT催化,以FITC标记的核苷酸进行非模板依赖的3-OH端DNA末端聚合反应。 2. 结合FITC:使用HRP或AP标记的羊抗FITC抗体(Fab段)与聚合到DNA末端的FITC结合。 3. 底物显色:使用酶的底物进行显色,常用的是HRP的DAB显色和AP的BCIP/NBT显色。 原位细胞凋亡试剂盒的应用 人植入前胚胎细胞超薄电镜切片的制作及应用TUNEL技术对该细胞凋亡的原位检测研究 该研究改进了人植入前胚胎细胞超薄切片的制备方法,观察了不同时期人早期胚胎细胞超微结构的变化。通过TUNEL技术对植入前胚胎细胞凋亡的原位检测,建立了一种检测人植入前胚胎凋亡征象的方法。 结果显示,在镜下可以观察到胚胎细胞的正常形态和凋亡的形态变化。采用TUNEL法加荧光共焦显微镜观察凋亡细胞的方法可以有效检测人植入前胚胎中的凋亡征象,其中细胞碎片的出现可能与凋亡有关。 参考文献 [1] Expression of Bcl-2 and Bax proteins in relation to quality of bovine oocytes and embryos produced in vitro. Ming Yuan Yang, Rajadurai Rajamahendran. Animal Reproduction Science. 2002(3) [2] Villous cytotrophoblast regulation of the syncytial apoptotic cascade in the human placenta. B. Huppertz, Hans-Georg Frank, John C.P. Kingdom, Frank Reister, Peter Kaufmann. Histochemistry and Cell Biology. 1998(5) [3] Morphological and biochemical characterization and analysis of apoptosis. R. Todd Allen, William J. Hunter, Devendra K. Agrawal. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 1997(4) [4] Antigen Retrieval Immunohistochemistry: Practice and Development. Shi, Cote, Young, Taylor. Journal of Histotechnology. 1997(2) [5] 王丹. 人植入前胚胎细胞超薄电镜切片的制作及应用TUNEL技术对该细胞凋亡的原位检测[D]. 华中科技大学, 2006. 查看更多