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盐酸苯海索是什么? 背景技术 盐酸苯海索(trihexyphenidyl hydrochloride)又名安坦,化学名为1-环己基-1-苯基-3-哌啶基-1-丙醇盐酸盐,为中枢抗胆碱药,可选择性阻断纹状体的胆碱能神经通路,利于恢复帕金森病患者脑内多巴胺和乙酰胆碱的平衡,改善患者症状。纯品为白色轻质结晶性粉末;无臭,味微苦,接触后有刺痛麻痹感。在甲醇、乙醇或三氯甲烷中溶解,在水中微溶。 盐酸苯海索目前通用的合成路径以苯乙酮为原料,与甲醛、盐酸哌啶在乙醇中进行曼尼希反应得到盐酸哌啶苯丙酮,再与氯代环已烷、镁屑进行格氏加成、水解反应而得到。其中盐酸哌啶苯丙酮的制备,工艺较为稳定、合理;合成盐酸苯海索关键是合成格氏试剂,格氏试剂是有机金属化合物中最重要的一类化合物,也是有机合成上非常重要的试剂之一。格氏试剂选用的溶剂主要有无水乙醚和无水四氢呋喃两种,乙醚做溶剂,虽然粗品收率高,晶型较好,但是其具有全身麻醉效果,长期吸入对人体有害,此外,其沸点较低,蒸气与空气可形成爆炸性混合物,遇明火、高热极易燃烧爆炸,不利于大规模的工业生产。 合成工艺 在装有搅拌、恒压滴液漏斗、回流冷疑管和温度计的四口瓶中,通入高纯氮气,先加入一定量的金属镁屑,用少量四氢呋喃润湿,再滴加少量引发剂/四氢呋喃溶液,待反应引发后缓慢滴加氯代环己烷/四氢呋喃溶液,滴毕,保温一定时间,降温加入中间体盐酸哌啶苯丙酮,加毕,升温至75℃保温5h,然后降温滴加盐酸调节至pH≤2,再升温至60~70℃保温1h,保温毕,降温、抽滤、洗涤干燥得盐酸苯海索粗品,计算摩尔收率。 参考文献 [1]朱占元,黄东. 盐酸苯海索的合成工艺改进[J]. 中国医药科学,2016,6(9):53-55. 查看更多
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藏红花醛的性状是什么? 藏红花醛,常温常压下为浅黄色油状液体,不溶于水但是可溶于常见的有机溶剂例如氯仿,乙酸乙酯等,对氧化剂较为敏感。藏红花醛是来源于藏红花的一种化学成分,具有木香和药香,常用于食品香料的制备,可用于调配老姆酒、无花果、茶叶以及木香香型、药草香型的食用香精。 图1 藏红花醛的性状图 藏红花醛的来源是什么? 藏红花醛主要来源于藏红花,是一种天然产物分子,藏红花在我国北京、上海、山东、浙江、四川、新疆等有少量试验性栽培,国外在西班牙、伊朗、意大利、德国、法国、希腊、奥地利、原苏联和日本等均有栽培。藏红花醛是挥发油的主要成分,是藏红花特有香气的来源,这种香气是藏红花干燥过程中从藏红花苦甙和HTCC中获得的。由于这种化合物不存在于新鲜的柱头,它在藏红花中的浓度强烈地取决于干燥和储存条件。藏红花柱头的干燥和储存过程中通过不同的降解途径产生的部分挥发油前体, 属于三甲基环已烯衍生物的苷类化合物, 主要有藏红花苦素等。藏红花苦素是藏红花中的主要苦味成分, 它在酸或碱性条件下或酶的作用下可转化为藏红花醛, 这也是不同品种中藏红花醛含量不同的原因。 藏红花醛有哪些药理作用? 藏红花醛在动物模型中是一种有效的抗惊厥药,被证明可作为GABAA受体的激动剂。藏红花醛具有高抗氧化和自由基清除活性,能够有效减少细胞内氧化应激和炎症反应,这有助于保护细胞免受氧化损伤和炎症引起的损害。藏红花醛对癌细胞具有细胞毒性,能够抑制癌细胞的生长和扩散。其抗癌机制之一涉及破坏细胞微管的正常组装动力学,阻断癌细胞的分裂和增殖。藏红花醛在动物身上和人类初步研究中也被证明具有抗抑郁特性。 如何使用藏红花醛? 藏红花醛在最终加香食品中的建议用量为5~10mg/kg。 参考文献 [1] Escribano J; Cancer Letters. 1996, 100: 23–30. 查看更多
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溴氰菊酯是什么? 溴氰菊酯(简写DM)是一种含有α-氰基的Ⅱ型拟除虫菊酯类农药。 用途 溴氰菊酯是目前人工合成药效最高的杀虫剂品种之一,是一种具有快速击倒能力的非内吸性杀虫剂,对螨蚧几乎无效。对鱼、蜜蜂有毒。溴氰菊酯在控制疟疾媒介(特别是冈比亚按蚊)中起着关键作用,并用于制造长效杀虫蚊帐,但现在抗药性是普遍非常突出的问题。 抗药性 国际杀虫剂抗性行动委员会 IRAC 3组;3A,拟除虫菊酯类 (Pyrethroids)。已报道溴氰菊酯对冈比亚按蚊、臭虫产生抗药性。 急性危害 溴氰菊酯是可燃的,在火焰中释放出刺激性或有毒烟雾(或气体)。其含有机溶剂的液体制剂可能易燃。如果制剂中含有易燃/易爆溶剂,有着火和爆炸的危险。 健康危害 溴氰菊酯会刺激眼睛、皮肤和呼吸道。 该物质可能对神经系统造成影响。影响可能推迟显现。皮肤接触可产生局部影响,包括如刺痛、瘙痒或灼伤的感觉。 毒性 急性毒性:大鼠经口半数致死量LD50 87~>5 000 mg/kg,这么宽的范围取决于研究的载体和条件。狗经口LD50 >300 mg/kg。大鼠和兔经皮LD50 >2 000 mg/kg。对兔眼睛有轻度刺激作用,对兔皮肤无刺激作用。大鼠吸入LC50(6 h) 0.6 mg/L (空气)。 慢性毒性:最大无作用剂量(NOEL),2年饲喂试验大鼠 1、小鼠 16、狗1 mg/(kg · d)。对大鼠、小鼠和狗无诱变性和致畸性。溴氰菊酯对人具有神经毒性,能够通过皮肤进入血液及母乳。它是一种过敏原,会导致某些人产生哮喘。查看更多
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苯乙酮的合成方法是什么? 苯乙酮(Acetophenone)俗称安眠酮,又称为乙酰苯,是一种最简单的芳香酮,具有类似山楂香气的特殊气味。主要用途有:1)做溶剂,具有沸点高、稳定、气味愉快等特点,溶解能力十分强,与环己酮相似;2)作香料,是山楂、含羞草和紫丁香等香精的调和原料,并广泛用于皂用香精和烟草香精中;3)用于合成苯乙醇酸、α—苯基吲哚和异丁苯丙酸等,也用作塑料的增塑剂;4)可用于医药,有催眠性。本文将介绍它的一种合成方法. 苯乙酮的合成方法主要有乙苯氧化法、苯与乙酐酰化法、苯与乙酰氯化法等几种,工业上通常采用较多的为乙苯空气氧化法制备苯乙酮。苯乙酮现有生产技术采用间歇操作方式,设备效率低,传热传质效果差,溶剂对环境的污染大,副产物多。现以乙苯和双氧水为原料,醋酸钴为催化剂,在具有优异传质与传热性能的微通道反应器中连续氧化反应合成苯乙酮,考察了乙苯与催化剂的摩尔比、停留时间、反应温度等对反应的影响,优化了氧化反应工艺条件,获得了良好的反应效果。该方法实际应用中可以实现连续化生产. 1)苯与乙酰氯发生傅克反应的方程式如下: 主反应 副反应 2)乙苯催化氧化制备苯乙酮的反应方程式如下所示: 查看更多
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腺苷-5'-二磷酸二钠盐有哪些化学性质? 简介 腺苷-5'-二磷酸二钠盐,又称为Adenosine-5'-diphosphate disodium salt,是一种在生物化学领域有着多个别名的化合物。它以白色粉末的形式存在,具有良好的水溶性和易潮解的特性,需要储存在-20℃的低温条件下以保持稳定性。 腺苷-5'-二磷酸二钠盐的性状 化学性质 腺苷-5'-二磷酸二钠盐的化学性质主要体现在其分子结构和溶解性上。它包含腺苷、磷酸基团和两个钠离子,易溶于水,具有一定的旋光性,这些性质决定了其在生物化学领域的广泛应用。 用途 腺苷-5'-二磷酸二钠盐作为ATP的前体物质,在ATP合成酶的作用下可以转化为ATP,参与生物体内的能量储存和核酸代谢过程。除此之外,它还通过与ADP受体的相互作用来影响血小板的活化,调节凝血过程的平衡。 参考文献 [1] Al C E .Adenosine 5'-Triphosphate Disodium Salt[J].[2024-07-28]. [2]刘秀杰,王松青.腺苷-5'-二磷酸二钠盐类衍生物及其应用.2007[2024-07-28]. [3]佚名.腺苷-5'-二磷酸二钠盐[J].[2024-07-28]. 查看更多
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4-Boc-哌嗪-2-羧酸是什么? 4-Boc-哌嗪-2-羧酸,是一种常见的有机合成中间体,在药物化学和化学合成领域有着广泛的应用。其独特的结构赋予了它多种潜在的生物活性,使其成为药物分子设计的重要砌块。 简介: 4-Boc-哌嗪-2-羧酸, 英文名称: N-4-Boc-2-Piperazinecarboxylic Acid,CAS:128019-59-0, 分子式: C10H18N2O4 ,密度: 1.22g/cm3 沸点:364.4 ℃ at 760 mmHg,熔点:231-239 ℃。化合物 4-Boc-哌嗪-2-羧酸 是哌嗪的衍生物,具有叔丁氧羰基保护基。该官能团通常用于有机合成中以保护胺,特别是在肽合成中。叔丁氧羰基 ( Boc) 基团以其在酸性条件下的稳定性而闻名,在弱酸性条件下可以去除而不会影响其他敏感官能团。 分子结构分析 4-Boc-哌嗪-2-羧酸 的主要结构特点包括: ( 1)一个包含两个氮原子的六元哌嗪环,这两个氮原子通过碳链相连。 ( 2)一个羧酸基团(COOH)连接于哌嗪环的第二个碳原子上。 ( 3)一个Boc基团(C(CH3)3OCO-)附着于哌嗪环的第四个氮原子上,用于保护胺官能团。 4-Boc-哌嗪-2-羧酸的应用研究 ( 1)肽合成 在多官能团化分子的化学中,当必须在化合物的一部分中进行反应而不受分子其余部分的干扰时,官能团的保护可能是必不可少的。开发简单且环保的官能团保护和去保护方法仍然是多官能团分子合成化学的重要工具。叔丁氧羰基( Boc)胺的保护是有机合成中广泛使用的反应,因为它在大多数碱性条件和亲核试剂下对催化氢解具有惰性,对水解具有抵抗力。 4-Boc-哌嗪-2-羧酸作为合成哌嗪-2-羧酸衍生物的有效中间体,可以在酸性或酶促条件下选择性去除Boc基团,从而暴露游离胺官能团,以便进行进一步的官能团引入和修饰。 ( 2)在药物化学中的潜在应用 哌嗪是一种含六元氮杂环化合物,对药物的合理设计具有重要意义。这种部分可以在大量具有各种治疗用途的知名药物中找到,例如抗精神病药、抗组胺药、抗心绞痛药、抗抑郁药、抗癌药、抗病毒药、心脏保护剂、抗炎药和显像剂。 哌嗪环结构广泛存在于各种药物分子中,具有重要的生物活性。 4-Boc-哌嗪-2-羧酸作为合成哌嗪类化合物的重要前体,为药物研发提供了丰富的可能性。通过对Boc基团的选择性脱除和后续修饰,可以获得结构多样的哌嗪衍生物,为新药研发提供宝贵的候选化合物。 ( 3)不对称化合物的合成 Wanlong Jiang等人的研究表明,4-Boc-哌嗪-2-羧酸在不对称合成中也发挥了重要作用。通过引入Boc基团,可以有效控制反应的选择性,得到高对映选择性的产物。此外,Boc基团的正交脱保护策略为复杂分子的合成提供了便利。 研究报道了 2-[4-(叔丁氧羰基)哌嗪基]亚苄基-叔丁烷亚磺酰胺与不同的有机金属试剂进行亲核1,2-加成,得到高度非对映异构体富集的加合物。所得α-支链N-Boc-2-哌嗪基苄基叔丁烷亚磺酰胺的X射线晶体学证实了不同的机制,具体取决于所使用的有机金属试剂。研究了N-Boc和叔丁烷亚磺酰胺的差异脱保护。为了避免在酸性脱保护步骤中形成副产物,N-叔丁烷亚磺酰胺基团被转化为相应的N-叔丁烷磺酰胺(Bus),从而实现清洁的正交脱保护。 参考: [1]Rathi A K, Syed R, Shin H S, et al. Piperazine derivatives for therapeutic use: a patent review (2010-present)[J]. Expert opinion on therapeutic patents, 2016, 26(7): 777-797. [2]Cheraiet Z, Ouarna S, Hessainia S, et al. N-tert‐Butoxycarbonylation of Structurally Diverse Amines and Sulfamides under Water‐Mediated Catalyst‐Free Conditions[J]. International Scholarly Research Notices, 2012, 2012(1): 404235. [3]Jiang W, Chen, Marinkovic D, et al. Practical asymmetric synthesis of α-branched 2-piperazinylbenzylamines by 1, 2-additions of organometallic reagents to N-tert-butanesulfinyl imines[J]. The Journal of Organic Chemistry, 2005, 70(22): 8924-8931. [4]https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/N-4-Boc-2-piperazinecarboxylic acid 查看更多
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什么是β-半乳糖苷酶? 摘要: β-半乳糖苷酶是一种具有特定催化功能的酶,其在生物学和生物化学领域中具有重要的作用。β-半乳糖苷酶能够催化β-半乳糖苷键的水解反应,将底物分子中的β-半乳糖苷键切断成半乳糖和另一部分。这一酶的特异性识别和催化活性使其在生物体内的代谢过程和工业生产中发挥着重要作用。本文将探讨β-半乳糖苷酶功能及其在不同领域中的应用,希望通过深入了解这一酶的特性,能够更好地认识和利用β-半乳糖苷酶。 1. 什么是β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶(β-galactosidase EC.3.2.1.23),全称为 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,可通过切割乳糖中由 β-1-4-糖苷键连接的 D-半乳糖残基,使乳糖降解成为可被机体吸收的 β-半乳糖和葡萄糖。β-半乳糖苷酶来源丰富,广泛存在于哺乳动物、植物和微生物中。在幼年哺乳动物的皮肤、特别是小肠等器官组织中存在丰富的 β-半乳糖苷酶,而成年个体的消化道内 β-半乳糖苷酶含量较低,无法很好地分解和利用乳糖;虽然很多食物、植物中均发现了 β-半乳糖苷酶,如番茄、水稻、拟南芥、苹果和咖啡豆[等,然而植物来源的 β-半乳糖苷酶在组织中含量并不高,因此提取得率较低;微生物中 β-半乳糖苷酶资源很丰富,大肠杆菌、酵母菌、霉菌等细菌、真菌均能产 β-半乳糖苷酶。β-半乳糖苷酶的结构如下图: 2. 了解 β-半乳糖苷酶的作用 β-半乳糖苷酶除了能够催化β-半乳糖苷化合物中的β-半乳糖苷键发生水解,还具有转半乳糖基的作用。早期的研究表明,β-半乳糖苷酶上的活性位点有两个功能团:Cys的巯基和His的咪唑基,它们对β-半乳糖苷酶水解乳糖起重要作用。据推测,硫基可作为广义酸使半乳糖苷的氧原子质子化,而咪唑基可作为亲核试剂进攻半乳糖分子第1个碳原子上的亲核中心,形成1个含碳氢键的共价中间物。在被切割下咪唑基之后,巯基阴离子从水分子中抽取1个质子,从而形成-OH进攻C。有研究认为乳糖酶的催化机制与溶菌酶类似。当半乳糖苷的受体是水时,发生的是水解;当受体是另外的糖或醇时,则发生转半乳糖苷作用;如受体是乳糖,则可以生成三糖的低聚半乳糖。 3. α-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷酶有什么区别? α-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷酶都属于半乳糖苷酶家族。虽然它们有一些相似之处,但它们在结构、功能和应用程序方面也有关键的区别。 3.1 结构和功能的主要区别 键断裂:主要区别在于它们断裂的键类型。α-半乳糖苷酶可裂解 α-半乳糖苷键,其中半乳糖单元通过 α 糖苷键与另一个分子连接。另一方面,β-半乳糖苷酶可裂解β-半乳糖苷键,其中键合为β。 活性位点:键切割的差异是由于它们的活性位点结构的变化,即底物与酶结合的区域。负责催化的氨基酸残基在两种酶之间略有不同,使它们能够识别和破坏特定的键。 3.2 底物特异性和催化活性 (1)α -半乳糖苷酶 该酶具有更广泛的底物特异性。它可以分解复杂的分子,如糖蛋白、鞘脂糖和某些含有α-半乳糖苷键的低聚糖(复合糖)。底物的例子包括棉子糖(一种在豆类中发现的糖)和半乳甘露聚糖(植物细胞壁的成分)。 (2)β-半乳糖苷酶 这种酶更具有特异性。它的主要功能是将牛奶中的乳糖水解成两种单糖成分:葡萄糖和半乳糖。然而,一些β-半乳糖苷酶也可以分解其他β-半乳糖苷。 3.3 在各行业的应用和用途 (1)α-半乳糖苷酶 药物:用于法布里病的酶替代疗法,这是一种由α-半乳糖苷酶缺乏引起的遗传性疾病。 食品工业:添加到一些防气产品中,帮助分解导致腹胀和胀气的复合糖。 农业:可用于修饰植物细胞壁,以提高消化率或生产生物燃料。 (2)β-半乳糖苷酶 食品工业:用于乳制品,如无乳糖牛奶和酸奶,为乳糖不耐症患者分解乳糖。 生物技术:是分子生物学研究中广泛使用的工具,特别是用于研究细菌基因表达的lac操纵子系统。 纺织工业:用于洗涤牛仔布,通过分解靛蓝染料达到石洗效果。 4. 衰老 β-半乳糖苷酶染色 衰老相关 β-半乳糖苷酶 (SA-β-gal) 染色是一种用于识别衰老细胞的技术。衰老细胞是已停止分裂但仍具有代谢活性的细胞。它们被认为在衰老和与年龄相关的疾病中发挥着作用。 SA-β-gal 是一种通常在较宽的 pH 值范围内具有活性的酶。当受到潜在致癌应激的挑战时,正常细胞可能会永久失去增殖能力,这一过程称为细胞衰老。在pH 6.0下可检测到衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-betagal)活性,可以鉴定培养物和哺乳动物组织中的衰老细胞。 SA-β-gal 染色过程包括固定细胞,将细胞与仅在 pH 6.0 下被 SA-β-gal 裂解的底物一起孵育,然后观察裂解的底物。SA-β-gal 染色呈阳性的细胞被认为是衰老的。 SA-β-gal 染色是一种相对简单且廉价的技术,可用于识别多种组织中的衰老细胞。然而,值得注意的是,SA-β-gal 染色并不是衰老的完美标志。一些衰老细胞可能不具有增加的 SA-β-gal 活性,而一些非衰老细胞可能具有增加的 SA-β-gal 活性。 尽管有这些限制,SA-β-gal 染色仍然是研究衰老的一个有价值的工具。它已被用于识别多种组织中的衰老细胞,包括皮肤、肝脏和肌肉。SA-β-gal 染色也已用于研究衰老在衰老和年龄相关疾病中的作用。它通过使用人工底物X-gal对细胞进行组织化学染色来检测。SA-β-gal 生物标志物的存在与 DNA 合成无关,通常可区分衰老细胞和静止细胞。检测 SA-β-gal 的方法是一种方便的、基于单细胞的测定方法,即使在异质细胞群和衰老组织中也可以识别衰老细胞,例如老年人的皮肤活检。由于易于检测,SA-β-gal是目前广泛使用的衰老生物标志物。 5. β-半乳糖苷酶的缺点是什么? (1)检测方法 一些测量β -半乳糖苷酶活性的方法,如使用ONPG作为底物的方法,可能不适用于所有类型的细菌。 (2)报告基因应用 当β-半乳糖苷酶作为报告基因使用时,一些检测可能耗时或需要大量处理,使其不太适合高通量应用。 (3)稳定性 β-半乳糖苷酶虽然已经实现商品化,但是其应用仍受到热稳定及产物抑制等问题的限制。因此, 开发不同来源、具有特殊催化功能的β-半乳糖苷酶一直是工业化生产的一项需求。 6. β-半乳糖苷酶的应用 (1)乳糖的消化 在小肠中,β-半乳糖苷酶帮助消化食物中的乳糖。乳糖本身不能被直接吸收到血液中。β-半乳糖苷酶将其分解成半乳糖和葡萄糖,然后被血液吸收并用作能量。 (2)乳糖不耐症 乳糖不耐症患者缺乏足够量的β -半乳糖苷酶。这可能导致消化问题,如腹胀、胀气和食用牛奶或其他乳制品后腹泻。 (3)细胞功能 β-半乳糖苷酶还参与多种细胞功能,包括细菌细胞壁的合成和动物鞘糖脂(一种脂肪分子)的分解。 (4)基因工程 目前,β-半乳糖苷酶基因被广泛地应用于包括作为报告基因、构建载体、转基因研究和基因治疗等多个分子生物学研究领域。具体介绍如下: 在载体构建中的应用。β-半乳糖苷酶可催化X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)水解,产物呈蓝色,易于检测和观察,基于这一特点,β-半乳糖苷酶基因常作为载体组分,广泛地应用于各类研究中。现在分子生物学研究使用的许多克隆载体一般都具有一段大肠杆菌β-半乳糖苷酶的启动子及其α肽链的DNA序列,可通过蓝白选择方便地筛选出阳性重组载体。 作为报告基因的应用。β-半乳糖苷酶基因是动物和微生物基因工程中最常用、最成熟的一种报告基因。报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表型应易于检测且易于与内源性背景蛋白相区别,利用其表达产物来标定目的基因的表达调控。β-半乳糖苷酶基因作为报告基因的应用主要有以下几个方面:(1)用于研究启动子的效能和启动子不同位点突变对表达效能的影响;(2)用于研究表达系统中增强序列等调控序列的功能;(3)用来衡量载体的表达特性和外源物质对表达调控的影响;(4)以融合基因的形式用于研究外源基因的表达及其规律。 7. 优化 β-半乳糖苷酶测定 β-半乳糖苷酶的检测在生物医学方面的研究逐渐成为热点,尤其是内源性β-半乳糖苷酶的检测、识别和近红外荧光成像检测等方面的研究,为疾病的诊断和治疗提供有力依据。所以探索与开发新型的能够实时检测体内碱性磷酸酶的材料尤为重要。目前,检测β-半乳糖苷酶的手段主要有单光发射计算机断层扫描(SPECT)、正电子发射断层扫描(PET)、比色法、化学发光、荧光探针、生物发光等。 近年来,荧光探针技术因其高度敏感性、快速分析能力、非破坏性质以及在活细胞中提供靶向信息等优势,已在分子检测、肿瘤诊断、生物活体成像等领域广泛应用。由于β-半乳糖苷酶具有酶的专一性特征,能够特异性识别β-半乳糖苷键,因此,近年来科学界对于开发用于检测β-半乳糖苷酶的荧光探针的研究越发受到重视。 2019年,Kong等人基于ICT-FRET协同机制的原理设计开发了荧光探针CG用于检测体内的β-半乳糖苷酶活性,该探针具有快速反应(<20 s),以及对β-半乳糖苷酶有极低检测限(0.081 U/mL)的特点,以及动力学参数表明探针CG对β-半乳糖苷酶显示出高亲和力和高催化效率。CG具有优异的水溶性,因此拥有良好的生物相容性,可以实现活细胞中β-Gal的可视化。 2019年,Li课题组通过重整GFP(绿色荧光蛋白)设计生色团系统构建具有刚性氧桥的双光子荧光平台构象,设计开发了用于检测β-Gal的双光子荧光探针G-GAL,G-GAL探针改变了传统荧光探针具有的易于光漂白性的缺陷,具有快速响应,荧光增强和出色的特异性、可以更长的时间的观察和更大的组织穿透深度的特点。实现了对组织中的β-Gal含量的检测。 2019年,Shi等人设计开发了比率式近红外(NIR)荧光探针用于精确定量跟踪体内内源性β-Gal。该探针改善了OFF-ON型检测模式导致的很难在肿瘤中精确获得β-Gal表达的缺陷,具有高量子产率、在生理条件下优异的光稳定性和化学性质的特性。 8. 结论 综上所述,β-半乳糖苷酶作为一种具有特定催化功能的重要酶类,在生物学、生物化学和食品领域中扮演着关键的角色。其特异性识别和催化活性为研究人员和工程师提供了丰富的应用可能性,有助于开发新型药物、生物传感器和生物催化剂等。通过深入了解β-半乳糖苷酶的性质和功能,我们可以更好地利用这一酶类,促进科学研究和工业生产的发展。希望本文能够为读者提供对β-半乳糖苷酶的全面了解,并激发更多关于这一酶类的研究和应用。 参考: [1]李敏艳,闫新豪. β-半乳糖苷酶荧光探针的研究进展 [J]. 化学与生物工程, 2023, 40 (04): 1-6. [2]董艺凝,陈海琴,张灏,等. β-半乳糖苷酶的研究现状与进展 [J]. 食品与生物技术学报, 2018, 37 (04): 337-343. [3]张莉,李庆章,田雷. β-半乳糖苷酶研究进展 [J]. 东北农业大学学报, 2009, 40 (07): 128-131. DOI:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2009.07.027. [4]李云亮,谢鹏飞,刘晓霜,等. β-半乳糖苷酶的来源、改造、异源表达及其在食品中的应用[J]. 食品工业科技,2023,44(23):387-393. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2023030097. [5]https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17634571/ [6]https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20010931/ 查看更多
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5-甲氧基吲哚-2-羧酸的应用有哪些? 5-甲氧基吲哚-2-羧酸是一种重要的化合物,本文将探讨5-甲氧基吲哚-2-羧酸在其相关领域的具体应用。 简述: 5-甲氧基吲哚-2-羧酸 ,英文名称: 5-methoxy-2,3-dihydro-1H-indole-2-carboxylic acid,CAS:791736-08-8,分子式:C10H11NO3,密度:1.2722,折射率1.5310。 应用: 1. 对脑组织进行预处理 用5-甲氧基吲哚-2-羧酸(5-methoxyindole-2-carboxylic acid,MICA)对脑组织进行预处理, 可以抑郁缺血性中风损伤。二氢硫辛酰胺脱氢酶 (dihydrolipoamide dehydrogenase,DLDH)是能量代谢重要调节酶。MICA可以对DLDH进行可逆抑制, 通过对大鼠进行 4周的MICA饲喂发现,MICA保护大脑抵御缺血性中风损伤。MICA处理过的大鼠, 脑梗塞体积要明显小于对照组。 MICA组中,DLDH酶活性比对照组要低,DLDH酶活降低可能与DLDH蛋白质硫化有关。另外, 通过核因子相关因子 2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)信号途径,complex I表达上调,细胞死亡过程减慢, 线粒体 ATP生成量增加。 2. 合成抗缺血性脑卒中神经保护剂 中风是全球第二大致死原因,是残疾的主要原因。中国每年有 250万新增中风病例,其中160万人死于缺血性中风。中风幸存者中,3/4的病人具有身体疾病,2/3的患者有认知障碍,导致患者的生活质量明显下降,给病人家庭和社会带来沉重的经济负担。 陈俐颐等人 选择 5-甲氧基吲哚-2-羧酸 为先导化合物,拟针对吲哚环的 2-位取代侧链和5-位取代基进行结构修饰与改造,探索研究具有抗氧化活性的新型脑缺血治疗药物, 合成了 28个目标化合物。 5-甲氧基吲哚-2-羧酸主要涉及对取代苯腙丙酮酸甲酯的合成。合成通法为 :将对甲氧基苯肼盐酸盐 (0.87 g,5 mmol)或对氯苯肼盐酸盐(0.90 g,5 mmol)加入甲醇(35 mL)中,加热至45 ℃搅拌溶解,加入醋酸钠(0.82 g,10 mmol)。 搅拌5-10分钟后,缓慢滴加丙酮酸甲酯(0.51 g,5 mmol),反应20分钟,TCL监测。反应结束,冷却抽滤,滤液减压浓缩得橙黄色固体0.75 g (R=-OCH3)或0.85 g (R=-Cl),收率为68%(R=-OCH3)或77%(R=-Cl)。所得粗品无需纯化直接用于下一步反应。 参考文献: [1]陈俐颐. 新型抗缺血性脑卒中神经保护剂的设计、合成及生物活性研究[D]. 东南大学, 2021. DOI:10.27014/d.cnki.gdnau.2021.000746. [2]马维兴,雷质文, 唐静等 . 葡萄糖诱导的线粒体蛋白氧化应激及调控机制概述 [J]. 食品安全质量检测学报, 2020, 11 (03): 715-720. DOI:10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2020.03.010. 查看更多
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如何合成1-乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖? 合成 1 -乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖是一项关键的化学合成过程,对于生物医药领域具有重要意义。 背景:阿兹夫定 ( azvudine) 作为我国首个自主研发的小分子新冠肺炎治疗药物,化学名称为 1-( 4- 叠氮 -2- 脱氧 -2- 氟 -β-D- 呋喃核糖基 ) 胞嘧啶,靶向抑制逆转录酶,在临床试验中,不良反应少、安全性好。 1-乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖是合成阿兹夫定的关键中间体。因此,探索一种能快速、高收率、高纯度的合成 1 -乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖至关重要。 已报道的合成 1 -乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖的方法较少,李俊等人采用腺苷为起始原料,通过苯甲酰化反应和酰化反应两步合成了目标产物,其中酰化反应采用对甲苯磺酸为催化剂,目标产物收率不高。 合成优化: 在反应瓶中先加入 D -核糖、甲醇和酸性催化剂进行酯化反应得到浓缩物 1 ;随后在另一个反应瓶中加入浓缩物 1 ,溶剂、缚酸剂和催化剂,于 10 ~ 15℃ 滴加苯甲酰氯进行苯甲酰化反应后浓缩得到浓缩物 2 ;将浓缩物 2 加入反应瓶中,加入冰醋酸,控制瓶内温度 5 ~ 10℃ 滴加醋酸酐进行酰化反应,原料反应完全后滴加水,滴加过程控制内温 10 ~ 15 度,过滤,滤饼用水洗至母液 pH = 6 ,再用溶剂漂洗产品,得到中间体 1 -乙酰氧基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖。具体实施为: 步骤 S1 :在反应瓶中加入 D -核糖 (150g) 、甲醇 (1200g) 和硫酸 9.8g ,室温保温反应 10 小时。反应完毕加入碳酸钾调节体系 pH = 7 ,浓缩甲醇后得浓缩物 157.4g ,不需纯化继续投入下一步反应。 步骤 S2 :反应瓶中依次加入步骤 S1 浓缩物 157.4g 、乙酸乙酯 1574g 、碳酸钠 371g 、 DMAP 24.4g ,于 10 ~ 15℃ 滴加苯甲酰氯 492g ,滴毕保温反 12 小时。反应完毕加入水,萃取分层,水相用乙酸乙酯反萃一次。合并有机相,分别用 20 %碳酸钠水溶液 (300g) 、水 (300g) 洗涤,有机相浓缩至干得浓缩物 434.5g ,不需要纯化即可投入下一步反应。 步骤 S3 :将步骤 S2 浓缩物 434.5g 加入反应瓶,加入冰醋酸 3476g ,控制瓶内温度 5 ~ 10℃ 滴加醋酸酐 153g ,滴毕保温反应 5 小时,监控至原料反应完全后滴加水 750g ,滴加过程控制内温 10 ~ 15 度,继续搅拌半小时至析料完全。过滤,滤饼用水洗至母液 pH = 6 ;再用甲醇 300g 漂洗产品,无需进一步精制。目标产物重量为 432.2g ,为白色固体粉末。纯度 99.5 %,收率 85.7 %。 采用上述制备方法,产品收率高,纯度好,操作过程简单,设备、原料造价低,生产周期短,产能大,适宜工业化生产,能更好的满足阿兹夫定中间体产能的需求。 参考文献: [1]刘秀珍 , 刘建军 , 方兴等 . 阿兹夫定片治疗新型冠状病毒肺炎引起药物性肝损伤真实世界研究 [J/OL]. 中国医院药学杂志 ,1-9[2024-01-05]http://kns.cnki.net/kcms/detail/42.1204.R.20231215.1603.002.html. [2]河南省三生药业有限公司 . 阿兹夫定关键中间体 1- 乙酰氧基 -2,3,5- 三苯甲酰氧基 -1-beta-D- 呋喃核糖制备方法 :CN202310044492.3[P]. 2023-05-23. 查看更多
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如何合成2-氨基-3-溴-6-甲基吡啶? 2-氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶是一种重要的有机化工中间体,其合成方法备受关注。本文将介绍 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶的合成方法,,以供相关研究人员参考。 背景: 2- 氨基吡啶,又称 α- 氨基吡啶或 2- 吡啶胺,是从石油英中析出者为无色叶片状或大颗粒结晶,味苦,有氨气味,有麻醉性,是抗组胺的原料及合成 2- 吡啶酮及磺胺吡啶的原料,用于染料中间体,化学试剂,以及鉴定锑、铋、金。 2-氨基 -6- 甲基吡啶是一种重要的中间体,是 2- 氨基吡啶经甲基化后的产物,其在众多领域上具有重要作用。 2-氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶是一种有机化合物,分子式为 C6H7BrN2 ,是一种重要的液晶材料中间体。然而,现有的合成方法存在溴素使用量过高的问题,导致后处理和使用过程中环境污染严重,同时产品的产率也很低,这使得工业生产 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶的工艺成本高、造成环境污染。 合成: ( 1 )将 2- 氨基 -6- 甲基吡啶加入到溶剂中,在硫酸存在的条件下,加入双氧水,搅拌均匀后,加入溴素,搅拌反应,得到中间体 2- 氨基 -3,5- 二溴 -6- 甲基吡啶; ( 2 )将 2- 氨基 -3,5- 二溴 -6- 甲基吡啶加入到溶剂中,搅拌,加入锂化试剂,反应后得到 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶。 其中步骤( 1 )中的溶剂为甲苯或四氢呋喃,双氧水的浓度为 20wt% ~ 35wt% , 2- 氨基 -6- 甲基吡啶与溴素的摩尔比为 1:1 ;步骤( 2 )中的溶剂为无水四氢呋喃,锂化试剂为丁基锂、乙基锂、苯基锂、甲基锂中的一种, 2- 氨基 -3,5- 二溴 -6- 甲基吡啶与锂化试剂的摩尔比为 1 : 1 ~ 1 : 1.5 ,反应时间为 1 ~ 5h ,反应温度为 -70 ~ 0℃ 。具体操作如下: ( 1 )将 10.81g ( 0.1mol ) 2- 氨基 -6- 甲基吡啶加入到 200ml 四氢呋喃中,加入 2g 硫酸搅拌,加入 100ml 浓度为 20wt% 的双氧水,搅拌均匀后,加入 15.98g ( 0.1mol )溴素,在 50℃ 下搅拌反应 8h ,得到中间体 2- 氨基 -3,5- 二溴 -6- 甲基吡啶; ( 2 )将 2- 氨基 -3,5- 二溴 -6- 甲基吡啶加入到 200ml 无水四氢呋喃中,搅拌均匀后,降温到 -70℃ ,加入 3.3g ( 0.15mol )甲基锂,反应 5h 后得到 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶。两步反应的总收率为 68.9% 。 该制备工艺通过两步反应制备 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶,制备方法简单。其中,加入双氧水可以将溴素的利用率从 50% 提高至接近 100% ,大幅度降低了溴素的使用量,同时提高了产品的收率,减少了三废产出,对环境友好,也节约了成本。 参考文献: [1]毛顺艺 , 高婷 , 骆荣双 , 等 . 8- 溴 -6- 甲基 -2-(1- 吡咯烷基羰基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶的合成及晶体结构 [J]. 广州化学 ,2021,46(3):47-53. DOI:10.16560/j.cnki.gzhx.20210305. [2]黄林峰 , 梁妍 , 钟山裕 , 等 . filgotinib 合成工艺的改进 [J]. 中国新药杂志 ,2020,29(19):2239-2243. DOI:10.3969/j.issn.1003-3734.2020.19.013. [3]南京博源医药科技有限公司 . 一种 2- 氨基 -3- 溴 -6- 甲基吡啶的制备工艺 :CN201910516021.1[P]. 2019-08-16. 查看更多
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2-三氟甲基丙烯酸的应用有哪些? 2-三氟甲基丙烯酸作为一种重要的化合物,在多个领域都有着广泛的应用。本文将探讨 2- 三氟甲基丙烯酸的具体应用旨在为相关研究人员提供参考依据。 背景:α - 三氟甲基丙烯酸又名 2- 三氟甲基丙烯酸外观为白色或粉红色结晶, 2- 三氟甲基丙烯酸的分子中不仅含有三氟甲基,且含有不饱和键,因此难以制备。 2- 三氟甲基丙烯酸作为一种重要的含氟有机中间体,是合成含氟农药、含氟医药和含氟树脂等多种化工产品的原料,在医学、农业和材料科学等诸多领域均有广泛应用。 应用: 1. 合成 2- 三氟甲基丙酸 在水存在下, 2- 三氟甲基丙烯酸用锌粉还原,再经盐酸水解可得到 2- 三氟甲基丙酸。 2. 合成光学活性的氨基酸 2-三氟甲基丙烯酸与苄醇经酯化反应生成 2- 三氟甲基丙烯酸苄酯,与硝基甲烷,在水中再用脂肪酶水解,最后在 Pd/C 下进行氢化反应,可得到具有毒害神经的杀虫剂。 3. 合成抗高血压的 ( 药物 ) 中间体 α- 氯 -α- 三氟甲基 -β- 苄基丙酸 苯胺盐酸盐经重氮反应,再在催化剂氯化铜、溶剂丙酮下,与 2- 三氟甲基丙烯酸反应,可得到 α- 氯 -α- 三氟甲基 -β- 苄基丙酸。 4. 合成有机硅酯 2-三氟甲基丙烯酸有机硅酯是制备具有高氧渗透性接触透镜的中间体,是在催化剂三氟甲磺酸存在下, 2- 三氟甲基丙烯与三甲基硅甲醇酯化而成。 5. 合成 2- 羟甲基 -3,3,3- 三氟丙酸 2-羟甲基 -3,3,3- 三氟丙酸是合成抗肿瘤的 ( 药 )5- 三氟甲基二氢尿嘧啶的中间体。由 2- 三氟甲基丙烯酸与硫酸和水反应而成。 6. 合成含氟α ,β- 不饱和酸酯 由 2- 三氟甲基丙烯酸出发可合成 α,β- 不饱和酸酯 a 和 b 。 7. 合成抗肿瘤药物 5- 三氟甲基二氢尿嘧啶 2-三氟甲基丙烯酸在醋酸酐存在下与尿素反应可制备抗肿瘤药物 5- 三氟甲基二氢尿嘧啶。 8. 合成降血压药含氟含硫脯氨酸 2-三氟甲基丙烯酸与巯基乙酸加成,再与脯氨酸三甲酯缩合,再脱保护基可得降血压药含氟含硫脯氨酸。 9. 2-三氟甲基丙烯酸可与三氟乙醇、苯酚、三氟丁醇等反应制备不饱和含氟酯,用作聚合单体。 参考文献: [1]赵娟 ; 万洪 ; 冯晓军 ; 徐洪涛 ; 吕剑 . 卤素 - 镁交换法合成 2- 三氟甲基丙烯酸 [J]. 合成化学 , 2014, 22 (06): 820-823. DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.2014.06.028 [2]万洪 ; 谷玉杰 ; 刘波 ; 吕剑 . 2- 三氟甲基丙烯酸的研究进展 [J]. 化工新型材料 , 2010, 38 (09): 61-64. [3]徐卫国 ; 徐宇威 ; 陈先进 . α- 三氟甲基丙烯酸的制备与应用 [J]. 浙江化工 , 2005, (05): 32-33. 查看更多
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2-甲氧基-4-硝基苯甲醛的化学性质及应用? 2-甲氧基-4-硝基苯甲醛是一种常温常压下为白色至黄色固体粉末的苯甲醛类衍生物,微溶于水。受硝基的强吸电子性质影响,苯环上的醛基单元具有极高的亲电性,易与胺类化合物发生缩合反应。该物质常用作有机合成中间体,可用于5-芳基唑类化合物的制备。 化学性质 2-甲氧基-4-硝基苯甲醛的化学反应活性主要集中于其苯环上的醛基单元,可在硼氢化钠的还原作用下转变为相应的苄醇衍生物,而对位的硝基单元不受影响。此外,有相关文献报道,该物质结构中的苯环上的甲氧基基团可以在三溴化硼的作用下发生脱甲基反应得到相应的苯酚衍生物。 图1 2-甲氧基-4-硝基苯甲醛的缩合反应 将对甲苯基甲基异氰酸酯(5.37 克,27.5 毫摩尔)和碳酸钾(10.0 克,72.3 毫摩尔)加入2-甲氧基-4-硝基苯甲醛(5.00 克)在甲醇(50 毫升)中的溶液中。将得到的棕色悬浮液在回流条件下加热 18 小时。反应结束后将深棕色溶液冷却至室温,然后将反应混合物在减压下进行浓缩。将得到的黑色固体在二氯甲烷(50 mL)和水(50 mL)之间分层,收集有机层。用二氯甲烷(2 x 20 mL)萃取水层,将合并的有机萃取液在 MgSO4 上进行干燥处理。用活性炭/硅胶混合物(2 克)处理深绿色溶液,所得的反应混合物体系通过真空过滤得到澄清溶液,所得的滤液在减压下进行浓缩即可得到目标产物分子。 化学应用 2-甲氧基-4-硝基苯甲醛常用作有机合成试剂和医药化学中间体,在有机化学基础研究和生物活性分子制备中有一定的应用,例如有相关文献报道该物质可用于TTK蛋白激酶抑制剂的制备。 参考文献 [1] Herr, R. Jason; et al Organic Process Research & Development (2002), 6(5), 677-681 查看更多
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咔唑衍生物的特性及应用? 咔唑衍生物是一类具有良好空穴传输能力和高发光能力的富电子基团材料。由于其刚性平面结构,咔唑衍生物具有较高的玻璃化转变温度(Tg),使其成为一种理想的空穴传输材料和发光材料。其中,7H-苯并[C]咔唑作为一种重要的有机发光材料中间体,可用于合成有机光电材料,广泛应用于有机发光二极管(0LED)。 制备方法 7H-苯并[C]咔唑的制备方法如下: 步骤A:将260g2-萘酚和520g水合肼(80%)加入1000mL四口反应瓶中,升温至回流并保温反应20小时。反应完毕后,冷却至90℃,加入500g清水,于室温下搅拌结晶,抽滤并用清水洗涤二次,得到类白色固体。将固体用750ml甲苯加热溶解后,于60-70℃之间滴加100ml浓盐酸,冷却至室温后抽滤,用少量甲苯漂洗固体,干燥后得到淡红色白色固体,纯度为98.2%。 步骤B:将164g2-萘肼盐酸盐和968ml甲醇加入3000mL四口反应瓶中,在室温下搅拌后滴加91g环已酮,继续在室温下搅拌2小时。反应完毕后,冷却至0℃,抽滤并用冷的250ml甲醇漂洗固体,经干燥后得到白色针状固体,纯度为99.7%。 步骤C:将98.3g5、6、7、8-四氢-3、4-苯并咔唑和700ml甲苯加入2000mL四口反应瓶中,搅拌溶解后分批加入201.9gDDQ,升温至回流并保温反应2小时。反应结束后,抽滤除去不溶物,固体再用适量甲苯漂洗,合并滤液并减压回收甲苯。加入200ml乙醇,加热溶解后在室温下搅拌结晶,经抽滤后得到类白色固体7H-苯并[C]咔唑,干燥后纯度为99.5%。 主要参考资料 [1] CN201910346950.2一种10-溴-7H-苯并[c]咔唑的制备方法 查看更多
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皂草苷的应用及其作用机制? 皂草苷,又称皂角苷或皂素,是一种能够形成小溶液或胶体溶液并具有泡沫和乳化作用的糖苷。它在植物界中广泛分布,因其类似于肥皂的作用而得名。皂草苷呈淡黄色无定形粉末,具有刺激气味和毒性。 皂草苷的分类及应用 皂草苷可以分为两类:一类是三萜系皂草苷,存在于皂根、皂皮等植物中,主要用作洗涤剂、乳化剂和起泡剂,也可用于制药;另一类是甾族皂草苷,存在于地芰他(毛地黄)族植物等中,具有强心作用,主要用于制备激素。我国常用的远志、桔梗、皂荚等药材中都含有皂草苷,具有溶血作用,皂荚浸出液也可用于洗涤衣物和配制泡沫灭火器溶液等。 近年来,研究人员发现皂草苷在环境净化方面也具有潜在应用。例如,CN201710509794.8公开了一种利用皂角苷提高生物滴滤器净化乙苯废气的方法。该方法通过活性污泥对生物滴滤器进行接种,然后在营养液中引入皂角苷,结果表明皂角苷可以促进乙苯废气在生物滴滤器内的降解速率。此外,CN201710382476.X公开了一种皂角苷组合物及其制备方法与应用。该组合物由浓度为50g/L的皂角苷、浓度为鼠李糖脂20g/L和水组成,可以高效去除重金属铬。 参考资料: [1]简明精细化工大辞典 [2]CN201710509794.8一种利用皂角苷提高生物滴滤器净化乙苯废气的方法 [3]CN201710382476.X一种皂角苷组合物及其制备方法与应用查看更多
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抗原与抗体的特异性结合机制? 羊抗猪IGG-HRP是一种特异性结合猪IGG-HRP的HRP羊多克隆抗体。它在猪IGG-HRP检测实验中广泛应用于ICC/IF、Dotblot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr、Immunomicroscopy、WB等领域。 抗原与抗体的特异性结合是基于它们之间的结构互补性和亲和性。这种特性取决于抗原和抗体分子的空间构型。除了分子构型的互补性外,抗原表位和抗体超变区还必须紧密接触才能产生足够的结合力。 抗原抗体反应可以分为两个阶段:第一阶段是抗原与抗体特异性结合的阶段,这个阶段的反应很快,只需要几秒钟到几分钟,但是没有可见的反应。 第二阶段是可见反应阶段,这个阶段在适当的温度、pH值、电解质和补体的影响下,抗原抗体复合物会出现沉淀、凝集、细胞溶解和补体结合介导的肉眼可见的反应。这个阶段的反应较慢,通常需要几分钟到几小时的时间。 免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成的,它在人体血清中的含量最高(占Ig总量的75%)。IgG主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分。它也是机体抗感染免疫过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,它是人体免疫反应的最重要物质基础。此外,IgG是唯一能够通过胎盘屏障的免疫球蛋白,对于哺乳动物的新生幼仔和新生儿抗感染起着重要作用。 抗原与抗体的应用 流行性乙型脑炎病毒E蛋白主要抗原域与猪IgG1-Fc片段在大肠杆菌中的融合表达及其应用研究 该研究利用大肠杆菌的原核表达系统,将JEV主要结构基因E蛋白基因和猪IgG1-Fc片段基因进行了融合表达。同时,利用表达产物建立了一种新型的SPA协同凝集试验,用于检测JEV抗体。此外,还通过免疫BALB/c小鼠评价了融合蛋白E-pFc诱导抗JEV特异性免疫的效果。这为流行性乙型脑炎的血清诊断方法和新型疫苗的研制奠定了基础。 研究结果如下:1. 根据GenBank公布的猪IgG1的核苷酸序列,设计了一对引物,克隆了猪IgG1-Fc域中包含部分CH2和完整CH3片段的基因。测序结果表明,RT-PCR产物的大小为469bp,该片段的核苷酸序列与GenBank收录的猪IgG1的核苷酸序列同源性为99.2%,与猪IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG4的核苷酸序列同源性分别为89.7%、89.7%、96.7%和91.4%。从遗传进化树中可以看出,扩增片段与猪IgG1的遗传距离最近,位于同一分支上。这表明扩增的序列是猪IgG1亚型的。 2. 该片段编码的氨基酸序列长度为120,与猪源IgG的氨基酸序列具有较高的同源性,为79.2%~98.3%。与其他动物的IgG氨基酸序列的同源性低于68.3%。从推导的氨基酸序列可以看出,该片段中含有两个半胱氨酸Cys38和Cys98,与设计一致。 3. 将该片段通过连接子连接到表达载体pET-E中E基因的下游,构建了重组表达质粒pET-E-pFc。通过酶切鉴定插入目的基因的正确性,将其转化到宿主菌BL21(DE3)中。经过IPTG诱导表达和超声波裂解菌体后,使用SDS-PAGE进行可溶性分析。然后,使用His·Bind螯合层析柱和SPA亲和层析柱两种方法纯化融合蛋白。通过SDS-PAGE、薄层凝胶扫描、Western Blotting和iELISA对融合蛋白进行了鉴定,并分析了两种亲和层析方法的纯化效果。 参考文献 [1] Viral encephalitis of public health significance in India: Current status[J]. Rashmi Kumar. The Indian Journal of Pediatrics. 1999(1). [2] Japanese encephalitis virus nonstructural protein NS3 has RNA binding and ATPase activities[J]. Tsutomu Takegami, Daitoku Sakamuro, Toru Furukawa. Virus Genes. 1995(2). [3] A single gene controls resistance to Japanese encephalitis virus in mice[J]. K. Miura, T. Onodera, A. Nishida, N. Goto, Y. Fujisaki. Archives of Virology. 1990(3). [4] Maturation process of Japanese encephalitis virus in cultured mosquito cells in vitro and mouse brain cells in vivo[J]. T. Hase, P.L. Summers, K.H. Eckels, W.B. Baze. Archives of Virology. 1987(3). [5] 魏建超. 流行性乙型脑炎病毒E蛋白主要抗原域与猪IgG_1-Fc片段在大肠杆菌中的融合表达及其应用研究[D]. 南京农业大学, 2006.查看更多
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水苏糖是什么? 水苏糖是一种天然存在的四糖,是一种具有促进有益菌增殖功能的低聚糖。 水苏糖呈白色粉末状,略带甜味,甜度为蔗糖的22%,其分子结构为"半乳糖-半乳糖-葡萄糖-果糖"。 水苏糖的特点 水苏糖对人体胃肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群具有明显的增殖作用,能够快速改善消化道环境,调节微生态菌群平衡。 它能够促进有益菌在消化道中的优势地位,抑制产气产酸梭状芽孢杆菌等腐败菌的生长,同时产生多种生理活性物质,调节肠道pH值,抑制致病菌,阻止腐败产物生成,分解衍生出多种免疫功能因子。 因此,水苏糖也被称为"有益菌的食物"。 水苏糖与益生元 我们知道"益生元"是益生菌的食物,除了补充益生菌来抑制有害细菌、平衡肠道健康外,通过补充益生元来促进益生菌的生长,抑制有害细菌。具有这种功能的食品成分被称为"益生元"。 益生元是一个概念,指的是所有能够实现类似功能的食物成分的总称,而不是指特定的食物成分或产品。水苏糖也是益生菌的食物,因此从功能上来说,也可以归类为益生元。 与普通益生元相比,水苏糖能够更快速地增殖双歧杆菌等有益菌,效果快且不会引起腹胀不适感。 水苏糖的作用 1、水苏糖不被人体消化吸收,直接进入肠道后被双歧杆菌等有益菌利用分解。 2、水苏糖可以有效预防和缓解婴幼儿便秘和腹泻,抑制肠道疾病。 3、水苏糖可以全面增强婴幼儿的免疫能力,提高机体抗病能力。 4、水苏糖具有清洁肠道、排毒排铅的效果。 5、水苏糖可以置换金属离子,促进钙等矿物质的吸收。 6、水苏糖易溶于水,可以直接食用。作为双歧因子的一种,水苏糖对人体胃肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群具有明显的增殖作用,能够快速改善消化道环境,调节微生态平衡。 水苏糖的来源 水苏糖是一种自然界中存在的物质,存在于我们常食用的蔬菜和治疗疾病的中药材中。 常用的中药地灵、泽兰中含有丰富的水苏糖,食用历史也最悠久。 从中药之母——地黄中提取的地黄寡糖,其主要成分也是水苏糖。在研究地黄药理作用时,科研机构常常使用水苏糖代替地黄寡糖进行临床试验,两者的生物活性基本相同。 所有的豆类食品都含有水苏糖,如大豆、黄豆、绿豆等,但水苏糖的含量较低,一般在2%~4%之间。在豆芽菜发芽时,水苏糖会迅速消失,因此食用豆芽菜并不能补充水苏糖。 小结 我们都知道,在4到6个月之前,母乳和奶是宝宝最好的食物,之后逐渐添加辅食。宝宝的健康身体最好依靠健康的日常饮食和周到的照顾来实现。如果宝宝在肠道方面有任何不适需要添加外来菌种帮助,请根据宝宝的月龄和具体情况咨询医生的建议,然后做出正确的选择。查看更多
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氧化锌在橡胶工业中的重要作用是什么? 氧化锌是一种天然胶乳的活性剂,也可用作增强剂和着色剂。根据生产方法的不同,可分为间接法氧化锌、直接法氧化锌和活性氧化锌三种。在橡胶工业中,氧化锌是最重要的无机活性剂之一。 氧化锌的添加可以加快橡胶的硫化速度,并增加交联度。它对噻唑类、次磺酰胺类、胍类、秋兰姆类的促进剂有活化作用。因此,氧化锌广泛应用于各种橡胶制品,尤其适用于透明橡胶制品和与食品接触的制品。 工业生产的氧化锌中有50%用于橡胶工业。氧化锌和硬脂酸是橡胶硫化的重要反应物,也是制造橡胶的原料之一。 除了在橡胶硫化过程中的作用外,氧化锌还可以提高橡胶的导热性能,帮助轮胎散热,保证行车安全。它还可以防止霉菌或紫外线对橡胶的侵蚀。 在橡胶轮胎行业,氧化锌的作用是提高产品的导热性、耐磨性、抗撕裂性和抗拉强度等指标,同时节省锌的用量约30%。 在橡胶制品中,活性氧化锌主要用作补强剂,使橡胶具有良好的耐蚀性、抗撕裂性、弹性和伸长率。它还可以作为硫化活性剂和补强剂,用于天然橡胶、合成橡胶和胶乳的硫化活性剂。 氧化锌还可以加快硫化速度,提高硫化胶的导热性,使硫化更加彻底。在透明橡胶制品的生产中,活性氧化锌是一种优良的硫化活性剂。 总之,氧化锌在橡胶工业中的作用是多方面的,包括提高产品性能、促进硫化过程、增加导热性能等。它是橡胶制品生产中不可或缺的无机活性剂。 查看更多
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如何合成溴苯腈? 溴苯腈,又称为4-溴苯腈,是一种在医药及有机合成领域中广泛应用的溴系精细化学品,可用作医药中间体和颜料中间体。 合成工艺概述 本文介绍了一种合成溴苯腈的生产工艺。该工艺通过使用三氯氧磷、4-溴苯甲酸和1,1-二苯基乙烷作为原料,将其混合后通入氨使溶液呈碱性,然后进行冷却、过滤和分离。最后,将分离后的有机层与碱性溶液进行混合并加入盐酸进行反应,得到最终的溴苯腈成品。 合成步骤 1. 在反应釜中加入三氯氧磷、4-溴苯甲酸和1,1-二苯基乙烷,搅拌混合。 2. 继续搅拌并通入氨。 3. 控制温度在60℃以下,继续通入氨使溶液呈碱性。 4. 使用氮气置换混合气体,缓慢加热至260-270℃,保温反应55-65分钟。 5. 冷却反应溶液,在8-12℃时进行过滤,分离有机溶剂层和无机化学品。 6. 用预先加热的1,1-二苯基乙烷洗涤无机化学品,然后将洗涤液与有机溶剂层合并。 7. 加入氢氧化钠配置的碱溶液,加热至55-65℃并进行搅拌,分液。 8. 用含氢氧化钠的碱溶液再次进行分液。 9. 将两次分液后的碱性溶液混合,加入35%的盐酸进行反应,得到溴苯腈成品。 查看更多
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聚蔗糖的特性及应用? 聚蔗糖是一种由蔗糖和环氧氯丙烷共聚合而成的聚合物,经过超滤或分级沉淀进行纯化。它具有高度支化的分子结构和高含量的羟基,能够良好地溶解于水溶液中。聚蔗糖是一种中性的球状分子,具有良好的生物相容性,不含任何离子化基团,可以与生物体在生理条件下相容。在酸性环境下使用时需要注意,因为聚蔗糖对酸更为敏感。在使用过程中需要检查分子量、取代度和干燥失重等指标。TdB提供分子量从20 kDa到1000 kDa的聚蔗糖产品,它是一种干燥的粉末,具有极强的亲水性。 聚蔗糖的理化性质 聚蔗糖是一种中性分子,可以很容易地溶解于水和电解质溶液,其溶液浓度可以超过50%(w/v)。关于聚蔗糖的分子构象和性质有许多研究。大多数研究认为,聚蔗糖的分子结构介于固体球体和无规则弹性线圈之间。与葡聚糖相比,聚蔗糖的结构更接近球形,但柔韧性较差。通过比较葡聚糖和聚蔗糖的斯托克斯半径,可以反映出它们之间的柔韧性差异。因此,在使用凝胶渗透色谱法(GPC)比较具有相似分子量的聚蔗糖和葡聚糖组分时,聚蔗糖的流体动力学体积较小,对应的保留时间较长。 聚蔗糖的合成与结构 季胺标记葡聚糖是通过葡聚糖与2,3-环氧丙基三甲基氯化铵反应合成的,合成后需要进行纯化,并检测控制产品的平均分子量(Mw,Mn)、溶解度、取代度和干燥失重等指标。根据客户的要求可以进行定制。产品的平均分子量通常用葡聚糖的平均分子量来表示,例如,季胺标记葡聚糖70的重均分子量约为70,000。实际的分子量通过凝胶渗透色谱法(GPC)测定,并在分析证书中注明。葡聚糖和最终产物的分子量差异取决于取代后分子流体动力学体积的变化。葡聚糖的重均分子量范围为4,000到2,000,000,经过严格控制,使用GPC、吸光度、氮含量、pH、比旋光度和干燥失重等指标进行检测。 葡聚糖是从明串珠菌肠系膜B-512F中提取得到的,它本质上是一个线性的α-(1-6)-连接的葡萄糖链,但沿链分布的α-(1-3)分支的百分比很低(2-5%)。 聚蔗糖具有与细胞、病毒和微生物良好的生物相容性,几十年来已广泛应用于分离技术中。 许多研究者认为聚蔗糖是研究肾小球生理学的合适分子,因为它具有良好的生物相容性,在血液中不容易降解,并且其构象特性更类似于蛋白质。聚蔗糖(尤其是FITC和TRITC标记的聚蔗糖)已广泛应用于血管通透性研究,特别是肾小球渗透性研究,并已经有多篇综述文章对此进行了全面回顾。聚蔗糖还被用于细胞和细胞器的梯度离心、核酸杂交、半抗原载体、浓缩透析、支持细胞系生长和相分离等领域。 查看更多
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如何制备1-BOC-3-哌嗪甲酸甲酯? 1-BOC-3-哌嗪甲酸甲酯是一种有机中间体,可以通过哌嗪-2-甲酸二盐酸盐和草酰氯与甲醇反应制备而成。 制备方法 制备1,4-双Boc哌嗪-2-甲酸:在1.0L反应瓶中,将哌嗪-2-甲酸二盐酸盐(50g)与NaOH(39.4g)溶解于水(500mL)中,控温0-10℃,滴加Boc酸酐(134.2g)溶解于THF(100mL)中的混合物,反应16小时。后处理:加入甲基叔丁基醚(400mL)进行萃取分液,取水相,用3NHCl(150mL)调节pH值为2-3,固体析出后抽滤,水洗滤饼,真空干燥得到固体产物。 制备1-BOC-3-哌嗪甲酸甲酯:在1.0L反应瓶中,将1,4-双Boc哌嗪-2-甲酸(20g)与无水THF(200mL)搅拌均匀,加入吡啶(7.2g),降温至0-10℃,滴加草酰氯(9.2g)的THF(100mL)溶液,控温不超过10℃,搅拌2-3小时,最后加入甲醇(200mL)于40-50℃继续反应2-3小时。反应完毕后,减压浓缩除去甲醇和吡啶,加入乙酸乙酯溶解,使用饱和碳酸钠水溶液调节pH值为9-10,进行萃取分液,继续用EA萃取水相,合并有机相,经过无水硫酸钠干燥后减压浓缩,通过柱层析得到目标产物。 参考文献 [1] [中国发明] CN202011168801.0 一种合成单胺保护的哌嗪-(R/S)2-甲酸酯的方法 查看更多
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