ANTI-IGE抗体的应用及其检测原理？ 背景 [1-3] ANTI-IGE抗体是一种多克隆抗体，能够特异性结合ANTI-IGE，并广泛应用于免疫学实验，如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理：采用双抗体夹心法来测定样本中ANTI-IGE的水平。首先，在微孔板上包被纯化的ANTI-IGE抗体，形成固相抗体。然后，依次加入样本中的ANTI-IGE和HRP标记的ANTI-IGE抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，然后在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中ANTI-IGE的浓度呈正相关。最后，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），根据标准曲线计算样品中ANTI-IGE的浓度。 IgE主要由呼吸道和消化道黏膜下的浆细胞产生，是一种亲细胞性抗体，与变态反应、寄生虫病和皮肤过敏有关。此外，还存在一种特异性IgE，能够与特定的过敏原结合，对于过敏性哮喘的诊断具有重要意义。 B淋巴细胞在抗原刺激下转化为浆细胞，产生能够与特定抗原结合的抗体，称为免疫球蛋白。免疫球蛋白E（IgE）对嗜碱性粒细胞和肥大细胞具有高度亲和性，因此也被称为反应素或亲细胞抗体。 IgE主要由呼吸道和消化道黏膜固有层的浆细胞产生，在正常人的血液中含量极低，约占血清总Ig的0.002%。IgE与I型变态反应密切相关，过敏体质或超敏患者的血清中IgE含量明显高于正常人，因此高浓度的IgE常提示遗传过敏体质或存在I型变态反应。 应用 [4][5] ANTI-IGE抗体在日本血吸虫病诊断中的应用及与ST2基因多态性的相关性研究 本研究旨在探究在日本血吸虫疫区低流行率和低感染强度地区的高准确性诊断方法。 研究对象为837名长期生活在湖北日本血吸虫疫区的成年居民，根据收取标本时间段将其分为试验组（TS）和验证组（VS），其中包括479名血吸虫感染者和358名暴露但未感染者。 采用酶联免疫吸附测定法检测血清中日本血吸虫成虫可溶性抗原（SWAP）的特异性抗体（IgG、IgG4和IgE）水平，并评估这些抗体与血吸虫感染之间的关系。利用试验组的数据建立了三个用于诊断血吸虫感染的模型，并在验证组中验证了这些模型的准确性。 最后，在巴西曼氏血吸虫疫区的人群中重复验证了上述结果。结果显示，在湖北人群的两组中，血吸虫感染者的SWAP特异性IgG、IgG4和IgE抗体水平较未感染者更高，而IgE/IgG4比值较低。 此外，血吸虫感染者和未感染者的IgG抗体阳性率均较高。在中国人群中，诊断模型EGR评分在三个模型中表现最好（在TS组，曲线下面积为0.905，敏感度为82.7%，特异度为84.0%；在VS组，曲线下面积为0.933，敏感度为87.7%，特异度为89.1%）。然而，在巴西人群中，预测模型IgG4评分表现最好（曲线下面积为0.788，敏感度为73.2%，特异度为73.3%）。 参考文献 [1]Schistosomiasis in Malaysia: A Review[J]. Candy Chuah, Geoffrey N. Gobert, Baha Latif, Chong Chin Heo, Chiuan Yee Leow. Acta Tropica. 2018. [2]Diagnosis, Monitoring, and Control of Schistosomiasis—An Update[J]. Wu, Yanqi, Liu, Jiaqing, Lin, Yifen, Weng, Rennan, Chen, Ran, Li, Jian, Lv, Zhiyue. Journal of Biomedical Nanotechnology. 2018. [3]Down-regulation of microRNA-203-3p initiates type 2 pathology during schistosome infection via elevation of interleukin-33[J]. Xing He, Jun Xie, Yange Wang, Xiaobin Fan, Qin Su, Yue Sun, Nanhang Lei, Dongmei Zhang, Guangping Gao, Weiqing Pan. PLOS Pathogens. 2018. [4]Genetic regulation of IL1RL1 methylation and IL1RL1-a protein levels in asthma[J]. F. Nicole Dijk, Chengjian Xu, Erik Mele?n, Anne-Elie Carsin, Asish Kumar, Ilja M. Nolte, Olena Gruzieva, Goran Pershagen, Neomi S. Grotenboer, Olga E. M. Savenije, Josep Maria Ante?o?, Iris Lavi, Carlota Dobae?o?n?o, Jean Bousquet, Pieter van der Vlies, Ralf J. P. van der Valk, Johan C. de Jongste, Martijn C. Nawijn, Stefano Guerra, Dirkje S. Postma, Gerard H. Koppelman. European Respiratory Journal. 2018. [5]赵健萍.日本血吸虫病诊断标记物以及与ST2基因多态性的相关性研究[D].华中科技大学,2019.查看更多
2,3,5-三苯基氯化四氮唑的合成方法是什么? 2,3,5-三苯基氯化四氮唑是一种用于还原糖的灵敏试剂，可用于区分乙醇、酮类和简单醛，测定脱氢酶的活性，滴定二硼烷、五硼烷和十硼烷，以及检定植物种子的发芽率，测定去氢酶的活性，滴定硼烷，分析农药的残留量。由于其重要性，我们需要了解其合成方法。 背景及概述 2,3,5-三苯基氯化四氮唑是一种重要试剂，可以用于多种应用领域。然而，传统的合成方法使用了对环境有害的四乙酸铅作为催化剂。本发明提供了一种新的合成方法，完全避免了使用四乙酸铅，从而消除了铅对环境的影响。 制备 本发明的制备方法使用苯甲醛、苯胺和苯肼作为基本原料。首先，利用苯甲醛与苯肼合成苯腙，然后利用苯胺形成的重氮盐合成三苯基甲臜的红色结晶体，最后利用有机催化剂将其环化成2,3,5-三苯基氯化四氮唑。该方法避免了使用四乙酸铅催化剂，从而消除了铅对环境的影响，同时收率高达70%以上，纯度达到99%以上（HPLC）。 图1 2,3,5-三苯基氯化四氮唑的合成反应式 实验操作： 将新蒸馏的苯甲醛溶于甲醇，加入苯肼并搅拌。控制温度不超过30℃，得到的产物避光密封保存。然后将甲醇加入氢氧化钠和无水乙酸钠中进行溶解，并降温至0℃。加入苯甲醛苯腙并搅拌均匀。另外，将苯胺、浓盐酸和水配成苯胺盐酸盐溶液，冷却至0℃后加入亚硝酸钠溶液。将重氮盐慢慢加入到溶液中，控制反应温度不超过5℃，反应2小时后自然升温至室温。离心脱水后得到晶体，洗净氯化钠并烘干，得到2,3,5-三苯基氯化四氮唑。 将三苯基氯化四氮唑溶于甲醇中，加入盐酸溶液并搅拌均匀。滴加催化剂并继续搅拌，保持反应温度在20~25℃。当固体完全消失时，反应结束。蒸馏出甲醇后，进行结晶得到产品。 参考文献 [1] Journal of the American Chemical Society, , vol. 76, p. 1695 查看更多
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