DNA酶1样蛋白1抗体的应用及研究? 背景 [1-3] DNA酶1样蛋白1抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合DNA酶1样蛋白1。该抗体广泛应用于多种免疫学实验,包括Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 检测原理 通过双抗体夹心法测定标本中DNA酶1样蛋白1的水平。首先,将纯化的DNA酶1样蛋白1抗体包被在微孔板上,形成固相抗体。然后,依次加入DNA酶1样蛋白1和HRP标记的DNA酶1样蛋白1抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,最终转化成黄色。颜色的深浅与样品中DNA酶1样蛋白1的浓度正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中DNA酶1样蛋白1的浓度。 脱氧核糖核酸酶Ⅰ的特点 脱氧核糖核酸酶Ⅰ是一种核酸内切酶,最早由M.Kunitz结晶得到。它对离子的存在有明显的影响。作为一种研究材料,脱氧核糖核酸酶Ⅰ在核酸的研究中得到广泛应用。 脱氧核糖核酸酶Ⅰ是最有代表性的核酸内切酶之一。它最早由M.Kunitz从胰脏中分离出结晶,也被称为胰脱氧核糖核酸酶或DNaseⅠ,EC3.1.21.1。该酶的分子量约为3.1万,等电点为pH4.7,最适pH为7附近,需要Mg2和Mn2。它能够分解单链和双链DNA,并产生具有5′-磷酸末端的分解物。 在一般条件下,脱氧核糖核酸酶Ⅰ的分解产物含有1到8-12个寡聚核苷酸,平均大小约为四个核苷酸。它首先分解dpPupPy键,但切断方式受到二价离子的影响。由于脱氧核糖核酸酶Ⅰ容易结晶,因此在核酸的研究中得到广泛应用。同时,由于其整个结构已经明确,也成为酶化学研究的重要材料。 应用 [4][5] 聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究 动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病,最初发生于血流动力学紊乱的血管分叉或狭窄的部位。 局部血流变化与这种部位特异性密切相关,其中一个重要因素是剪切力(WSS)。剪切力是血液在血管中流动时对血管内膜产生的一种摩擦力。剪切力的大小与血液流速成正比,与管腔半径成反比。生理剪切力的大小介于0.5-1.2Pa,小于0.5Pa或大于1.2Pa分别称为低剪切力和高剪切力。剪切力作用于内皮细胞能引起胞内各种信号转导分子的激活,如蛋白激酶C(PKC)、丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)等。 此外,低剪切力能够促进促动脉硬化物质在管腔和管壁之间的转运,从而促进动脉粥样硬化的发生。聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)是一种高度保守的DNA结合蛋白。作为一种核酶,PARP-1参与了DNA损伤后的修复。 一旦与损伤的DNA结合,PARP-1会被激活并催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)裂解为尼克酰胺和ADP核糖,从而在DNA修复、基因转录、细胞周期、细胞死亡、染色体功能和遗传稳定性中发挥重要作用。然而,过度活化的PARP-1会导致细胞内NAD+和ATP的耗竭,进而引起细胞能量危机、细胞毒性和细胞死亡。 参考文献 [1]Deficiency of Rac1 Blocks NADPH Oxidase Activation,Inhibits Endoplasmic Reticulum Stress,and Reduces Myocardial Remodeling in a Mouse Model of Type 1 Diabetes[J].Li,Jianmin,Zhu,Huaqing,Shen,E,Wan,Li,Arnold,J Malcolm O,Peng,Tianqing.Diabetes.2010(8) [2]Modulation of myocardial metabolism:an emerging therapeutic principle[J].John D Horowitz,Yuliy Y Chirkov,Jennifer A Kennedy,Aaron L Sverdlov.Current Opinion in Cardiology.2010(4) [3]Diabetic cardiomyopathy:mechanisms and therapeutic targets[J].Pavan K Battiprolu,Thomas G Gillette,Zhao V Wang,Sergio Lavandero,Joseph A Hill.Drug Discovery Today:Disease Mechanisms.2010(2) [4]Regulation of the expression of inducible nitric oxide synthase[J].Andrea Pautz,Julia Art,Susanne Hahn,Sebastian Nowag,Cornelia Voss,Hartmut Kleinert.Nitric Oxide.2010(2) [5]秦伟栋.聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究[D].山东大学,2013.查看更多
如何制备4-甲氧基-3-三氟甲基苯甲腈? 4-甲氧基-3-三氟甲基苯甲腈是一种含有CF 3 基团医药合成中间体。CF3基团在许多药物,农用化学品,催化剂,材料和工业化学品均有使用。尽管已经建立了完善的三氟甲基化方法,但是使用可及的和较便宜的方法将这些基团直接和选择性地引入(杂)芳烃中仍然是主要的挑战。 制备方法 Natte K等人报道了一种制备4-甲氧基-3-三氟甲基苯甲腈的方法。该方法使用4-甲氧基苄腈作为原料与CF 3 Br反应得到目标产物。 在干燥的50 mL高压釜中装入4-甲氧基苄腈、Pd(OAc) 2 、BuPAd 2 、TEMPO和Cs 2 CO 3 。然后,将丙酮注入高压釜中,并用N 2 对高压釜进行置换。接着,加入CF 3 Br和N 2 对高压釜加压,并在加热系统中加热反应50小时。反应完成后,冷却高压釜并释放温度和压力。通过滤纸过滤反应混合物,并用乙酸乙酯和丙酮洗涤,然后蒸发溶剂。最后,通过柱纯化层析得到4-甲氧基-3-三氟甲基苯甲腈,收率为34%。 该方法的产物经过核磁共振和质谱分析进行了表征。 参考文献 [1] Natte K , Jagadeesh R V , He L , et al. Palladium-Catalyzed Trifluoromethylation of (Hetero)Arenes with CF3 Br.[J]. Angew Chem Int Ed Engl, 2016, 55(8):2782-2786.查看更多
溴乙酰溴的特性及应用? 溴乙酰溴,又称Bromoacetyl bromide,是一种白色固体粉末,在常温常压下存在。它对水分非常敏感,因此需要避免接触水分,并在低温下保存。溴乙酰溴在有机合成和医药化学中起着重要的作用,例如用于合成硫脒头孢菌素。然而,需要注意的是,该化合物具有毒性,可能对眼睛、皮肤和呼吸系统造成刺激和损伤,因此在使用和处理时需要采取相应的防护措施。 结构性质 溴乙酰溴是一种高度反应性的化合物,容易分解和发生反应。它可以与许多物质发生反应,包括水、醇、胺、酸、碱和亚硫酸盐等。溴乙酰溴是一种活泼的卤代乙酸酯,容易发生亲电取代反应。它可以水解为乙酸和溴化氢,也可以参与酯化和烷基化反应等。 应用 溴乙酰溴是合成抗生素硫脒头孢菌素的重要中间体。硫脒头孢菌素是一种半合成抗生素,通过对头孢菌素C进行化学修饰得到。硫脒头孢菌素具有广谱的抗菌作用,可以有效地抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长和繁殖。 图1 溴乙酰溴的应用 在一个干燥的反应瓶中,在零度下将溴乙酰溴缓慢滴加到氘代甲醇、三乙胺和干燥的二氯甲烷的混合液中,然后在零度下搅拌反应2小时。反应结束后,加入硫酸水溶液淬灭反应,然后用水和碳酸氢钠水溶液洗涤有机层,最后用无水硫酸镁干燥,除去挥发分,得到目标产物分子。 参考文献 [1] Biswas, Bibaswan et al Journal of the American Chemical Society, 136(10), 3740-3743; 2014 [2] Liu, Qiang et al Journal of Organic Chemistry, 82(3), 1389-1402; 2017 查看更多