首页
遥闻深巷近听
影响力0.00
经验值0.00
粉丝12
结构工程师
来自话题:
一般一个分子量の蛋白需要1分钟,所以一般转膜时间都是在分子量的基础上加个10min就可以。? 内皮细胞的分离和培养 将小鼠颈椎脱臼处死,置入75%的乙醇中浸泡消毒1 min,操作台铺无菌巾,将小鼠置操作台上并固定。胸腹正中切口逐层切开,显露整个胸腹腔,于脊柱左侧找到主动脉,10倍手术显微镜下解剖主动脉弓,于左锁骨下动脉远侧的主动脉壁上做一小切口,置入导引钢丝直至髂动脉处,在钢丝引导下仔细分离动脉被膜及周围脂肪组织,切断其在胸腹腔的分支血管,完整取出胸、腹主动脉,并立即放入含DMEM培养液的培养皿中,移至超净工作台。在含有PBS液的无菌容器中反复冲洗血管3~4次,再放入另一无菌培养皿中,纵行剖开血管,用显微器械将其剪成1 mm×1 mm大小的血管植块,将血管内面贴在6孔板上,约1 cm2放1个植块。37℃、5% CO2培养箱中静置30 min后加入含20% FBS的DMEM培养液(pH值为7.2),加液量以略超过血管内膜面为宜,过多会导致血管植块漂浮,继续放入CO2培养箱中培养。60 h左右观察细胞生长情况,将血管植块除去,换液1次。以后每2天换液1次,待细胞融合成单层铺满孔底后进行传代培养:将6孔板移至超净工作台,吸弃培养液,用PBS液轻洗2次,加入0.25%胰蛋白酶-0.2% EDTA混合消化液,倒置显微镜下观察,当细胞间隙增宽、细胞变圆但尚未漂浮时立即吸弃消化液并加入适量的含20% FBS的EMDM培养液终止消化,吹打分散细胞,按1∶3接种于T75曲颈培养瓶中传代培养。传代培养时EMDM培养液中FBS的浓度为10%。 查看更多
来自话题:
乙炔法合成乙酸乙烯酯? 乙烯水合得乙醇,氧化为乙酸,乙酸在乙酸锌催化下与乙炔加成的乙酸乙烯酯查看更多
来自话题:
溶出仪的水箱防腐用什么方法? 这个问题问过SOTAX的工程师,他们说不建议加任何防腐剂,要勤换水,所以我们溶出仪水箱每周都要换水。 查看更多
来自话题:
自制制剂和参比制剂杂质如何比较? 1、原研有的工艺杂质,自制的比原研小可以接受,如果比原研大,不超过ICH规定的鉴定杂质限度就可以。2、原研没有的工艺杂质,也不得超过ICH规定的鉴定杂质限度就可以。3、降解杂质比较复杂一些,要看近效期的原研情况以及多批刚生产的原研杂质情况,规定放行限度和货架期限度。查看更多
来自话题:
酶切产物弥散,是什么原因? 你这个电泳的条带很魔性啊,电压太大了吧。查看更多
来自话题:
western照片图片是SCN格式,怎么打开或转换? 下载image lab就可以打开scn格式图片,如果仍然不能打开的话,是因为你改了文件名或者移动了文件的位置。打开image lab,左上角open里,找到文件位置就可以打开。 查看更多
来自话题:
严重的自聚,加入何种阻聚剂可以避免这种不良的影响? 对羟基苯甲醚 查看更多
来自话题:
急求机理分析!? 画一个哈, 查看更多
来自话题:
怎样在钻孔中量测真实地下水位? 一般我们用测钟来量测真实地下水位,一般的测量水位方法都会有误差的。 查看更多
来自话题:
在水和乙腈中均几乎不溶的物质,会溶于两者的混合液吗? 有可能的,在这类溶剂中溶解曲线为上凸型曲线的。我做过水和乙醇,水和丙酮混合溶剂药的溶解曲线,都是这样的。 查看更多
来自话题:
帮忙看一下细胞培养过程中这是什么类型的污染? 不像污染啊,是不是消化过了 查看更多
来自话题:
western blot条带异常,怎么办? 建议中间转膜后用丽春红染料观察下膜上的蛋白条带是否清晰! 查看更多
来自话题:
PLC与驱动器的共阴极和共阳极的接法的区别? 应当是晶体管输出的PLC,有PNP及NPN型的分别。 查看更多
来自话题:
请问下大家充电器做测EMC时都用什么做负载? 水泥负载,本质就是不产生电磁干扰的东西。 查看更多
来自话题:
在做CCK8实验,由于要分别24,48,72小时培养,实验一开始的种板数较少,但是测下来的值也就很小? 很多文章都会标准化,就是把Mock或control组的细胞活力当成100%,再计算其他的。这样看不见原始数据,但也不会影响最终结果,也可以客观其他组显示细胞活力变化。 查看更多
来自话题:
硅胶柱层析纯化,能重复出第二步产率,但是重复不出来第一步产率什么情况? 应该成酯后吸附更小。点板来对比粗品品质不可取,建议做GC。结构复杂,产品如果是固体,不如结晶省事。 查看更多
来自话题:
同样的色谱条件,每天做出来的保留时间都不一样? 首先,如果是稳定的方法,应该不会出现这种情况,平衡时间够不够。平衡时间没问题的话,看看柱压稳定不稳定。 查看更多
来自话题:
隧道在埋深多少的时候会自然成拱? 隧道在埋深多少的时候会自然成拱?这不是一下子能说上来的吧!应该具体问题具体分析。 查看更多
来自话题:
如何证明某分子抑制了2个蛋白的相互作用? 首先做下IP 是比较直接和成本合适的实验,FRET做不做倒真无所谓 现在文章很少用,倒是可以做个共聚焦,活体可以用GFP和RFP做融合蛋白,也可以用两种荧光偶联抗体,加药 不加药 做一个动态或者加药x小时候两个蛋白的偶联变化查看更多
压力容器上的安全阀装在与容器连接的短管上可以吗? 可以,但要注意该短管的管径以及是否与容器内气相空间相连 可以 ,但是必须保证短管的尺寸满足安全泄放要求 查看更多
简介
职业:杭州欣阳三友精细化工有限公司 - 结构工程师
学校:成都纺织高等专科学校 - 染化系
地区:河北省
个人简介:人类的历史,就是一个不断地从必然王国向自由王国发展的历史。查看更多
已连续签到天,累积获取个能量值
  • 第1天
  • 第2天
  • 第3天
  • 第4天
  • 第5天
  • 第6天
  • 第7天
 
这是一条消息提示
 
提醒
您好,您当前被封禁天,这天内您将不能登陆盖德问答,离解封时间还有
我已了解
提醒
提问需要5个能量值,您当前能量值为,请完成任务提升能量值
去查看任务