ANTI-C-MYC抗体的应用及其检测原理? ANTI-C-MYC抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合ANTI-C-MYC,并广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 为了检测样本中的ANTI-C-MYC水平,采用双抗体夹心法。首先,在微孔板上包被纯化的ANTI-C-MYC抗体,形成固相抗体。然后,依次加入样本中的ANTI-C-MYC和HRP标记的ANTI-C-MYC抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成黄色。样品中的ANTI-C-MYC浓度与颜色的深浅呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并利用标准曲线计算ANTI-C-MYC浓度。 c-myc基因是myc基因家族的重要成员之一,参与细胞凋亡和多种肿瘤的发生发展。C-myc基因的产物是62KD的磷酸化蛋白P62c-mgc,定位于细胞核内,具有转化细胞的能力,并在调节细胞生长、分化及恶性转化中发挥作用。 C-Myc蛋白的结构包括转录激活区、非特异DNA结合区、核靶序列、碱性区、螺旋一环一螺旋(HLH)及亮氨酸拉链区。螺旋一环一螺旋紧随碱性区,是C-Myc蛋白与DNA特异序列结合的部位。 ANTI-C-MYC抗体在研究中的应用 用于研究MYC调节CHK1和CHK2引起鼻咽癌干细胞放射抵抗的机制 干细胞通过激活CHK1和CHK2的细胞周期检验点,增加DNA修复能力,从而引起辐射耐受。c-MYC基因是MYC基因家族的重要成员之一,与多种肿瘤的发生发展有关。 c-MYC的表达与细胞的生长状态和分化状态密切相关。c-MYC可以抑制p27,激活cyclin E/Cdk2,使成纤维细胞进入分裂状态。此外,c-MYC还可以同时激活p53和pten,促进正常和恶性干/祖细胞的分化、自我更新和致瘤性。 通过识别具有慢周期特性的PKH26+细胞,研究发现c-MYC直接调节CHK1/2,揭示了PKH26+细胞具有辐射抗性的机制,旨在阐述c-MYC介导的DNA损伤修复在鼻咽癌放疗抵抗中的作用。 参考文献 [1] Mei‐Chi Chang, Chiu‐Po Chan, Wei‐Ting Wang, Bei‐En Chang, Jang‐Jaer Lee, Shuei‐Kuen Tseng, Sin‐Yuet Yeung, Liang‐Jiunn Hahn, Jiiang‐Huei Jeng. Toxicity of areca nut ingredients: Activation of CHK1/CHK2, induction of cell cycle arrest, and regulation of MMP‐9 and TIMPs production in SAS epithelial cells. Head Neck. 2013(9). [2] Alo Ray, Keisha Milum, Aruna Battu, Gulzar Wani, Altaf A. Wani. NER initiation factors, DDB2 and XPC, regulate UV radiation response by recruiting ATR and ATM kinases to DNA damage sites. DNA Repair. 2013(4). [3] Benila Richi, Raosaheb K. Kale, Ashu B. Tiku. Radio-modulatory effects of Green Tea Catechin EGCG on pBR322 plasmid DNA and murine splenocytes against gamma-radiation induced damage. Mutation Research-Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 2012(1). [4] Hong‐Wu Xin, Danielle M. Hari, John E. Mullinax, Chenwi M. Ambe, Tomotake Koizumi, Satyajit Ray, Andrew J. Anderson, Gordon W. Wiegand, Susan H. Garfield, Snorri S. Thorgeirsson, Itzhak Avital. Tumor‐Initiating Label‐Retaining Cancer Cells in Human Gastrointestinal Cancers Undergo Asymmetric Cell Division. STEM CELLS. 2012(4). [5] 王雯珺. MYC调节CHK1和CHK2引起鼻咽癌干细胞放射抵抗的机制. 南方医科大学, 2013.查看更多