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猫七姑娘
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化工主管
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用western测nf-kb是不是要分别测细胞浆、细胞核以及总细胞内的含量? 一般只要测一下胞核内的就可以了,常情况下胞核中检测不出含量,胞核内的含量代表了活化的水平,做P65就可以了,用Active-motif的盒子提核蛋白还是蛮方便的,由于没有内参,所以在做WB前需蛋白定量,保证每道的上样量一致,个实验不难,也比较容易出结果,祝你好运查看更多
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如何判断药物的疏水性和进入细胞的能力? 衡量药物的疏水性,logP就够了,但要是判断进入细胞的能力,光一个logP是不够的,还得看分子的大小,结构,在哪个部位进入细胞等,不是很全面,仅做参考。 查看更多
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未拆封的培养基需要补充谷氨酰胺么? 谷氨酰胺在4℃降解是比较缓慢和平缓的,温度高的时候才会降解的非常快,如果你的培养基开了以后用的很快,就没有必要加了。 查看更多
发酵液提取产品如何去除核酸污染? 可以使用核酸酶(DNA酶和RNA酶)处理发酵液,使核酸被降解为很小的分子片断,这样就容易与目标产品分离了。查看更多
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LY294002是如何阻断PI3K/AKT通路的? Y294002是常用的PI3K/AKT通路的抑制剂,如楼上所引,是通过对PI3K的竞争性抑制来抑制PI3K的酶活性,那么为什么大家常用phopho-AKT(S473)来检测呢,因为虽然众所周知Y294002可以PI3K的活性,但是没有一种磷酸化位点PI3K活性的标志读出(indicator),所以检测PI3K的活性,一般用kit, 成本很高,并且还麻烦,而AKT作为PI-3K作为的下游,S473磷酸化位点就是AKT的活性的indicator,用Wesatern Blot就可以很方便的检测,所以用的非常广泛。但是对于有些AKT不依赖于PI-3K的通路,就要用别的方法(别的AKT的抑制剂或者siRNA/ShRNA等)了。查看更多
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已知IC50,如何设置药物浓度? 很多文献在检测了一些细胞因子表达之后都要说明此试验的药物的浓度是对细胞没有毒性的,这样的结果才有意义,否则,细胞都翘辫子了,检测啥子都没有意义了。我在作细胞试验时候,一般是先检测细胞的IC50值,然后从IC50的三分之一的浓度开始向下以3的倍数递减,直到发现有效了,再在有效的浓度按照上下以2的倍数检测用于最后发文章的浓度。如果找不到有效浓度就不做了。总之,除了凋亡之类的检测有些特殊规则之外,一般的药效学检测都是应该保证细胞的存活为前提。 查看更多
大量油中如何除去少量水? 1、离心过滤。利用水比油重的原理,采用高速离心法使油水分离,该方法通常用于去除游离水。 2、静置脱水。一般用于钢厂的油膜轴承油。将水含量超标的油箱切换到备用状态,静置一段时间后开启油箱底部的放油阀将沉淀的游离水放出;该方法也主要用于去除游离水。 3、介质过滤。利用纸质滤芯的吸水性能,除去油中微量的水;该方法可以去除游离水和乳化水。 4、聚结过滤。采用亲水纤维破坏油水之间的结合力,使水聚结而与油分离;该方法可以去除游离水和乳化水。 5、真空加热脱水。利用水的汽化温度比油低的原理,将油放在密闭容器中加热并抽真空,使油中水汽化而被抽走。该方法可以去除游离水、乳化水和溶解水。查看更多
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合成的东西,上了硅胶柱就分不开了,这是为什么? 高效板的硅胶目数和你硅胶柱的硅胶目数不一样,当然分离效果就不一样,根本原因就在于理论塔板数不一样嘛。你起码应该保证薄层板的硅胶和硅胶柱的硅胶是一样的,才能保证薄层板的条件适用于硅胶柱。 查看更多
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做泛素化降解时,泛素抗体用的哪种? 你杂A蛋白了吗,会不会没拖下来 我们用的是santa的anti-ubiquitin,效果还比较稳定,大小是8.5KD样子,wb显出来的是和目的蛋白得结合体,会大些; 查看更多
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抗体药物还要做哪些表征分析? 补充下:电泳图、游离巯基比例,氨基酸组成分析(不同于序列覆盖分析),C末端序列分析,高级结构分析(CD、NMR),热稳定分析(DSC)。查看更多
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溶液中含有胺及其可能存在的相应的盐酸盐以及小部分的水,请问怎样鉴别其中是否有有机胺盐酸盐? 做NMR和LCMS基本上都能确定是否含有铵盐,如果产物不溶于水,水洗,干燥,真空浓缩,称重。查看更多
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一个简单的酰化却令我费解的问题? 很有可能是氯化亚砜没有蒸干净 查看更多
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用MEGA 4.0作进化树如何修改字体? 转到ppt后,取消组合,然后会成为一个个的单元框,可以修改字体。修改好后组合到一起,保存为tif格式,分辨率应该可以。 查看更多
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自身对照这种有关物质的检测限该怎么做? 既然杂质的检测方法适用的是自身对照法。请不要忘记自身对照法的前提:把杂志的响应因子近似等于主成份的响应因子。因此,实际上是把杂质当成你的主成份来计算了。有关物质的方法学验证属于杂志的限度检测。方法学验证必须做检测限,《指导原则》上写得非常清楚,请参阅。另外,如果未知杂质和主成份响应因子差别较大,就不能选择主成份的自身对照法来检测了。另外,请参考《杂质研究技术指导原则》中有关物质的定义。即:有机杂质包括工艺中引入的杂质和降解产物等,可能是已知的或未知的、挥发性的或不挥发性的。由于这类杂质的化学结构一般与活性成分类似或具渊源关系,故通常又可称之为有关物质。由于化学结构类似,因此响应因子也类似,所以一般采用主成分的自身对照法。 查看更多
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过氧化氢凋亡是否不应加入血清? ROS主要是直接作用于线粒体。fasL和trail都是非常上游的信号。而且并不是在所有的细胞里这两个东西都会诱导线粒体凋亡通路,有所谓的type I和type II细胞。虽然都是cell death 但ROS和他们的联系并不是非常紧密。 不过也许它们是你研究所特别关心的指标。还是取决于你想说明什么问题。 查看更多
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跑板时老是有两个前沿,这是为什么?如何解决? 可能的原因:前一前沿是硅胶中的弱极性物质。为防止此前沿干扰其他物质,可在薄层展开前,先用甲醇或甲醇:氯仿(1;1)将未点样的薄层板展开,这样,前沿就能被推至板子的最前端,从而减少其对接下来展开的影响。查看更多
浆料牙膏状解决办法? 测量固含量、粘度、细度等参数,收集数据,需要优化匀浆参数查看更多
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吸附动力学层析柱选择? 我要使用干法装柱,填料是活性炭 查看更多
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特种设备生产单位许可规则征求意见稿中的疑问? 制造单位无需再单独取设计证,只要满足条件便可设计本单位的压力容器,只是需要满足什么条件不明确,但有 ... 我的理解是制造单位不对外接设计项目,不需要取设计许可,自己制造的自己设计就行。但是如果对外设计,需要满足10个设计人员的条件。 查看更多
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成人脂肪干细胞原代的培养时碰到了问题,镜下可见呈圆形或长条形,细胞未增殖,未呈梭形变化,也未成片? 个人看法,仅供参考: 1、确定您发的照片是细胞贴壁的层面呢,怎么感觉有点象培养瓶(板)上面的水汽呢? 2、如果不是1,您可以尝试下:多收集些组织,组织块不要剪太小,不要过滤网,不要离心,可以先种在6孔板内(而不是培养瓶),三天首次换液等等。查看更多
简介
职业:国峰清源生物能源有限公司 - 化工主管
学校:湖南科技大学 - 化学化工学院
地区:山东省
个人简介:无聊就是无话可说,也无事可做!寂寞就是无聊时,耳朵塞着耳机……发呆!查看更多
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