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生物医学工程
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如何解决IPTG诱导表达的问题?
两点,你的宿主菌是不是能够用来诱导表达;OD值其实可以达到0.9左右再诱导,这样可以保证菌的量(一般加了IPTG,菌就不长了),当然有些情况是蛋白本身的问题,不如不稳定,有毒或者是膜蛋白。这样的话你就必须考虑表达一些truncation的或者是换一套表达系统
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生物医学工程
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大鼠膝关节软骨细胞原代培养污染怎么解决?
大鼠软骨细胞提取不需要去毛。我们的做法是:1. 大鼠颈椎脱臼处死后用75%酒精浸泡10-15min;2. 打开大鼠皮肤,股骨、髂骨及周围软组织一起取下髋关节(注意不能把髋关节的关节囊弄破,前两步无需进入超净台);3. 取下的组织用活力碘浸泡,带入超净台;4. 打开用一次性换药碗或者护理包,将无菌巾铺在超净台里,投入无菌器具;5. 无菌打开关节囊,止血钳夹下股骨头软骨帽,无菌盐水清洗后置于无菌安培瓶;6. 眼科剪剪碎软骨(蹦出来的软骨直接丢弃,别再放回,超净台并不干净);7. 10倍体积以上的0.5%2型胶原酶(一定要用除菌滤器过滤)消化6-12h,离心即可获得细胞,如有组织块,并不影响细胞培养,组织块里面也会爬出细胞的。滑膜的提取相对麻烦一点,主要是在膝关节提取。同样的方法获得完整的膝关节后,剔除关节囊周围的肌肉等组织,但千万别打开关节囊,中指、食指及拇指固定膝关节呈90度或者更大度数,止血钳夹紧股四头肌肌腱,用力向下翻开髌骨,会看到关节内有一层薄薄的膜样物质,拿就是滑膜,眼科剪剪取即可,未确保所取得的滑膜细胞的纯度,不建议多取周围的软组织。取得滑膜后0.25%2型胶原酶消化6小时即可收获细胞。培养方法同软骨。
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化学学科
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孪晶的拆分?
你有没有原始数据?
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生物医学工程
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工艺技术
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每次加完MTT后放置4个小时,总是在96孔板底部看到蓝紫色的沉淀,这就是MTT反应生成的甲臢吗?
药物处理细胞后加入dmso能从肉眼就能看出颜色有差异而OD值没有明显差异,还有会出现很大的值。可能mtt反应生成的甲臢没有溶解完全,放摇床上可以摇个10分钟。还有就是96孔板里有气泡也会造成od值的显著偏大。加dmso时注意避免产生气泡
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#96孔板
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化药
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化学学科
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油水分配系数LogP数值怎么界定为脂溶性或水溶性?
脂溶性是药物化学中小分子的重要参数, 通常用 log P 与 log D 进行表示. log P 为化合物油水分配系数 P 的对数值, 指未解离的分子在油相与水相的分配平衡. logP 值与化合物的水溶性、透膜性、体内 ADME 过程以及化合物与受体的亲和力均存在密切的关系, 在化合物透过生物膜的过程中具有关键作用. 而当考虑到不同 pH 条件下化合物的存在状态不同, 引入了 log D 来描述所有存在形式的化合物(离子与分子形式)在油相与水相的分配平衡. 口服药物通过被动扩散渗透时,logP 0-3范围是最佳,高logP化合物水溶性差,低logP化合物脂渗透性差。绝对多少的药物都含有离子化基团,大部分呈碱性,药物工作者可以通过修饰药物分子中的酸碱基团来获得理想的pKa,从而影响药物的溶解性与渗透性,pH=pKa时,离子组分与中性分子浓度相等。对于酸性化合物:溶液PH下降,药物中性分子浓度升高,离子组分浓度减小。对于碱性化合物:溶液PH下降,药物中性分子浓度减小,离子组分浓度增大,离子化的组分溶解性好,但渗透性差,高渗透性的化合物通常溶解性低。碱性化合物比酸性化合物更易于透过血脑屏障。
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#水溶性
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生物医学工程
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细胞线粒体,ER染色方法用什么?
线粒体可以用invitrogen公司的CMXROS染料
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生物医学工程
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求教ES转染小RNA?
你的小RNA是siRNA还是shRNA。我就做过shRNA的转染,而且shRNA的载体是普通的载体,不是病毒的。我就用lipofectamine2000,跟普通的ES细胞转染一样。铺不铺feeder都可以,看自己实验习惯,只要对照组和实验组一致就好了。要是siRNA转染的话,自己找paper看一下吧,应该有很多的。
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生物医学工程
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ABAQUS里如何在管片外施加法向压力函数?
建立局部坐标系,在你定义载荷得这个对话框中上右边,在有一个场变量函数的下拉菜单,然后按照你的坐标系输入函数。所以你定义坐标系得特别注意,而且需要加载的区域最好分块出来。
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化学学科
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工艺技术
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同一个反应有以下两种不同的实验方法有什么优缺点?
从能量角度来说,还是室温搅拌方便,从时间成本来说,那就加热回流了
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化药
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磷酸盐浓度与主峰出峰时间的关系是怎么样的?
如果想要出峰慢一点,就降低有机相的比例。一般有机相含量越高,洗脱能力越强,出峰就早了。
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化药
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冻干复溶澄清度,正置的澄清度合格,倒置澄清度不合格,为什么?
这基本确定就是胶塞的原因。即然用了复膜胶塞也是这种情况,请检查一下你的胶塞清洗机,需要彻底清理一下系统中的硅油了。注意调下PH值是否有改观。其他暂时没有好办法。
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生物医学工程
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WB如何把内参调平啊?
提好蛋白后,都会先去测浓度,然后再去loading ,变性。最后根据每孔上样量(质量)一致,去计算上样所需体积。这样跑出的结果,内参理论就会一致。
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生物医学工程
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图片如何改变其纵坐标和横坐标,要求坐标刻度都朝内?
EXCEL一般是做不出这种图的,最后是重新作图,ps做出的效果肯定不好
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工艺技术
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想请问一下,一种生物酶单胺氧化酶A是不是很贵?不好买到?
生物酶一般都很贵,可以通过查论文里的supporting information里有没有对应酶的生产厂家或品牌。
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化学学科
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工艺技术
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蒸馏达不到蒸汽温度怎么办?
气温低,蒸馏时蒸汽无法进入直形冷凝管达到冷凝效果,反而直接回流进烧瓶中。加温过高又会碳化,请问我要怎么保温啊? 蒸馏瓶不要太大,液体是瓶子体积的三分之一到二分之一左右,这样可以减少回流。
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化学学科
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求助大神帮忙解析一下晶体的结构,粗略的就可以,只想要一些晶体的键长以键角?
可以画出配体结构吗 解析出来属于咪唑羧酸的混合配体
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仪器设备
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高压设备不锈钢螺柱计算问题?
必须按照化工设备设计规范执行,必须使用超高强度的螺栓和螺母(双螺母)! 客户要求不锈钢螺柱,怎么办
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介电铁电测试?
您好,介电,铁电我们都可以测试的,欢迎前来测试交流!
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关于装置区是否需要监控摄像头?
建议引用GB50160关于火灾报警系统的要求:8.12.3 第五条:重要的火灾报警点应同时设置电视监控系统。
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化学学科
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tlc原点的物质怎么纯化?
极性大的化合物可以过反相柱,或者送制备色谱
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简介
职业:江西恩凯金属科技有限公司 - 销售
学校:衡阳师范学院 - 化学与材料科学系
地区:安徽省
个人简介:
爱情原如树叶一样,在人忽视里绿了,在忍耐里露出蓓蕾。
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