emsa实验中样品堆积在上样孔跑不下去，怎么办?楼主遇到的情况我在过去碰到过n次，结合物不进胶，可能是蛋白浓度过高，也可能是电泳buffer pH不合适，需做梯度。带型不好可以考虑：一，延长预电泳时间至电流恒定；二，用TGE而不是TBE电泳buffer；三，低温下电泳。甲X的问题应该不是问题，我们实验室做蛋白，miRNA之类的全部用的是同一瓶甲X，感觉里面的脏东西也不少，似乎不影响，还有，不知道楼主用的多大浓度的胶，胶里面是否加过甘油？binding的core sequence是否真的没有错误？我曾经把序列搞错过，时有时无白做了一个月。多做几次，多换几种bufferTGE buffer(pH 8.3) : 12.5 mM Tris, 95 mM glycin，0.5 mM EDTATGE buffer(pH 9.0): 12.5 mM Tris, 95 mM glycin，0.5 mM EDTATBE buffer: 0.25~0.5xTBETAE buffer: 0.25~0.5xTAE这个东西比较麻烦，因为每次用同位素受辐射相当厉害，但楼主一定要有耐心，最后肯定能做出来的查看更多
第1天
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