基因的5‘非翻译区是否含有低氧转录因子的结合位点?你可以先低氧处理细胞,用real time PCR或Western检测你的基因是否上调。如果真的上调,接下来再做荧光素酶分析,如果分析有变化,再做点突变,或EMSA,ChIP等。如果real time PCR或Western没有变化,就没有必要接着往下做了,因为有些时候,荧光素酶分析有变化,real time PCR或Western不一定有变化。荧光素酶分析不完全等同于体内,毕竟是克隆出来的载体,一些染色体调控,如组蛋白等的调控,不同于体内。单单一个荧光素酶分析说明不了问题。查看更多
免疫共沉淀中 ip必须要是tag的抗体吗?可不可以直接就是用目的蛋白的抗体?1.完全可以。需要用什么样的抗体,是taq抗体,还是常规的抗体,取决于实验设计。2.简单的说:是的,没有选择性。Protein A/G contains four Fc binding domains from Protein A and two from Protein G,此外,还有单独的proteinA和proteinG,我对此不是很熟悉,印象中proteinA和proteinG对不同种属的抗体好像结合力是不一样。查看更多