无淀粉改良罗氏培养基的应用及研究进展？ 背景 [1-3] 无淀粉改良罗氏培养基是一种用于结核杆菌分离鉴定的培养基。它由新鲜鸡蛋液、谷氨酸钠、甘油、孔雀石绿、磷酸二氢钾、硫酸镁和柠檬酸镁等组成。 分枝杆菌等痰液细菌在人工培养时，需要充足的营养成分。谷氨酸钠提供氮源，鸡卵液是良好的营养物质，同时还能降低脂肪酸的毒性。甘油和枸橼酸盐提供碳源，而钾、镁、磷、硫等无机盐是细菌生长所需的元素。磷酸盐具有缓冲作用。因此，无淀粉改良罗氏培养基为分枝杆菌提供了良好的生长环境。结核分枝杆菌是细长略带弯曲的杆菌，大小约为1～4X0.4μm。分枝杆菌则较为粗短。分枝杆菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的60%，其中有大量的分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面，这会影响染料的穿透。一般使用齐尼抗酸染色法来染色分枝杆菌，经过5%石炭酸复红加温染色后，分枝杆菌会染上颜色，而用3%盐酸乙醇则不容易脱色。如果再使用美蓝复染，分枝杆菌呈红色，而其他细菌和背景物质呈蓝色。该菌没有芽孢和鞭毛。结核分枝杆菌最适生长温度为37℃，低于30℃时无法生长。由于结核分枝杆菌细胞壁脂质含量较高，影响了营养物质的吸收，因此生长速度较慢。在一般培养基中，每分裂1代需时18～24小时，而在营养丰富的情况下，只需5小时。 应用 [4][5] 无淀粉改良罗氏培养基是一种固体培养基，被广泛应用于临床，用于培养结核分枝杆菌。它具有制作简便、价格低廉、便于观察菌落形态等特点。由于添加了孔雀绿等抑制普通细菌生长的物质，罗氏培养基上很少有普通细菌生长的报道。目前，对无淀粉改良罗氏培养基的进一步改良研究正在进行中。 参考文献 [1]A selective oleic acid albumin agar medium for tubercule bacilli.Mitchison,D.A.,B.W Allen,L.Carrol,J.M.Dickinson,V.R.Aber.J.Med.Microbiol.1972 [2]Diagnostic Methods in Tuberculosis.Ⅱ.Demonstration of M.tuberculosis by Culture.Cummings,M.M.Am.J.Clin.Path.1951 [3][Experience of disappearance of colonies,grown on Ogawa‘s 3%KH2PO4-egg yolk medium,which resemble colonies of Mycobacterium tuberculosis.].TOMITA T.Kekkaku.1958 [4][Experience of disappearance of colonies,grown on Ogawa‘s 3%KH2PO4-egg yolk medium,which resemble colonies of Mycobacterium tuberculosis.].TOMITA T.Kekkaku.1958 [5]于滨.对罗氏培养基进一步改良的初步研究[D].大连医科大学,2008. 查看更多
如何制备9-芴酮-4-甲酸? 9-芴酮-4-甲酸是一种常用的医药合成中间体，可以通过二苯甲酸在浓硫酸的作用下进行环合反应制备。 制备方法 方法一： 将40.0克（165mmol）的二苯甲酸和80毫升浓硫酸（96％；密度为1.84克/毫升）加热搅拌30分钟，温度保持在110-115℃。在5-10分钟内，二苯甲酸会完全溶解，得到深红色溶液。将混合物冷却至室温后倒入400毫升冰水中，滤出黄色沉淀物，并用水洗涤至pH值为7。最后将产物干燥，得到纯度为99.5％的9-芴酮-4-甲酸，产率为36.85克。可以用乙酸进行重结晶，产率为33.05克，纯度为89.3％，呈黄色针状晶体，熔点为222-224℃。 HNMR（400MHz，DMSO-d6）：δ13.68（1H，bs，COOH），8.25（1H，bd，J=7.7Hz），7.97-7.93（1H，m），7.82-7.76（1H，m），7.69-7.59（2H，m），7.51-7.40（2H，m）。 13HNMR（100MHz，DMSO-d6）：δ192.66，168.46，143.06，142.67，136.51，135.91，135.00，134.09，130.49，129.82，128.73，127.05，126.18，124.30。 方法二： 将70克（0.289M）的联苯甲酸加入200毫升浓硫酸中。将混合物加热至140℃，保持20分钟，然后冷却并倒入2升冰水中，形成悬浮液。过滤混合物并用水洗涤，然后在50℃下进行真空干燥，得到56克浅黄色固体的9-芴酮-4-甲酸。 HNMR（400MHz，DMSO-d6）δ：7.45（2H，m），7.65（2H，q），7.8（1H，d），7.95（1H，d），8.25（1H，d）。 参考文献 [1] Pavelyev V G , Parashchuk O D , Krompiec M , et al. Charge Transfer Dynamics in Donor–Acceptor Complexes between a Conjugated Polymer and Fluorene Acceptors[J]. Journal of Physical Chemistry C, 2016, 118(51):30291-30301. [2] WO2005100345 查看更多
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