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生物医学工程

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为什么PKPM中所有板的导荷方式都是双向板? 可以改变下导荷方式。一般而言双向板配筋经济些，但一般长短边之比大于3，按单向板进行配筋计算，另外一个方向配构造分布钢筋。配筋怎么配主要依据力往哪个方向传递的多，钢筋要用在刀刃上。查看更多

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化学学科

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工艺技术

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EDC/NHS形成酰胺键的反应条件是什么? 我没做过这种大分子的缩合反应，只是说些看法。你投了EDC是酸性环境，体系中有酸根，如果不中和的化会使得羧基氧的质子化，影响反应平衡——其反应机理中应该是有可逆的步骤，反应无法向产物方向进行。所以你的TEA一定要比EDC的投料量多至少1eq才可以。尤其是你还用了超大比例的EDC，就更是如此了。这是机理方面的讨论。我简单看了一下这种大分子的缩合反应，好像是高pH活性酯unstable，你只说了维持pH值，可能随着反应进行可能不够，或者你反应中检测一下pH的变化，可能能获得些线索。其实你应该先不加amine，羧基底物+EDC/sulfo-NHS，调节pH，这是活化，然后加amine才是正确的步骤，期间检测pH，不小于7。查看更多

#酰胺键

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生物医学工程

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工艺技术

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MIL-101的合成及提纯问题，结果与文献中不符是怎么回事? 你这个看样子是氢氟酸加多了。查看更多

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生物医学工程

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为什么筛个稳转株这么难？我做过pEGFP-IRES2的稳转 MCF-7和231细胞，还是能做出稳转单克隆的但效率比较差，因为很多细胞对G418都有抗性，所以G418筛出的最后绝大多数是假阳性，但有荧光嘛还好说，你说能有40-50%的效率不知道用的是什么细胞ps：G418筛选稳转基本可以淘汰了查看更多

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生物医学工程

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microRNA后带有星号和不带有星号的区别大吗? 关于microRNA的命名规则： (1)miRNA 简写成miR，再根据其被克隆的先后顺序加上阿拉伯数字，如miR-21； (2)高度同源的miRNA 在数字后加上英文小写字母(a、b 、c)，如miR-199a 和miR-199b；(3)由不同染色体上的DNA序列转录加工而成的具有相同成熟体序列的miRNA，则在后面加上阿拉伯数字以区分, 如miR-199a-1 和miR-199a-2； (4)如果一个前体的2 个臂分别加工产生miRNA，则根据克隆实验，在表达水平较低的miRNA 后面加“*”，如miR-199a和miR-199a*，或进行如下命名，miR-142-5p(也可命名为miR-142-s，表示从5' 端的臂加工而来)和miR-142-3p(也可命名为miR-142-as，表示从3′端的臂加工而来)；(5)将物种缩写置于miRNA 之前，如hsa-miR-195 ；(6)确定命名规则之前发现的miRNA，如let-7，则保留原来名字。查看更多

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生物医学工程

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关于HSP27 未见表达，为什么? 我做Hsp27有一年多了，主要研究p-Hsp27在signal pathway中的作用，以我的经验：1）这样的电泳条件，Hsp27是跑不出去的。2）我的电泳条件：12％SDS－PAGE，130V 2－2.5h; Bio-Rad 湿转 300mA 1.5h.3) 我不知道血管平滑肌细胞中内源本底的Hsp27 level，如果一定是要热激后才能诱生的话，建议热激后继续培养1－2h。4）如果是鼠源细胞， ALEXIS公司的抗体是杂不出信号的。5）可能的话，拿HeLa细胞裂解物做个Postive control （丰度非常高）。查看更多

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生物医学工程

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RAW264.7细胞用的是DMEM高糖培养基，培养的细胞不是很好，是培养基的问题吗? RAW264.7细胞为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞培养基:1640+10%FBS 消化条件: 预冷PBS浸泡5－10Min 细胞正常形态为圆形,贴壁生长,生长速度较快,细胞难消化,消化时用预冷的PBS淋洗,然后浸泡5min,让后用枪轻轻吹起吹散收集离心,这个过程很关键,如果没有消化到位就吹打或消化过久,细胞次日贴壁就会分化,分化之后的形态是细胞两端长出尖尖的触角,细胞不再圆形贴壁,而是平铺向四周扩散生长。所以你换培养基试试看，我养的挺好的！查看更多

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说・吧

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工作求指点？ 感觉待遇有点低，不过真的想一直在化工行业，做定制合成经手结构再多了解应用，我想后面做不久自己的思路就出来了查看更多

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生物医学工程

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持力层不同，基础应该怎么选取? 层高1~3F，可开挖至粉质粘土，然后换填垫层处理，进入强风化的部分可通过换填一定的厚度进行强度弱化处理，满足沉降差要求。查看更多

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化药

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关于中国药典蛋白类药品的疑问？ 关于纯度，需要深入分析。生物制品除了工艺杂质和降解杂质，还有各种有活性的异构体，并不能简单说成杂质。查看更多

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化药

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化学学科

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工艺技术

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准备用三氟化硼乙腈络合物作催化剂合成头孢？我做过7－TMCA，用三氟化硼乙醚作催化剂，楼上说的对，三氟化硼易挥发，反应过程中极易损失掉，使催化作用减弱。要求无水环境，滴氨水是调到等电点，析出结晶。当时我们就用的玻璃反应器，没有影响。查看更多

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化学学科

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工艺技术

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怎么能减少硅胶柱对产品的吸附? 最好的方法是不过柱。产品投产时最好不用过柱。查看更多

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生物医学工程

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NF-KB p65存在不存在磷酸化? 1、NF-KB p65存在不存在磷酸化？如果不存在磷酸化为什么抗体公司用磷酸化抗体？磷酸化后才有活性，然后和p50解离，进入细胞核内，启动下游转录。2、一些国外的文献NF-KB p65活性测定采用的是普通的抗体，也有文献采用的是磷酸化的抗体，所以很不理解。园子的朋友说p65活化后入核，所以测核内普通的NF-KB p65活性与测总的NF-KB p65活性意义是一样的，我想知道是不是这样？不是，测量激活更有意义。3、对于NF-KB p65活性测定，用p-p65抗体时，组织蛋白提取能不能用全蛋白提取试剂盒？还是必须用包浆蛋白或者核蛋白提取试剂盒？一般测量核内的，所以采用核蛋白提取试剂盒4、对于NF-KB p65活性测定时，内参应该选用actin还是GAPDH？如果用GAPDH做内参影响大吗？应该都可以，用actin的较多查看更多

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生物医学工程

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这两个蛋白的定位在什么细胞器上 ? DAPI染核效果不错，有阴影是正常的，没有染出完全均一的蓝色。你用DAPI和GFP搭配确定能染到你所研究的蛋白吗？上面那个图绿色荧光太亮了，已经铺满细胞看不出细胞器定位，不妨降低下浓度试试。如果需要证明确实是细胞器定位的话得用细胞器特异性的荧光染料，可能需要三重染料复染，GFP染细胞骨架不合适。DAPI染的是DNA，Protein2能看到是核定位，这个可以作为实验证据使用，上面那组不行。。查看更多

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生物医学工程

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把A、B两个基因通过重叠pcr的方法连接起来，A与B基因的模板量加多少啊? 加多加少都无所谓的，但是最好两个片段等摩尔即等分子数查看更多

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生物医学工程

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319求调剂？ 这个分很容易调剂的。不要怕。查看更多

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生物医学工程

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1-乙烯基咪唑类离子液体聚合的研究有什么办法? 可能是聚合度太低,对于微溶体系,聚合物很容易沉淀出来.对于可溶体系, 低聚物溶在溶剂里没有析出查看更多

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生物医学工程

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土层物理指标与力学指标有哪些联系? 确定地基承载力的方法。地基承载力的确定目前常用的方法有理论计算，现场原位测试以及承载力经验数据表等三大类方法。查看更多

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生物医学工程

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有没有测过斑马鱼血液中性激素之类的指标? 我都是用毛细管断尾取血，每次只能取到几微升，然后用洗耳球吹进事先加入一定比例PBS缓冲盐溶液里面，相当于稀释了好几倍，有好的方法我也想借鉴啊！查看更多

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生物医学工程

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围岩稳定性与围岩块体稳定性有什么区别呢? 其实，从字面上就能看出二者有所不同，但也存在对象一致的可能情况。查看更多

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简介

职业：浙江中欣氟材股份有限公司 - 销售

学校：云南民族大学 - 化学与生物技术学院

地区：江苏省

个人简介：手握冰淇淋，吃着棒棒糖，哼着小曲调，坐着摩天轮查看更多

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