氯甲酸异丁酯是一种有机化工原料，常用于抗乙肝药物YlOl-Y的生产。为了确保药物的药效，需要对氯甲酸异丁酯进行质量控制。目前尚未有采用毛细管气相色谱和酸碱滴定法进行质量控制的报道。本发明提供了一种氯甲酸异丁酯的质量检测方法。
该方法采用气相色谱内标法进行氯甲酸异丁酯的含量测定。具体步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
②溶液的制备：
制备正辛烷内标储备液：取正辛烷，以三氯甲烷配制成浓度为1-2mg/ml的溶液。
制备标准溶液：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为3.0-7.0mg/ml的溶液。精密量取此溶液0.5-1.0ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液0.5-2ml，用三甲烷定容，摇匀。
制备供试品溶液：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为3.0-5.0mg/ml的溶液。分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀。
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进行进样分析，按内标法以峰面积计算含量。
在处理氯甲酸异丁酯时，禁止使用水。可以使用干粉、二氧化碳或抗溶性泡沫进行灭火。如果发生火灾，应喷雾状水冷却料桶等物品，但禁止直接与水接触。
肉苁蓉是一种植物，具有肉质茎和鳞叶，被称为"沙漠人参"，主要用于治疗男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等症状。近年来的研究发现，肉苁蓉对神经退行性疾病有防治作用，并且可以调节尼古丁受体蛋白质的表达水平，其中异麦角甾苷是主要活性成分之一。
1、异麦角甾苷粗提物的制备
取肉苁蓉粗粉进行水提取，将提取液浓缩至一定密度后加入乙醇，沉淀后收集上清液。
2、异麦角甾苷对照品的制备纯化
将正丁醇萃取物进行柱层析分离，得到异麦角甾苷粗提物，经过进一步的制备得到纯化的异麦角甾苷。
3、纯度分析
通过薄层色谱分析和面积归一化法对异麦角甾苷进行纯度分析，结果显示异麦角甾苷的纯度符合要求。
4、结构鉴定
通过ESI-MS和NMR等技术对异麦角甾苷的结构进行鉴定。
车前子提取物是由车前子经过乙醇水溶液回流提取得到的，其中含有麦角甾苷、异麦角甾苷等成分。该提取物可用于制备治疗糖尿病药物。
[1]白雪,郝小燕.肉苁蓉中异麦角甾苷标准品的制备及含量测定[J].中国药业,2013,22(09):19-20.
[2] CN201110172511.8 一种车前子提取物及其应用
深入了解雷诺嗪杂质的来源和检测方法，可以帮助我们更好地理解其对药物品质和患者健康的影响，并采取相应的控制措施来确保药物的纯度和可靠性。
背景：药物开发过程中杂质的规范研究是重要的一个环节，将产品中的杂质控制在一个安全合理的限度范围之内，是药物质量研究中的一项重要工作，同时质量标准的建立需要一定量的标准品。
1. 一种雷诺嗪中间体杂质的制备方法
专利 CN 114315632 A提供了一种雷诺嗪中间体杂质及其制备方法，该发明提供的方法采用N-(2,6-二甲基苯基)氯乙酰胺和2,6-二甲基苯胺为原料，在碱性和催化剂作用下，即可获得具有式Ⅰ结构的雷诺嗪中间体杂质。该方法简单，目标产物收率高，且纯度高，可用于雷诺嗪工艺研发、生产、质量标准建立、质量控制环节，为雷诺嗪的用药安全性提供技术支持。实验结果表明：该发明提供的方法所制得的雷诺嗪中间体杂质纯度最高达99.23％，收率最高达54.36％，产品纯度较高，产量充足，可满足分析日常所需的方法建立和杂质控制。
2. 一种雷诺嗪缓释片及检测方法
CN100581547C公开了一种雷诺嗪缓释片及检测方法，属于药物分析领域。取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量，置50mL量瓶中，加流动相超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，另取雷诺嗪对照品适量，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含80μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。色谱条件及系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-醋酸溶液＝25:35:40为流动相，用氨水调节pH至6.6，检测波长为230nm。
3. 一种立达霉有关物质的测定方法
CN107144644A公开了一种立达霉有关物质的测定方法，所述的测定方法包括：(1)专属性试验，(2)稳定性试验，(3)最大的有关物质测定。所述的测定方法为运用HPLC测定2,6-二甲苯胺，色谱柱为C18柱，流动相为乙腈:磷酸水＝40:60，检测波长包括225nm，检测温度为30℃，流速为1.25mL/min，进样量为10μL。
4. 一种雷诺嗪中毒性杂质的检测方法
根据人类药品注册技术要求国际协调会议(ICH)M7(R1)的规定，具有基因毒性警示结构的杂质，如果没有进行细菌诱变试验证明其无基因毒性，即为潜在毒性杂质，人在长期用药时，其每日摄入量不能超过1.5μg。雷诺嗪原料药的一个关键工艺中间体的起始物料之一2,6-二甲苯胺，在世界卫生组织国际癌症研究机构致癌物列表中，属于2B类致癌物。而雷诺嗪临床给药最大剂量为2000mg，所以雷诺嗪原料及缓释片中该杂质的最大限度为0.75ppm。
专利CN 113820426 A提供一种雷诺嗪中毒性杂质的检测方法。所述雷诺嗪中毒性杂质的检测方法包括以下步骤：(1)分别配制雷诺嗪的供试品溶液和2,6-二甲苯胺的对照品溶液；(2)将步骤(1)得到的雷诺嗪的供试品溶液和2,6-二甲苯胺的对照品溶液分别注入高效液相色谱-串联质谱仪进行检测，并采用外标法计算雷诺嗪供试品中2,6-二甲苯胺的含量。本发明所述雷诺嗪中毒性杂质的检测方法具有专属性强，分析快速，抗干扰性强以及灵敏度高等优点。
参考文献：
[1] 南通联亚药业有限公司. 一种雷诺嗪中毒性杂质的检测方法:CN202111174721.0[P]. 2021-12-21.
[2] 海南鑫开源医药科技有限公司. 一种雷诺嗪中间体杂质的制备方法:CN202110006857.4[P]. 2022-04-12.
人淋巴细胞因子ELISA KIT是一种通过双抗体夹心法酶联免疫吸附实验来特异性检测样品中人淋巴细胞因子含量的方法。
实验原理是在微孔酶标板中加入已知浓度的标准品和未知浓度的样品，然后加入生物素标记的抗体和亲和素标记的HRP。经过温育、洗涤和底物作用后，产生颜色，颜色的深浅与样品中的浓度成比例关系。
该方法可以用于测定帕金森病（PD）患者和健康对照者血清中IL-6和IL-10的水平，并分析其与PD情绪、认知功能和病情严重程度之间的相关性。
研究方法是使用ELISA双抗体夹心法测定PD组患者和健康对照组外周血血清中IL-6和IL-10的水平，并进行相关量表评估。结果显示，PD组外周血中IL-6和IL-10水平较对照组高，并与焦虑发生率呈正相关。但与PD病情严重程度、认知功能和抑郁情绪的相关性分析结果无统计学意义。
1、加样：在酶标板上设空白孔、标准孔和待测样品孔，分别加入准确的标准品和待测样品。
2、温育：封板后置于37℃温育30分钟。
3、配液：将浓缩洗涤液稀释后备用。
4、洗涤：揭掉封板膜，加入洗涤液，重复洗涤步骤。
5、加酶：加入酶标试剂，除空白孔外。
6、显色：加入显色剂A和显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。
7、终止：加入终止液，终止反应。
8、测定：以空白为零，使用450nm波长测量各孔的吸光度（OD值）。
[1] Gastrointestinal Dysfunctions Are Associated with IL-10 Variants in Parkinson's Disease[J]. Li Shu, Dongxiao Liang, Hongxu Pan, Qian Xu, Xinxiang Yan, Beisha Tang, Qiying Sun, Jan Aasly. Parkinson's Disease. 2018.
[2] Association of Parkinson's disease-related pain with plasma interleukin-1, interleukin-6, interleukin-10, and tumour necrosis factor-α[J]. Donghui Li, Xiangsheng Song, Huayun Huang, Huadong Huang, Zanya Ye. Neuroscience Letters. 2018.
[3] Peripheral inflammation in prodromal Alzheimer's and Lewy body dementias[J]. Eleanor King, John Tiernan O'Brien, Paul Donaghy, Christopher Morris, Nicola Barnett, Kirsty Olsen, Carmen Martin-Ruiz, John-Paul Taylor, Alan J Thomas. Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry. 2018.
[4] Cytokine profiling in the prefrontal cortex of Parkinson's Disease and Multiple System Atrophy patients[J]. Rasmus Rydbirk, Betina Elfving, Mille Dahl Andersen, Mia Aggergaard Langb?l, Jonas Folke, Kristian Winge, Bente Pakkenberg, Tomasz Brudek, Susana Aznar. Neurobiology of Disease. 2017.
[5] 董闽慧.淋巴细胞因子IL-6、IL-10与帕金森病的相关性分析[D].新疆医科大学,2020.
气相色谱法是一种常用的分析技术，可以有效地分离和检测化合物。本文旨在探讨如何运用气相色谱法对莠灭净进行分析。
简述：莠灭净（Ametryn）化学名称为2- 乙氨基 -4- 异丙氨基 -6-甲硫基 -1,3,5- 三嗪，原药为白色粉末。莠灭净属选择性内吸传导型除草剂，是典型的光合作用抑制剂。通过对光合作用电子传递的抑制，导致叶片内亚硝基盐积累，致植物受害死亡。
气相色谱分析：
1. 报道一：
夏姗姗等人建立气相色谱内标法测定莠灭净悬浮剂有效成分含量的方法。方法为：采用气相色谱内标法，以邻苯二甲酸二戊酯为内标物，选用 SH-Rtx-5毛细管柱 ；色谱柱温度为230℃ ；FID 检测器温度为300℃ ；进样口温度为280℃ ；分流进样，分流比为50 ∶ 1，进样量为1μL。测定的具体步骤如下：
（1）内标溶液配制
准确称取内标物邻苯二甲酸二戊酯1.0g（精确至0.000 2g）于100mL 容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀，即为内标储备液。
（2）对照品溶液配制
准确称取莠灭净对照品0.075g（精确至0.000 2g）于50mL容量瓶中，用移液管准确加入5mL 内标溶液，用丙酮稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。
（3）供试品溶液配制
准确称取含莠灭净供试品0.075g（精确至0.000 2g）于50mL 容量瓶中，用移液管准确加入5mL 内标储备液，用丙酮稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。
（4）测定
按上述气相色谱条件，待仪器稳定后，连续注入数针标准溶液，直至相邻两针莠灭净峰面积与内标物峰面积之比的相对变化小于1.0% 后，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样进行分析。
结果：莠灭净在0.364 13~2.913 00mg/mL 时呈现良好的线性关系，线性相关系数为0.999 9 ；平均回收率为99.91%。该方法具有操作简便、快捷、分离效果好、精密度和准确度高等优点。
2. 报道二：
姚菊仙等人报道了莠灭净的气相色谱分析方法。该方法简单、快速、准确、实用。标准偏差为 0 .3514 ,变异系数为 0 .46% ,回收率为 99.6%～ 10 0 .1%。具体操作步骤如下：
（1）内标溶液的配制
准确称取三唑酮20g(准确至0.0002g)于1000mL容量瓶中,用三氯甲烷溶解稀释至刻度。
（2）标准溶液的配制
准确称取莠灭净标准品0.10g(准确至0.0001g),置于具塞10ml 容量瓶中,移液管移取5.0ml 内标溶液于此容量瓶中,用三氯甲烷定容至刻度,充分振摇容量瓶,使其全部溶解,静置待用。
（3）样品溶液的配制
称取含0.1g莠灭净的试样(精确至0.0001g),置于具塞10mL容量瓶中,用移液管移取5.0m1 内标液于此容量瓶中,用三氯甲烷(分析纯)定容至刻度,充分振摇,静置,取上层清液进样。
（4）测定
在上述气谱条件下,待仪器稳定后,重复注入0.3μL莠灭净标准溶液,直至相邻两针响应值之比基本稳定后,方可进行样品分析,进样顺序为标样、样品、样品、标样的顺序。
3. 报道三：
张素娣采用气相色谱法对莠灭净进行分析 ,选用 SE- 30固定液 ,上试 10 1为担体 ,制备色谱柱 ,以正十七烷为内标物。具体操作方法如下：
（1）内标溶液的配制
准确称取0.5g内标物于100ml 容量瓶中,用三氯甲烷溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。
（2）标准溶液的配制
准确称取0078g(准确至0.0002g)莠灭净标准样品于具塞小瓶中,准确加入4mL内标溶液,然后用三氯甲烷稀释至5mL,摇匀,备用。
（3）样品溶液的制备
准确称取含莠灭净0.076g(准确至0.0002g)的样品于具塞小瓶中,准确加入4mL内标溶液,然后用三氯甲烷稀释至5mL,摇匀,备用。
（4）样品的测定
在上述定性分析选定的色谱条件下,待仪器稳定后重复注入2μL莠灭净标准溶液,直至相邻两针莠灭净与内标物峰面积比的相对偏差小于0.5%后,按标准溶液,样品溶液,样品溶液,标准溶液顺序进样作气相色谱分析,样品中莠灭净含量按单点校正法进行计算。
结论：该方法的标准偏差为 0.25% ,变异系数为 0.31 % ,回收率在 98.5%～ 100.4%之间。
参考文献：
[1]夏姗姗,林壁秋,谢婷婷. 莠灭净悬浮剂的气相色谱分析 [J]. 化工设计通讯, 2019, 45 (02): 132+157.
[2]姚菊仙. 莠灭净的气相色谱分析 [J]. 云南化工, 2002, (06): 34-35.
[3]张素娣,陶敏. 莠灭净的气相色谱分析 [J]. 广西化工, 2000, (01): 42-43.
本文将介绍如何测定马来酸噻吗洛尔中的杂质，以确保产品质量和安全性，为药物分析领域提供有益信息。
简介：马来酸噻吗洛尔是一种β-肾上腺素受体阻滞剂，具有副作用小且降眼内压作用良好的特点，临床上被广泛用于青光眼以及其他高眼压症的治疗。《中国药典》2015年版马来酸噻吗洛尔原料药标准中采用薄层色谱法控制有关物质，该方法的专属性及灵敏度较差。《欧洲药典》(9.0 版)和《美国药典》(41版)马来酸噻吗洛尔原料药标准中采用高效液相色谱法(HPLC法)测定杂质B、C、D、E、F和其他杂质，但均采用了非常规的特殊规格的色谱柱。《日本药典》(17版)收载的标准中也采用HPLC法控制有关物质，但检测波长及其他色谱条件均不同于《欧洲药典》(9.0版)。
测定
1. 冀晓茹建立一种可采用常规色谱柱进行HPLC测定马来酸噻吗洛尔原料药中有关物质的方法。采用Kro masil C18 (4.6 mm×150 mm，5μm)色谱柱，以甲醇与4.32 g/L辛烷磺酸钠溶液(冰醋酸调pH至3.0)的混合溶液 (50∶50，V/V)(A)-甲醇(B)为流动相，梯度洗脱(0～27 min，95%A;27～28 min，95%A→70%A;28～45 min，70%A)，体积流量为1.0 m L/min;检测波长为295 nm;柱温为30℃;进样量20μL。马来酸噻吗洛尔与其降解产物分离良好;杂质B、C、D、E、F及马来酸噻吗洛尔线性范围分别为0.070～15.000 l，0.098～14.751，0.040～15.015， 0.070～14.925，0.060～15.105，0.151～7.530μg/m L，各物质在此范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数r均大于0.99。3批样品总杂含量分别为0.018%，0.022%，0.031%。该方法快速、准确，专属性好，可用于 马来酸噻吗洛尔原料药中有关物质的测定。
2. 专利CN 114354818 A公开了一种测定马来酸噻吗洛尔中杂质的方法。所述方法，包括以下步骤：取与待测马来酸噻吗洛尔样品同源的马来酸噻吗洛尔样品，经反应得含杂质X的破坏溶液；取待测马来酸噻吗洛尔样品，用溶剂配制成供试品溶液；取供试品溶液稀释作为对照溶液；将上述破坏溶液、供试品溶液、对照溶液分别进行液相色谱检测，从而计算出待测样品中杂质X的含量。所述方法，可定向破坏出杂质G、B、D、E、C和5，且干扰杂质小，不影响各杂质的定位，并且没有使用杂质对照品，色谱系统中剔除了离子对试剂和峰形改进剂，色谱柱损耗较小，可同时用于液相色谱和液相色谱?质谱联用检测，便于同时对杂质进行定性分析，提高了方法的经济性与普及性。
其中供试品溶液中马来酸噻吗洛尔样品的浓度为2-15mg/ml，优选为5mg/ml。 对照溶液中马来酸噻吗洛尔样品的浓度为2-15μg/ml。液相色谱检测中流动相为含0.2％-0.4％甲酸的0.01mol/L-0.05mol/L乙酸铵溶液和甲醇的混合溶液；乙酸铵溶液与甲醇溶液的体积比为45～25:55～75；检测器为紫外检测器、二极管阵列检测器或质谱检测器中的至少一种。流动相的pH值为2.9～3.1。
参考文献：
[1]冀晓茹,刘云杨,高政等.HPLC法测定马来酸噻吗洛尔原料药中有关物质[J].药物生物技术,2021,28(03):261-265.DOI:10.19526/j.cnki.1005-8915.20210308.
[2]广东省药品检验所(广东省药品质量研究所、广东省口岸药品检验所). 一种测定马来酸噻吗洛尔中杂质的方法:CN202210091380.9[P]. 2022-04-15.
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