念旧.
,实习生-操作员
2018-05-25回答
正相色谱柱和反相色谱柱的区别本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明: 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(nh2,aps)和氰基团(cn,cps)的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基(sioh)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(hexane),氯仿(chloroform),二氯甲烷(methylene chloride)等。 2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 常用的反向填料有:c18(ods)、c8(mos)、c4(butyl)、c6h5(phenyl)等。 因此c18 的柱子是不能用作正相色谱柱的。