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如何合成盐酸多奈哌齐的中间体N-苄基-4-哌啶甲醛?
4-哌啶甲酸是一种医药中间体,可以用于制备盐酸多奈哌齐的中间体N-苄基-4-哌啶甲醛。盐酸多奈哌齐是治疗阿尔兹海默症的重要药物,具有极高的市场价值。 有哪些应用领域? 应用一: N-苄基-4-哌啶甲醛作为一种关键的医药中间体,具有多种用途。其中最常见和广泛的用途是合成盐酸多奈哌齐。 一项研究报道了一种N-苄基-4-哌啶甲醛的合成方法。该方法通过酯化反应、烷基化反应、水解反应、酰化反应、脱水反应和还原反应,以4-哌啶甲酸为原料,可以在温和的条件下高收率地合成N-苄基-4-哌啶甲醛。该方法无需柱层析,后处理简单,且重复性高。 应用二: 2-((1-苄基-4-哌啶基)-羟基-甲基)-5,6-二甲氧基-1-茚酮是多奈哌齐的中间体,用于多奈哌齐杂质定位。 另一项研究公开了一种2-((1-苄基-4-哌啶基)-羟基-甲基)-5,6-二甲氧基-1-茚酮的合成方法。该方法通过甲醇、氯化亚砜、4-哌啶甲酸合成4-哌啶甲酸甲酯,然后经过苄基化反应和甲醇钠催化下的反应,最终得到目标产物。该方法能够提高产品纯度,降低生产成本。 参考文献 [1] [中国发明] CN202010452307.0 N-苄基-4-哌啶甲醛的合成方法 [2] [中国发明] CN201110387036.6 一种2-((1-苄基-4-哌啶基)-羟基-甲基)-5,6-二甲氧基-1-茚酮的合成方法
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#4-哌啶甲酸
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什么是DNA聚合酶?
在细胞复制DNA过程中,DNA聚合酶扮演着重要的角色。它以DNA为模板,从5’端开始复制DNA,一直到3’端。DNA聚合酶的主要功能是催化DNA的合成,并具有其他辅助活性。 有什么应用? 耐热DNA聚合酶在PCR技术中得到广泛应用。不同种类的耐热DNA聚合酶都具有5’-3’聚合酶活性,但不一定具有3’-5’和5’-3’的外切酶活性。其中,3’-5’外切酶活性可以消除错配并切平末端,而5’-3’外切酶活性可以消除合成障碍。 超嗜热古菌Palaeo coccus pacificus DY20341是从东太平洋洋中脊热液区分离出来的,其基因组已经测序完成。预测结果显示,该古菌基因组中有2001个开放阅读框,其中78.11%的功能尚未确定。 尽管商业化的DNA聚合酶种类繁多,但针对不同扩增目的片段所需的特异DNA聚合酶体系仍然是必要的。 本发明旨在提供一种新型DNA聚合酶。 该DNA聚合酶的氨基酸序列如序列表中的序列4所示。 本发明的另一个目标是提供一种编码DNA聚合酶的基因。 此外,本发明还提供了一种重组表达载体,其中多克隆位点插入了编码DNA聚合酶的基因。 本发明的又一个目标是提供一种含有上述重组表达载体的重组菌。 其中,所述重组菌为大肠杆菌。 该DNA聚合酶可应用于PCR技术中。 本发明的又一个目标是提供一种获得目的基因的方法,包括以下步骤: 根据目的基因的序列设计引物, 以含有目的基因的DNA片段或基因组DNA为模板,利用设计的引物和DNA聚合酶进行PCR, 分离PCR产物以获得目的基因。
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#DNA 聚合酶
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胶原蛋白的重要性及应用领域?
胶原蛋白是一种非常重要的蛋白质,主要存在于哺乳类动物的结缔组织中。它具有很强的伸张能力,是韧带和细胞外基质的主要成分。胶原蛋白在保持皮肤弹性方面起着重要作用,但随着年龄的增长,胶原蛋白的老化会导致皮肤出现皱纹。此外,胶原蛋白也是眼睛角膜的主要成分。 胶原蛋白的分布是由我们体内的不同细胞负责的。细胞使用特定的氨基酸构建长链,这些长链缠绕在一起形成了较大的胶原蛋白三螺旋。几个螺旋随后组成强壮的纤维,这些纤维提供结构组织支撑、柔韧性和承受力量的能力。 胶原蛋白在医疗领域有多种应用,包括心脏应用、整容手术、整形外科使用和伤口护理管理使用。 然而,对于口服和外用的胶原蛋白产品存在争议。口服蛋白质和多肽在消化过程中会被分解成氨基酸,而外用的胶原蛋白产品分子过大无法渗透至真皮层。目前并没有证据显示额外补充胶原蛋白对延缓衰老和除皱有特殊功效。
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#胶原蛋白
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抗体清除液(酸性)在Western Blot中的应用?
Western Blot是一种将电泳与酶免疫测定结合起来的技术,用于分析样本组分的免疫学测定方法。在Western Blot中,抗体清除液(酸性)可以用于重复利用转移蛋白的膜,方便地检测其他蛋白。与重新跑一个SDS-PAGE胶相比,抗体清除液的使用不仅省时省力,还可以消除重新上样带来的误差,提高可比性。 抗体清除液(酸性)适用于NC膜和PVDF膜上的抗体清除。经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。 使用说明: 1. 在完成Western化学发光检测后,用蒸馏水漂洗5分钟。 2. 弃掉蒸馏水,加入适量的抗体清除液(酸性),至少需将膜完全覆盖。在摇床上漂洗30-60分钟。 3. 弃掉抗体清除液,吸尽残余液体。加入TBS、TBST或PBS漂洗3-4次,每次在摇床上漂洗3-5分钟。 4. 进行后续的封闭等操作。 注意事项: 1. 如多次重复使用同一张膜5次以上,有可能会导致蛋白信号的减弱,建议膜重复使用不超过5次。 2. 使用ECL等化学发光试剂进行的Western Blot检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测,例如DAB,NBT/BCIP等,不适用于本试剂。 3. 抗体清除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。 4. 使用辣根过氧化物酶(HRP)时,任何一次封闭都应使用5%脱脂牛奶;使用碱性磷酸酯酶时,任何一次封闭都应使用酪蛋白(casein)。 抗体清除液在细胞应激反应中的作用及其机制研究 抗体清除液的应用不仅限于Western Blot,还可以用于研究细胞应激反应中的蛋白相互作用。例如,通过SILAC-蛋白组学分析和免疫共沉淀等方法,可以研究SIRT1在细胞应激反应中的作用及其机制。 SILAC-蛋白组学分析是一种利用稳定同位素标记的蛋白质进行定量的方法。通过将含有15N标记的精氨酸的培养基与普通培养基混合培养细胞,然后提取蛋白进行免疫沉淀纯化和质谱鉴定,可以筛选出与SIRT1相结合的蛋白。 免疫共沉淀是一种检测蛋白相互作用的方法。通过转染SIRT1质粒或其他相关质粒,提取蛋白后进行免疫共沉淀,可以检测SIRT1与其他蛋白的结合情况。 除了免疫共沉淀,还可以使用Western Blot和免疫荧光法来观察蛋白的表达和定位。
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乙烷的构象是怎样的?
乙烷是烷烃同系列中第二个成员,是一种含碳-碳单键的烃。它的分子式为C 2 H 6 ,结构式为CH 3 CH 3 。乙烷在某些天然气中的含量为5%~10%,并存在于石油中。 乙烷的发现历史 1834年,迈克尔·法拉第首次使用电解乙酸钾的方法制造了乙烷,但他错误地以为产物是甲烷,没有继续研究。在1847年和1849年间,阿道夫·威廉·赫尔曼·科尔贝和爱德华·弗兰克兰通过不同方法制造了乙烷,但他们也错误地以为产物是甲基自由基。 1864年,卡尔·肖莱马校正了这个错误,证明了这些反应的产物都是乙烷。 乙烷的基本性质 外观与性状:乙烷是无色无臭气体。 熔点(℃):-183.3 沸点(℃):-88.6 相对密度(水=1):0.45 相对蒸气密度(空气=1):1.04 饱和蒸气压(kPa):53.32(-99.7℃) 燃烧热(kJ/mol):1558.3 临界温度(℃):32.2 临界压力(MPa):4.87 闪点(℃):<-50 引燃温度(℃):472 爆炸上限%(V/V):16.0 爆炸下限%(V/V):3.0 溶解性:乙烷不溶于水,微溶于乙醇和丙酮,溶于苯,与四氯化碳互溶。 乙烷的交叉式构象 乙烷的C-C单键可以自由旋转,因此乙烷可以有无数种构象。乙烷的优势构象是交叉式,其中两个C原子上的H距离最远,分子内能最低,最稳定。重叠式是乙烷的另一种构象,其中两个碳原子上的各个氢原子正好处在相互对映的位置上。乙烷的构象是由于单键旋转而产生的分子中的原子或基团在空间的不同排列形式。
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#乳酸氧化酶
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如何制备杀菌剂十二烷基二甲基苄基氯化铵?
随着油田的不断开发,现有石油的储备量已步入中后期,油田的污水含量随着原油的综合含水不断的升高也在逐年增加。在油田注水系统中存在大量种类繁多的有害微生物,这些微生物对于注水采油过程当中产生很多不利的影响。加入杀菌剂可有效控制污水内有害细菌。 目前油田注水系统使用最广泛的是阳离子型杀菌剂,十二烷基二甲基苄基氯化铵便是其中一种。十二烷基二甲基苄基氯化铵具有广谱、高效的杀菌火藻能力,能有效地控制水中菌藻繁殖和粘泥生长,并具有良好的粘泥剥离作用和一定的分散、渗透作用,同时具有一定的去油、除臭能力和缓蚀作用。十二烷基二甲基苄基氯化铵毒性小,无积累性毒性,并易溶于水,并不受水硬度影响,因此广泛应用于石油、化工、电力、纺织等行业的循环冷却水系统中,用以控制循环冷却水系统菌藻滋生,对杀灭硫酸盐还原菌有特效。 制备方法 十二烷基二甲基苄基氯化铵的生产工艺基本成熟,据文献报道[1],大多数反应温度在90~95℃,作者为降低反应能耗,使操作更简便,尝试降低温度一锅法合成,经反复试验后,确定最佳反应温度为55~60℃。并对生成的十二烷基二甲基苄基氯化铵进行核磁表征、活性物含量测定以及杀菌性能测定。 图1 合成路线图 将十二烷基二甲胺21.35g、氯化苄13.23g和水42.55g加入带有搅拌器及回流装置的反应器内,控制温度55℃反应5h,最后生成44%十二烷基二甲基苄基氯化铵水溶液,为无色至浅黄色透明溶液。 结构表征 1H核磁共振波谱(1HNMR)。0.6x10 4 %的吸收峰,对应的是端甲基的氢核,该处的三重峰可以按照按照邻近氢核之间的自旋偶合使峰产生分裂的规律说明其邻位的结构为亚甲基。1.0×10 4 %对应的是十个亚甲基上20个氢的化学位移,1.5×10 4 %的两个氢对应烷基链上与NH相邻的亚甲基上的氢。 结论 杀菌剂十二烷基二甲基苄基氯化铵可以在相对较低的温度下55~60℃一锅法合成,有效的降低了反应成本;所合成的十二烷基二甲基苄基氯化铵结构正确,活性物含量合格,杀菌性能优异。 参考文献 [1] 王亚林.十二烷基二甲基苄基氯化铵合成新工艺[J]辽宁化工,1991(1),33-36.
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#十二烷基二甲基苄基氯化铵
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替加环素适用于哪些感染?
替加环素是一种甘氨酰环素类抗菌药物,是半合成四环素米诺环素的衍生物,已经在我国获得批准上市。它通过与细菌核糖体30S亚基结合,阻碍氨酰-tRNA进入核糖体A位点,从而抑制细菌蛋白质合成,发挥抗菌作用。替加环素对革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌(不包括铜绿假单胞菌及部分变形杆菌)、厌氧菌以及非典型病原体等具有广谱的抗菌活性。它的耐药机制主要是由于染色体介导的耐药结节分化家族(resistance-nodulation cell division,RND)主动外排系统的激活。 一、替加环素适用于哪些感染? ①复杂性腹腔感染、复杂性皮肤和软组织感染、社区获得性肺炎的重症患者; ②多重耐药鲍曼不动杆菌感染(不包括中枢神经系统和尿路感染); ③碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌感染(不包括中枢神经系统和尿路感染)。 二、替加环素的使用方法是什么? ①治疗广泛耐药革兰阴性菌感染不宜单药治疗; ②首剂负荷量为100 mg,维持量为50 mg q12 h。儿童剂量不讨论。 根据2010年发表于South African Medical Journal(SAMJ)的《替加环素合理使用指南》,替加环素以100 mg负荷剂量,随后50 mg,q12 h使用时,其组织分布广泛,超过其血浆容积。它的代谢过程对细胞色素P450无影响,没有临床相关的药物相互作用,药物动力学(PK)也不受肾功能障碍的影响,也不会被血液透析所移除。 ③对于轻中度肝功能不全患者(Child Pugh分级A和B级),无需调整替加环素剂量;对于重度肝功能损害者(Child Pugh分级C级),剂量应调整为首剂100 mg,然后每12小时25 mg。 三、替加环素的应用时机是什么? 根据2016年版美国感染病学会(IDSA)与ATS联合制定的医院获得性肺炎(HAP)诊断与治疗指南,明确反对使用替加环素治疗由不动杆菌属引起的HAP。尽管证据有限(低质量证据),但强烈推荐不使用替加环素治疗这种情况。 通常情况下,病原菌的耐药性与感染场所有关。相对于社区获得性肺炎(CAP),HAP/VAP中分离到的病原菌往往耐药性更强。因此,替加环素的用法和用量不能有效抑制HAP/VAP中常见的耐药革兰氏阴性菌,所以只批准用于CAP。 临床试验显示,接受替加环素治疗的VAP患者死亡风险增加程度最高。 2010年,FDA在药品安全性通告中指出,13项III期和IV期试验的联合分析或荟萃分析结果显示,与接受其他抗菌药物治疗的患者相比,接受替加环素治疗的患者死亡风险增加,其中接受替加环素治疗的VAP患者的风险增加程度最高。 随后,FDA在替加环素注射剂说明书中增加了黑框警告,提示死亡风险增加,建议医疗卫生专业人员在不能使用其他治疗的情况下使用替加环素。说明书还明确指出替加环素不适用于治疗糖尿病足感染以及包括VAP在内的HAP。 然而,我国的情况与美国有所不同:(1) HAP致病原以非发酵菌为主(美国MRSA常是首位),其中鲍曼不动杆菌最常见;(2) 我国鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药比美国严重的多;(3) 在治疗不动杆菌等多药耐药革兰阴性杆菌严重感染时,我们提倡联合用药,包括替加环素、多黏菌素及碳青霉烯类等均可作为基础药物,尽量减少单用其中某一种药物。 综上所述,治疗HAP或VAP时,可以增加替加环素剂量,维持剂量可达100 mg q12 h;治疗碳青霉烯类耐药肠杆菌(CRE)、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)引起的重症感染时,可以考虑剂量加倍。由于替加环素的临床疗效与MIC值有关,而AUC随剂量呈线性增加,因此可以采取增加剂量的方式。当应用替加环素治疗HAP时(MIC>1 mg/L),推荐首剂200 mg,然后100 mg,1次/12 h。
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