甲状腺滤泡的发育及脱碘酶基因的表达特性? DIO2脱碘酶2抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合DIO2脱碘酶2,并广泛应用于免疫组化、ELISA等实验。DIO2是一种编码蛋白质的基因,与Graves病和甲状腺疾病综合症等疾病有关。该基因参与代谢和胺衍生激素等途径,并具有氧化还原酶活性和抗氧化剂活性。DIO3是DIO2的重要同源物。 甲状腺是脊椎动物体内重要的内分泌腺,通过分泌甲状腺激素(T3、T4)来调节氮平衡、脂降解等代谢过程,对生长、发育和变态过程起着重要作用。甲状腺滤泡是甲状腺的基本功能单位,甲状腺激素的合成需要滤泡中的胶质提供。滤泡中胶质的变化可用于评估无尾两栖类发育和变态过程中甲状腺合成甲状腺激素的功能。 甲状腺激素的活化和失活过程由脱碘酶催化实现。D2通过外环脱碘过程(ORD)将T4活化为T3;D3具有内环脱碘作用(IRD),使T3和T4降解失活;D1同时具有内环和外环脱碘能力。在无尾两栖类变态发育过程中,D2和D3在启动组织重构和调控细胞应答方面发挥重要作用。 中华大蟾蜍胚胎发育中脱碘酶基因DIO2、DIO3表达特性的研究 本研究以中华大蟾蜍蝌蚪为研究对象,采用组织学方法研究甲状腺的出现及其功能时期。通过整体原位杂交和石蜡切片原位杂交技术,检测了不同发育时期中华大蟾蜍胚胎中D2基因(DIO2)和D3基因(DIO3)的mRNA表达差异。同时,采用RT-PCR和Real-time PCR方法,对不同发育时期中华大蟾蜍样本中DIO2mRNA和DIO3mRNA水平进行相对定量研究。 研究结果如下:1. G38期中华蟾蜍蝌蚪甲状腺的解剖学观察显示,甲状腺位于心脏的背侧,关联骨Ⅱ的腹后侧,腮下骨板的腹侧前端,介于两条颏舌骨肌之间,左右各一个。甲状腺中有若干透明的甲状腺滤泡聚集,滤泡上皮细胞包绕形成透明的甲状腺滤泡腔。 2. G25期中华大蟾蜍样本体内未观察到甲状腺。G28期中华大蟾蜍蝌蚪已经形成甲状腺,但甲状腺较小,滤泡数目少且无胶质。G33期中华大蟾蜍蝌蚪的滤泡数目增加,可见立方形的甲状腺滤泡细胞,滤泡腔中具有胶质并均一。这意味着中华大蟾蜍的甲状腺最早出现在变态前期,而在临近变态期时具有合成甲状腺激素的功能。 参考文献 [1] Duarte-guterman, Paula, Ryan, Michael J, Hogan, Natacha S, Trudeau, Vance L. Developmental Profiles and Thyroid Hormone Regulation of Brain Transcripts in Frogs: A Species Comparison with Emphasis on Physalaemuspustulosus. EN. 2012(2). [2] R. Opitz, W. Kloas. Developmental regulation of gene expression in the thyroid gland of Xenopus laevis tadpoles. General and Comparative Endocrinology. 2010(2). [3] Paula Duarte-Guterman, Vance L. Trudeau. Transcript profiles and triiodothyronine regulation of sex steroid- and thyroid hormone-related genes in the gonad-mesonephros complex of Silurana tropicalis. Molecular and Cellular Endocrinology. 2010(1). [4] Paula Duarte-Guterman, Valérie S. Langlois, Bruce D. Pauli, Vance L. Trudeau. Expression and T3 regulation of thyroid hormone- and sex steroid-related genes during Silurana (Xenopus) tropicalis early development. General and Comparative Endocrinology. 2009(2). [5] 刘静. 中华大蟾蜍胚胎发育中脱碘酶基因DIO2、DIO3表达特性的研究[D]. 陕西师范大学, 2013.查看更多
抗体的特性和应用? 抗体是一类多克隆抗体,可以特异性结合A型流感病毒-NS1(神经氨酸酶1)。抗体通过与抗原结合,清除侵入机体的微生物和寄生虫等异物。抗体是一种应答抗原产生的蛋白质,与特定的抗原决定基结合。抗体的结合可以使抗原失活,但有时也可能对机体造成病理性损害。抗体的组成非常复杂,由成千上万种免疫球蛋白(Ig)分子组成,它们在形状、大小、结构和氨基酸的组成和排列上有差别。抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位,因此具有特异性。抗体本身也是一种蛋白质,对异种动物来说,它又是抗原。不同亚型流感病毒NS1与神经元突触后密度蛋白PSD-95之间的相互作用及其对神经元NO的影响已经得到研究。 抗体的应用 抗体的应用包括研究不同亚型流感病毒NS1与PSD-95的相互作用以及对神经元NO的影响。A型流感病毒Non-structrual protein 1(NS1)与宿主细胞内的蛋白相互作用,表现为对宿主的免疫抑制作用,并影响信号转导和蛋白质合成。PSD-95作为神经元细胞鹰架蛋白,在神经元细胞离子平衡、信号转导和N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR)聚集等方面发挥重要作用。通过基因克隆技术、GST-pull down、酵母双杂交、免疫共沉淀和免疫荧光定位等技术,可以确定不同亚型流感病毒NS1蛋白与PSD-95之间的相互作用,并通过测定nitric oxide(NO)含量变化来证实其对神经元细胞功能的影响。 参考文献 [1] Benjamin G.Hale, Wendy S.Barclay, Richard E.Randall, Rupert J.Russell. Structure of an avian influenza A virus NS1 protein effector domain. Virology. 2008(1). [2] A.Falchi, C.Arena, L.Andreoletti, J.Jacques, N.Leveque, T.Blanchon, B.Lina, C.Turbelin, Y.Dorléans, A.Flahault, J.P.Amoros, G.Spadoni, F.Agostini, L.Varesi. Dual infections by influenza A/H3N2 and B viruses and by influenza A/H3N2 and A/H1N1 viruses during winter 2007, Corsica Island, France. Journal of Clinical Virology. 2007(2). [3] J.Gooskens, T.Kuiken, E.C.Claas, H.I.Harinck, J.C.Thijssen, H.J.Baelde, A.C.Kroes. Severe influenza resembling hemorrhagic shock and encephalopathy syndrome. Journal of Clinical Virology. 2007(2). [4] Ji-Young Min, Shoudong Li, Ganes C.Sen, Robert M.Krug. A site on the influenza A virus NS1 protein mediates both inhibition of PKR activation and temporal regulation of viral RNA synthesis. Virology. 2007(1). [5] 张衡. 不同亚型流感病毒NS1与PSD-95相互作用及对神经元NO的影响. 汕头大学, 2011. 查看更多