为什么TAK-659 hydrochloride是一种有效的脾脏酪氨酸激酶抑制剂? 一、TAK-659 hydrochloride的生物活性: 1)体外活性 TAK-659在广泛的激酶组中对SYK和FLT-3的选择性超过其他290种蛋白激酶。它能抑制原代CLL细胞和伯基特氏淋巴瘤细胞中的Syk活化和BCR信号传导。在原代CLL细胞中,TAK-659处理导致BCR刺激后SykTyr525,Btk,NFκB,ERK1 / 2和STAT3的磷酸化的剂量依赖性降低。TAK-659的抑制作用诱导CLL细胞凋亡并消除BCR和共培养衍生的存活信号。此外,TAK-659还能抑制原代CLL细胞中BMSC,CXCL12和CXCL13的趋化性,并消除微环境诱导的化学抗性。TAK-659对来自CLL患者的原代T细胞中TCR信号传导和T细胞活化的分子特征没有抑制作用。在细胞增殖测定中,TAK-659对SYK依赖性细胞系(OCI-LY10)显示抑制作用,而对粘附的原发性或实体肿瘤细胞系没有细胞毒性。在细胞活力测定中,TAK-659对FLT3-ITD依赖性细胞系MV4-11和MOLM-13敏感,而对WT FLT3 RS4-11(ALL细胞系)和RA1(Burkitt淋巴瘤细胞系)不敏感。在培养的人肿瘤细胞中,TAK-659有效抑制造血细胞系的生长。 2)体内活性 在FLT3依赖性MV4-11异种移植模型中,TAK-659在给药20天后显示肿瘤消退。初步血浆和尿液PK数据显示TAK-659被快速吸收,稳态暴露的变异性中等(DN-AUCtau为40-50%CV),平均峰值/谷值比为3.2-4.2,并且在15天QD给药后平均累积2.1-2.6倍。TAK-659在体内阻断抗IgD刺激小鼠外周B细胞中的CD86表达。 二、TAK-659 hydrochloride的实验方法: 1)细胞实验 使用可溶性四唑盐MTS测定细胞活力的抑制。将细胞接种在96孔组织培养板中,并在37℃/ 5%CO 2下孵育24小时,然后加入化合物或DMSO载体。在与化合物一起温育72或96小时后,通过使用Thermomax酶标仪测量孔的OD490nm来确定代谢活性细胞的MTS转化。 2)动物实验 动物模型:无胸腺裸鼠配方:0.5%羧甲基纤维素(CMC)剂量:10,30,60 mg / kg QD给药:口服强饲法。 综上所述: TAK-659是一种有效的选择性脾酪氨酸激酶(SYK)抑制剂,它对大多数其他激酶具有选择性,但对SYK和FLT3均有效。它的靶点活性为FLT3,4.6nM;JAK3,114nM;Syk,3.2nM;VEGFR2,135nM;ZAP70,75nM。 参考文献: [1]. Lam B, et al. Discovery of TAK-659 an orally available investigational inhibitor of Spleen Tyrosine Kinase (SYK). Bioorg Med Chem Lett. 2016 Dec 15;26(24):5947-5950. [2]. Purroy N, et al. Inhibition of BCR signaling using the Syk inhibitor TAK-659 prevents stroma-mediated signaling in chronic lymphocytic leukemia cells. Oncotarget. 2017 Jan 3;8(1):742-756. 查看更多