细胞色素B561的测定方法及应用? 细胞色素B561(CYTB561)ELISA KIT是一种应用双抗体夹心法测定标本中细胞色素B561水平的方法。该方法通过将纯化的细胞色素B561抗体包被在微孔板上,形成固相抗体。然后依次加入细胞色素B561和HRP标记的细胞色素B561抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅与样品中细胞色素B561的浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中细胞色素B561的浓度。 细胞色素是一类含有血红素分子的电子传递蛋白,参与了动、植物以及一些微生物的氧化还原反应。细胞色素通过其血红素辅基中铁原子的可逆变化,在细胞能量转移中起着重要作用。 细胞色素根据吸收的光的波长可分为多个类别,已经鉴定出了多种不同的细胞色素。其中,细胞色素B561属于b类细胞色素,其辅基为原血红素即铁-原卟啉Ⅸ。 细胞色素B561的应用 用于人CYP3A4与POR及cyt b5共表达条件的优化以及表达产物在药物相互作用研究 人细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP)是一类含有血红素分子的单加氧酶超家族,对物质代谢和环境致癌物的活化起着重要作用。其中,CYP3A4是人体内含量最丰富的CYP450酶,也是与药物代谢最相关的一类酶。CYP3A4代谢了大约50%的临床药物,具有广泛的代谢底物谱。细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450oxidoreductase,POR)是一个锚定在内质网膜上的重要黄素蛋白,能够将NADPH上的电子传递给CYP450,实现CYP450对底物的氧化功能。 参考文献 [1] High-throughput inhibition screening of major human cytochrome P450 enzymes using an in vitro cocktail and liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Testino SA Jr, Patonay G. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2003. [2] Evaluation of cytochrome P450 probe substrates commonly used by the pharmaceutical industry to study in vitro drug interactions. Yuan R, Madani S, Wei XX, Reynolds K, Huang SM. Drug Metabolism and Disposition. 2002. [3] The conduct of in vitro and in vivo drug-drug interaction studies: a Pharmaceutical Research and Manufacturers of America (PhRMA) perspective. Bjornsson TD, Callaghan JT, Einolf HJ, et al. Drug Metabolism and Disposition. 2003. [4] Cytochrome P-450 3A4: regulation and role in drug metabolism. Guengerich FP. Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 1999. [5] 谢章明. 人CYP3A4与POR及cyt b_5共表达条件的优化以及表达产物在药物相互作用研究中的应用[D]. 浙江大学, 2013. 查看更多