什么是Anti-c-Myc tag抗体(HRP)? Anti-c-Myc tag抗体(HRP)是一种多克隆抗体，可以特异性结合c-Myc tag。它主要用于多种免疫学实验，如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。 它的检测原理是通过双抗体夹心法来测定标本中c-Myc tag的水平。首先，将纯化的c-Myc tag抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，依次加入c-Myc tag和HRP标记的c-Myc tag抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中c-Myc tag的含量，可以通过酶标仪测定吸光度来计算c-Myc tag的浓度。 除了Anti-c-Myc tag抗体(HRP)，还有其他标签蛋白抗体，如MyC、His、GST、HA等。这些标签抗体经过亲和纯化，可以用于检测标签序列在商品化表达载体上的表达含量和功能。标签抗体在基因蛋白表达、信号转导和基因功能研究中是常用的工具。 c-MycTag多肽是一种合成的多肽，它的氨基酸序列相当于人c-Myc蛋白C-末端的410-419序列。c-Myc Tag多肽可以与anti-c-Myc抗体竞争性结合，是一种温和的试剂，可用于洗脱与anti-Myc单抗结合的Myc-tag融合蛋白。 Anti-c-Myc tag抗体(HRP)的应用 用于周期蛋白G2结合蛋白的筛选及初步功能研究 周期蛋白G2是由CCNG2基因编码的蛋白，它在细胞中主要分布于细胞质。周期蛋白G2的表达水平随细胞周期波动，在晚S期最高，在G2/M期开始降低。 研究发现，周期蛋白G2的瞬时表达可以导致细胞在G1期停滞，这与周期蛋白G2-蛋白磷酸酶2A复合物的作用有关。 通过构建周期蛋白G2与GAL4-BD的融合蛋白表达载体，应用MATCHMAKER GAL4 Two-Hybrid System 3，可以筛选与周期蛋白G2结合的蛋白。研究发现，PPP2R5B是已知与周期蛋白G2结合的PP2A的B56β亚基。 此外，还发现了其他与周期蛋白G2结合的蛋白，如DAPPER1、BPY2IP1和Clorfl87。 为了验证这些蛋白与周期蛋白G2的结合，可以构建真核表达载体，并通过Western Blot检测它们与周期蛋白G2的结合。 参考文献 [1] Kamibayashi, C., Serrano, M., Prives, C., Mumby, M. C., & Beach, D. (1996). p53-dependent association between cyclin G and the B'subunit of protein phosphatase 2A. Molecular and Cellular Biology. [2] Craig, E. A. (1996). Genomic libraries and a host strain designed for highly efficient two-hybrid selection in yeast. Genetics. [3] Burgess, W. H., Miki, T., Bottaro, D. P., Kraus, M. H., & Aaronson, S. A. (1999). Isolation and biochemical characterization of the human Dkk-1 homologue, a novel inhibitor of mammalian Wnt signaling. Journal of Biological Chemistry. [4] Zolnierowicz, S., & Hemmings, B. A. (1999). Regulation of protein kinase cascades by protein phosphatase 2A. Trends in Biochemical Sciences. [5] 于敏. 周期蛋白G2结合蛋白的筛选及初步功能研究[D]. 中国协和医科大学, 2005.查看更多
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