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他的提问 2261
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交流阻抗谱高频、中频、低频具体是什么范围?
一般讨论的高频,中频和低频是相对概念,包含未补偿溶液电阻的部分称为高频,描述电荷转移,极化电阻等部分称为中频,而扩散部分为低频。
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化学学科
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过柱子两个点离得很远,为什么一起出来?
干法上样,柱子尽量装高一点,试管不要接太多 小极性产物有些会遇到这种情况,除了柱子装高点,试管换勤点也没什么特别好的办法,如果只要小量那就刮板吧
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化学学科
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工艺技术
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瑞福马斯基反应?
有可能会,如果溶剂亲核的话肯定会有副反应
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化学学科
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构型转换?
构型消旋化的因素很多,比如温度、酸碱等,直接构型翻转应该是浓缩过程发生了反应,比如SN2.
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生物医学工程
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如何解决免疫荧光细胞核非特异性染色?
这个问题可能有几个方面的考虑。1. 如果仅仅是用一抗进行标记的,那么一抗特异性不高,形成高背景染色结果,是一种可能;如果是用二抗标记,那么一抗使用可能过量,而且洗涤不佳,二抗特许性下降,等原因都需要考虑。2. 目标蛋白的表达量较高,大量堆积在细胞质中,核糖体周围。由于细胞不是个平面,因此所看见的图像,如果不用confocal,图像看起来就像是堆积在细胞中央,貌似分布在细胞核中。如果你有volocity 软件,可以转换成3D模式分析,避免由于影像重叠导致判读错误
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#免疫荧光
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化学学科
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细胞及分子
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多糖的NMR法,采用内标还是外标,该如何选择?
内标和外标都是为了确定你打出的谱的化学位移的零点。常用的是内标法,多以TMS为内标物,因为TMS的沸点低易除去,结构稳定不宜分解,一般不和样品反应,且只有一种化学位移的H。选用不同的内标物相互换算,只要换算将内标物的化学位移差值即可。外标法我不是很了解。不过我接触到的做药化的人做谱都用内标法,选择TMS为内标物。一般内标物不会影响结谱,只要你进行正确的换算即可。
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生物医学工程
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磷酸化的AKt和PI3K的一抗,用何种方法测该通路激酶的活性更好?
该通路的激活剂我试着用过HGF,应该可以。
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生物医学工程
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Aβ25-35处理PC12细胞异常的原因?
细胞形态改变不一定意味着细胞死亡,而MTT或CCK-8检测的是活细胞,所以肉眼观察的结果与试剂检测的结果不相符是可以理解的。另外CCK-8检测条件较多,不一定符合本实验的要求。如果MTT检测的结果是各浓度损伤程度相似,建议你将Aβ25-35 的稀释浓度加大。
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生物医学工程
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WB中孵育抗体在什么东西里面进行?
用培养皿的效果要好一些,抗体稀释倍数都很大,而且可以重复利用,比起一次次失败也不算浪费
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生物医学工程
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如何做jurkat细胞转染mimic inhibitor和siRNA问题?
先做常规转染 效率没有传说的很低
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生物医学工程
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工艺技术
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丙烯酰氯的合成方法产率不高?
用亚硫酰氯可能不是一个好的办法,有文献讲有葵二酰氯合成,产率85%,但是葵二酰氯比较贵,如果是合成丙烯酸胺,一定要从丙烯酰氯为中间体的话,建议用草酰氯取代葵二酰氯合成.愿你好运
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化药
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液相如果出现拖尾峰,是什么原因引起的?
告诉你一个偷懒的办法,找个封端的色谱柱一般也可以得到较好的峰型,还有一些其他的原因会出现脱维峰,如:溶剂、杂质、柱过载、色谱柱损坏等。
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生物医学工程
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工艺技术
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是酰氯化合物不稳定不适合点板还是这个反应本身有问题?
酰氯的极性和醇差不多,点板不容易分辨,取点反应液加入甲醇,发现有极性大的点生成就是了~
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生物医学工程
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工艺技术
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有谁做suzuki反应吗?苯硼酸的偶连怎么控制?
Cs2CO3作碱 DME溶剂 配体很关键 温度要试
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化药
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文献有提到用离子色谱检测三氟甲烷磺酸根的方法,但未提及样品的处理方法?
极易溶于水,融水释放出大量的热,水解生成三氟甲烷(CHF3)和硫酸。可采用顶空气相分析。 常量的可以在FID上检测,微量的可以用ECD检测。
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生物医学工程
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工艺技术
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什么条件下能使N-去甲基西地那非,西地那非N-氧化物这两个杂质与西地那非有较好的基线分离?
查了sildenafil的EP色谱条件,其缓冲盐pH6.5,而sildenafil的pka为7.27和5.97,所以药典流动相的pH明显不合适,应该选择8以上的pH值比较合适。
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生物医学工程
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动植物
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直接用基因组DNA来扩CDS全长在斑马鱼胚胎做过表达可以吗?
应该要用cDNA吧,不然你连上载体再体外转录,把本来会剪切的内含子部分都转录出来了
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化学学科
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工艺技术
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求助苄胺和OTs的单烷基化反应。一直做不出来?
把那个对甲苯磺酸酯改成三氟甲磺酸酯,活泼性就会高很多哈
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生物医学工程
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超表达和干扰后通路检测不一致怎么办?
传代操作和消化时间的影响,毕竟属于常见细胞,就不建议你拯救了,直接重头再来吧
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生物医学工程
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如何快速而又准确的提取神经细胞蛋白?
1. 我们也遇到过类似问题,但经过检测,我们发现培养基上清漂浮的细胞确实就是晚期凋亡或坏死细胞,这一部分细胞里面的凋亡相关蛋白,包括磷酸化蛋白,是明显改变的;2. 我们是这么提取的,首先把上清培养基(含有漂浮的凋亡或坏死细胞)吸入离心管,然后1000 rpm在低温下快速离心5min左右,但是这样仍只能收集到相当少的细胞,因为离心过程中很多坏死细胞直接碎裂了,但是有些会出现沉淀,沉淀的细胞直接加入少量RIPA裂解液直接裂解提取蛋白(冰上,参考下面);3. 剩下的贴壁细胞则经冰PBS洗涤2遍后,添加RIPA全细胞裂解液,使用细胞刮将其刮下(这也在冰上低温操作,且裂解液中加入包括磷酸酶抑制剂等在内的cocktail等),这样再将两者混合,再去跑western blot问题就不大;4. 我们还试过western blot发现,上清里面的细胞的磷酸化的蛋白活化程度明显没有贴壁的高,呵呵,不过可能与细胞类型有关,不好说。希望对你有帮助。
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简介
职业:连云港万泰医药材料有限公司 - 销售
学校:烟台汽车工程职业学院 - 机械制造与自动化
地区:海南省
个人简介:
真正的友谊无论从正反看都应一样,不可能从前面看是蔷薇而从后面看是刺。
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