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体温与鹿

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生物医学工程

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工艺技术

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请问大家固相多肽合成中，用茚三酮如何判断脱保护完全? 这个不是很好回答，要分树脂和氨基酸的。脱保护完全颜色都很深的。同时还需要看你脱保护的工艺如何，才能判断你的工艺是否能判断脱保护的效果。查看更多

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化学学科

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工艺技术

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叔丁醇钾反应怎么样才能让他不水解呢? 这个反应我做过，收率很低，没去找原因就放弃了。用那个剧毒的东西才有成本优势，这个路线不行查看更多

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生物医学工程

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讨论一下提高干细胞制备工艺的方案？工艺的话涉及很多方面，制备环境、设备情况、人员等，试剂、耗材等以及编写的操作流程都是影响工艺的，从人、机、料、法、环这几方面综合考量之后，进行工艺优化会事半功倍查看更多

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TC4钛合金中α和 β相谁更硬? Beta相更硬。查看更多

#钛合金

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生物医学工程

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clustalx2为什么不能导入序列? 要把fasta格式的文件放在安装目录下的DATA文件夹或者安装目录下也可以查看更多

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仪器设备

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污水泵为什么一般都选挠性联轴器呢? 不仅是污水泵，其他很多非直联泵应使用挠性联轴器，以减少泵与驱动机之间的作用力，应为泵与驱动机之间没有相对位置的准确定位，所以挠性联轴器可以补偿这误差查看更多

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化学学科

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工艺技术

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调ＰＨ后没有文献上说的沉淀出来，不知道是为什么？ 丙酮、碳酸钾体系可以做，产物应是单、双及原料的混合物。查看更多

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化学学科

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请问各位用什么方法使2，5-二甲基苯酚全部成钠盐? 用氢化钠为最佳,先将稍为过量的氢化钠投入反应瓶,用石油醚洗涤两三次,除去石蜡,然后加THF,再滴加2，5-二甲基苯酚的THF溶液,反应物可能呈浆糊状,旋干THF就可以得到产物，如果不想分离出来直接往下反应,可以用DMF,DMSO替代THF,这样得到的是均相溶液,更加方便查看更多

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生物医学工程

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持力层不同，基础应该怎么选取? 1～3层，常规建筑，荷载不大，若条基就是16～50kPa，不存在其它问题，完全可以不同埋深的独立条基，埋深不同的地方作隔离缝（兼作沉降缝）。查看更多

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方形锂电池每一个电池单元荷电容量设置问题？ 1 是并联关系，单元容量是110 2 楼主说的卷绕和叠片的对比，还是方形铝壳和软包电池的对比，不论怎样都是有区别的，还有较大的区别，查看更多

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仪器设备

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机封前面有一道辅助密封吗? 防止泵内介质中杂质颗粒进入到密封腔内，并能够与轴套之间形成小间隙，形成相对独立的密封腔，便于密封腔的压力，循环量等参数的控制查看更多

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生物医学工程

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细胞及分子

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4119螺旋桨敞水性能分析过程，为什么最后推力会太大? 如果只是定常计算的话，没必要弄完整的计算域的，只需要取三分之一就可以了。然后设置periodic B.C.即可。如果整个计算域都有，而网格数量只有60多万的话，网格肯定少了，数量不够。另外，建议速度入口边界条件湍流项用intensity and viscocity ratio，均取2，或差不多的数值亦可。最外面的圆柱面也是速度入口，和前面的那个平面速度入口是一样的。第三个最重要的是，桨叶面设置为stationary wall ，不要设定为moving wall。其它的就没有什么了，设置基本是合适的。查看更多

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化学学科

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请问各位哪里有卖离子液体的？ 上海成捷或中科院兰化所我从上海成捷买过，淘宝的。现在有没有这样的成熟的购买渠道？查看更多

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生物医学工程

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微生物

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质粒转染和病毒转染有什么本质上的区别? 慢病毒包装转染，应该是整合到基因组的。稳定表达。而质粒，培养几代后，可能就丢失了。并且有时候会发生耐受。这个就是本质区别。质粒毕竟是外来物。放在细菌里还好，放在细胞里，不稳定的。查看更多

#质粒转染

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生物医学工程

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工艺技术

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如何用重结晶的方法分离酸和酯? 如没有降解的话，估计溶解后过滤再析晶效果会比较好，苯甲酸在乙酸乙酯里溶解度应该没有其酯大吧。查看更多

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生物医学工程

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含四氢呋喃流动相出峰时间不稳定，为什么? 之前我们也做过这个项目，就是流动相没混合好造成的，可能使他们的物理性质差太多，不宜混匀，好好混混就好啦。查看更多

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生物医学工程

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MOS管的驱动波形振荡比较厉害，峰峰值可达到4V，且驱动波形成尖峰状，不是正常的矩形波，什么问题造成？ 可能有干扰或者驱动能力不足。查看更多

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生物医学工程

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工业上含水ＤＭＦ怎么处理最好? 用分子筛脱水，并且分子筛还可以循环使用。查看更多

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生物医学工程

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工业上含水ＤＭＦ怎么处理最好? 减压精馏效果是最好的，不过最好是先用元明粉脱水过滤。水分可以到1%以下。查看更多

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生物医学工程

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做了mating，已经做到了，可是对比发现重复变蓝的只有11个是怎么回事? 1. 个人认为在做酵母双杂交时，目标要明确，紧盯最后的测序结果，这是你的最终目的。所以实验在做熟后，不要在某一步停留耽误时间，双杂只是整体实验方案中的第一步，找到兴趣基因后，后续的一系列验证实验才是关键。 2. 在你的实验中，先关注那11个克隆。菌落PCR的条带大小相同，不见得就是一个东西；可以把PCR产物进行酶切，看是否酶切后的条带也相同。然后把不同的克隆拿去测序看看（其实都拿去测序也不是不可，就看实验室能否承受了，毕竟测序的钱在整个实验中的比例不算大），看测出的序列是否为基因的编码序列及读码框在AD载体上是否正确（这两点都很重要）。如果有比较好的结果就马上着手进行后面的实验了（pull-down、co-IP等）。 3. 至于其他的候选结果可以慢慢验证。首先你的X-gal assay的结果其实不能说明问题，毕竟是两次非平行操作，有误差是正常的，只是你的误差确实大了点；在我的实验中反倒是通过X-gal能排除的克隆并不多，大概80-90%都变蓝；建议PCR、酶切分组后，选一些先去测序。再次共转化涂QSD平板是对的，同时做单转化AD涂QSD也是需要的（验证AD的自激活，不过基本上AD自激活的情况不多）；找到兴趣候选蛋白后互换载体共转化验证也可以（即AD-bait、BD-prey，共转化涂QSD平板及X-gal assay；当然是在时间允许的情况下可以选择做这步，但要是克隆做的不熟就算了，费时间）。基本上在酵母中的验证实验就这些了，如果有好的结果就先恭喜一下了。 4. 还有几点对于后面实验的小提示。首先筛到得基因很可能不是基因全长，如果序列包含该基因的重要结构域，可先不着急拿到基因全长，继续进行后续实验即可。同一基因在众多候选克隆中出现的次数越多，则可能性越大。找到兴趣蛋白后，体内体外的验证实验（在实验室系统成熟的情况下）应该比较顺利才对，侧面反映二者互作的可能性很大。构建载体时可添加tag，使用标签抗体便于节省时间和经费，得到较好结果后，再扩增基因全长、购买抗体（当然经费允许则另当别论）。总而言之实验要同时开展，边找边做，找到一两个并能做出结果就相当好了；可能叙述过程中有不妥或错误的地方，还请见谅，祝实验顺利。查看更多

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简介

职业：山东新升实业发展有限责任公司有限公司 - 销售

学校：厦门大学 - 生物化学与生物技术系

地区：安徽省

个人简介：真诚才是人生最高的美德。查看更多

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