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中华人民共和国农业行业标准 光 合 细 菌 菌 剂? 中华人民共和国农业行业标准   光 合 细 菌 菌 剂 NY 527-2002 Inoculant of Photosynthetic bacteria   2002-08-27 发布 2002-12-01实施 中华人民共和国农业部 发 布 前 言 本标准的附录 A 、 B 是规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。 本标准由中华人民共和国农业部批准。 本标准由农业部 微生物肥料 质量监督检验测试中心负责起草。 本标准主要起草人:姜昕 曹凤明 樊蕙 李力 韩永锋 饶汉东   光合细菌菌剂 1  范围 本标准规定了光合细菌制剂的分类、技术要求、检验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存。 本标准适用于以紫色非硫细菌( Purple Nonsulfur Bacteria )中所属的一种或多种光合细菌为菌种,采用有机、无机原料,经发酵培养而成的光合细菌活菌制品。 2  规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB 4789.3 食品微生物学检验 大肠菌群测定 GB 7959 粪便无害化卫生标准 GB/T 14539.1 复混肥料中砷、镉、铅的测定 GB/T 14539.2 复混肥料中砷的测定方法 GB/T 14539.3 复混肥料中镉的测定方法 GB/T 14539.4 复混肥料中铅的测定方法 GB/T 15555.1 固体废物 总铬的测定 二苯碳酰二肼分光光度法 GB/T 15555.5 固体废物 总汞的测定 冷原子吸收分光光度法 NY 227 微生物肥料 NY 411 固氮菌肥料 NY 413 硅酸盐细菌肥料 3  产品分类 3 . 1  液体菌剂:以有机、无机原料培养液接种光合细菌, 3 . 2  经发酵培养而 3 . 3  成的光合细菌菌液。 3 . 4  固体菌剂:由某种固体物质作为载体吸附光合细菌菌液而 3 . 5  成。 4  要求 4.1  菌种 生产光合细菌菌剂所使用的菌种,都必须经过农业部认定的国家级科研单位的鉴定,包括菌种属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据、活性、安全性等完整资料。以杜绝一切植物检疫对象、传染病病原作为菌种生产的产品。 4.2  产品指4.3 标4.4  4 . 4 . 1  产品技术指 4 . 4 . 2  标 4 . 4 . 3  见表1。 表1 光合细菌菌剂技术指标 项目 剂 型 液 体 粉 剂 颗 粒 外观、气味 紫红色、褐红色、暗红色、棕红色、棕黄色等液体,略有沉淀、略具清淡的腥味 粉末状、略具清淡的腥味 颗粒状、略具清淡的腥味 pH 值 6.0 ~ 8.5 6.0 ~ 8.5 6.0 ~ 8.5 水分,% — 20.0~35.0 5.0~15.0 细度筛余物,% 孔径0.18mm 孔径1.00mm ~ 4.75mm —   — ≤20.0   — —   ≤20.0 有效活菌数,个/mL (个/g) ≥ 5.0 ×108 2.0 ×108 1.0 ×108 杂菌率,% ≤ 10.0 15.0 20.0 霉菌杂菌 106/g(mL) ≤ 3.0 3.0 3.0 有效期 不得低于6个月 不得低于6个月 不得低于6个月 蛔虫卵死亡率(%) ≥ 95 粪大肠菌群 个/g(mL) ≤ 100 注:有效期仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时才检验  4.4.4 五种重金属限量指4.4.5 标4.4.6 见表2 。 表2 五种重金属限量指标 参数   标准极限 汞及化合物(以 Hg 计) mg/kg ≤ 5 镉及化合物(以 Cd 计) mg/kg ≤ 10 铬及化合物(以 Cr 计) mg/kg ≤ 150 砷及化合物(以 As 计) mg/kg ≤ 75 铅及化合物(以 Pb 计) mg/kg ≤ 100 注:液体菌剂可免作重金属检测   5  抽样 5 . 1  按每一发酵罐菌液制成的产品为一批, 5 . 2  采用随机方法对某一批次或不同 5 . 3  批次产品进行抽样检验。抽样过程严格避免杂菌污染。 5 . 4   抽样工具及用品 抽样前预先准备好无菌塑料袋(或塑料瓶)、金属勺(或量筒)以及剪刀、封口机、封样袋、胶水、抽样封条等。 5.5  抽样方法及抽样数量 在成品库抽样,小包装(2kg/袋或2000mL/瓶以下)产品以一个包装箱为一件,在同一批次的产品中随机抽取3件,每件中抽取1袋(或1瓶)。大包装(2kg/袋或2000mL/桶以上)产品一袋/桶为一件,在同一批次产品中随机抽取3件,从每件中取样1000g(mL),并将所取样品混匀,然后装取3袋(瓶),每袋不少于500g或每瓶不少于500mL。将抽取的同一批次的3份样品分别装入封样袋,贴上抽样封条。一份留被抽样单位,二份交抽样单位。 6  检测方法 6.1  仪器设备6.2 及试剂 6.2.1  仪器设备6.2.2  烧杯; 酸度计; 电子天平; 土壤铝盒; 恒温干燥箱 ; 干燥器; 试验筛:孔径0.18mm、1.0mm和4.5mm; 无菌室或洁净工作台; 酒精灯; 蒸汽消毒器; 显微镜; 光照培养箱; 摇床; 恒温培养箱 ; 玻璃仪器:灭菌的螺口试管、1mL、5mL、10mL移液管、三角瓶、平皿、刮刀。 6.2.3  试剂 无离子水、蒸馏水、无菌水; 培养基(遵照附录A的规定)。 6.3  外观及气味检验: 液体样品装在小烧杯中,固体样品装在白色搪瓷盘中,在明亮光线下进行感官检验。 6.4  pH值测定: 应符合NY413中7.2.3的规定。 6.5  水分测定: 应符合NY413中7.2.4的规定。 6.6  细度检验 应符合NY413中7.2.5的规定。 6.7  有效活菌数的测定 有效活菌数的测定遵照附录B的规定。 6.8  杂菌率的测定(好氧或兼性厌氧杂菌) 从用来测定有效活菌数且已经过10倍系列稀释的样品中,选取3个连续适宜稀释度进行杂菌率测定。平板测数法,按NY227-1994中5.2操作。 6.9  有效期的检验 在产品说明书中标明的有效期到达前三周,按4.2.1所列项目对产品进行检验。 6.10  粪大肠菌群值的测定 应符合GB4789.3的规定。 6.11 蛔虫卵死亡率测定。 应符合GB 7959 的规定。 6.12 五种重金属测定 6.12.1 砷含量测定 应符合GB/T 14539.2的规定。 6.12.2 镉含量测定 应符合GB/T 14539.3的规定。 6.12.3 铅含量测定 应符合B/T 14539.4的规定。 6.12.4 铬含量测定 应符合GB/T 15555.1的规定。 6.12.5 汞含量测定 应符合GB/T 15555.5的规定。 7  检验规则 本标准中产品质量指标合格判定,采用GB/T 1250中修约值比较法;数字修约按GB/T 8170进行。 7.1  检验分类 7.1.1  出厂检验(交收检验) 产品出厂时,须由生产厂的质量检验部门,按表4.2.1规定的技术指标进行检验,检验合格并签发质量合格证的产品,方可出厂。出厂检验时不检有效期。 7.1.2  型式检验(例行检验) 一般情况下,一个季度进行一次。有下列情况之一者,也需要进行型式检验。 a) 新产品鉴定; b) 产品的工艺、材料等有较大改变与变化; c) 出厂检验结果与上次型式检验有较大差异; d) 国家质量监督机构进行抽查或产品登记检验。 7.2  判定规则 7.2.1  合格产品: 具下列任何一条款者,均为合格产品。 a) 检验结果全部技术指标都符合标准要求的产品; b) 在产品的外观、pH值、水分、细度等非关键指标检测项目中,有二项(含)以下不符合技术指标,但其它指标符合标准要求。 c) 产品其有效活菌数符合技术指标,而杂菌率超过标准的规定,但小于标准规定的二倍时,在产品的外观、pH值、水分、细度等非关键指标检测项目中不超过一项不合格者。 7 . 2 . 2   不合格产品: 具下列任何一条款者,均为不合格产品。 a) 有效活菌数不符合技术指标; b) 杂菌率超过标准规定的二倍; c) 霉菌杂菌超过标准的规定; d) 粪大肠菌群指标不合格; e) 蛔虫卵死亡率指标不合格; f) 重金属中任一项超标; g) 产品的外观、pH值、水分、细度等次要检测项目中有三项不符合技术指标。 8  包装、标9 识、运输与贮存 应符合NY 411中9.1、9.2、9.3和9.4的规定。 附 录 A (规范性附录) 测定有效活菌数及杂菌率的培养基* 1 ) A.1 有效活菌数测定的培养基配方 溶液Ⅰ: 溶液Ⅱ: CaCl2 75 mg 酵母膏 2.0 g   KH2PO4 600 mg NaAC 1.6 g 硫胺素 40 mg   K2HPO43H2O 1.18 g 烟酸 40 mg MgCl2 200 mg   蒸馏水 200 mL NH4Cl 1.5 g EDTA-Fe 溶液 5 mL       生物素 40 mg 微量元素溶液 1 mL       蒸馏水 800 mL           将溶液Ⅰ、溶液Ⅱ分别于121℃(kg/cm2)高压灭菌15min,冷却后将溶液Ⅰ、溶液Ⅱ混匀。 微量元素溶液: EDTA-Fe溶液: EDTA-2Na 2.0 g FeSO47H2O 2.0 g   EDTA-2Na 20.0 g H3BO3 100 mg CoCl26H2O 100 mg   FeSO47H2O 20.0 g ZnCl2 100 mg MnCl24H2O 100 mg   蒸馏水 1000 mL Na2MoO42H2O 20 mg NiCl26H2O 20 mg       CuCl22H2O 10 mg Na2SeO3 1 mg       蒸馏水 1000 mL           A.2 有效活菌数测定的培养基配方 蛋白胨 3.0 g MgSO47H2O 0.5 g 蒸馏水 1000 mL 酵母膏 3.0 g CaCl2 0.3 g pH 6.8 A.3 有效活菌数测定的培养基配方 乙酸钠 1640 mg CaCl22H2O 75 mg 微量元素溶液 1 mL MgSO47H2O 200 mg EDTA 20 mg 无离子水 1000 mL K2HPO4 900 mg (NH4)2SO4 1320 mg pH 6.8 KH2PO4 600 mg FeSO47H2O 11.8 mg     微量元素溶液: H3BO3 280 mg Na2MoO42H2O 75 mg ZnSO47H2O 24 mg Cu(NO3)23H2O 4 mg MnSO44H2O 210 mg 无离子水 100 mL A.4 肉汤培养基(测好氧或兼性厌氧细菌杂菌): 牛肉膏 3.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 5.0 g 琼脂 18~20 g 蒸馏水 1000mL pH 7.0 ~ 7.2 A.5 马丁培养基(测霉菌数): KH2PO4 1.0 g MgSO47H2O 0.5 g 蒸馏水 1000 mL C6H12O6H2O 10.0 g 蛋白胨 5.0 g     1% 孟加拉红水溶液3.3 mL 琼脂 18 ~ 20 g     每1000 mL培养基中加入0.1 g氯霉素共同灭菌。 附 录 B (规范性附录) 有效活菌数的测定 B.1 有效活菌数的测定步骤(MPN5管法): B.1.1 用无菌移液管吸取待测样品10.0mL或称取固体样品10.0g,加入到带玻璃珠的装有90mL(固体需100mL)无菌水的三角瓶中,放置于摇床上充分振荡30min,摇床转速为200r/min,这样得到1:101稀释的菌悬液。 B.1.2 用无菌移液管吸取5.0mL上述菌悬液加入到装有45mL无菌水的三角瓶中,充分振荡摇匀,得到1:102稀释的菌悬液,依此方法制成1:103、1:104、1:105、1:106、1:107、1:108、1:109、1:1010……稀释的菌悬液。 B.1.3 用1mL无菌移液管分别吸取1:106、1:107、1:108、1:109、1:1010五个稀释度的菌悬液1mL(每个稀释度必须更换无菌移液管),加入到预先制备好的盛有9mL无菌培养基的螺口管中,每一稀释度重复接5支试管,接种后立即拧紧塑料帽并摇匀。每个待测样品要同时接种25支盛有培养基的螺口试管(5个稀释度,每一稀释度接种5支螺口试管)。 B.1.4 将以上已接种的螺口试管连同5支盛有无菌培养基的对照管置于光照培养箱内,连续光照培养,光强1000 ~ 3000lx ,并保持28℃ ~ 32 ℃,培养期间要经常转动螺口试管,以使光照均匀,培养10 ~ 12d 后,统计出现光合细菌生长的(培养液颜色应符合4.2.1)试管数。 B.2 有效活菌数的计算 根据出现光合细菌生长的阳性试管数,查表“MPN(最大可能数),log10MPN表”(表B1)即可计算出光合细菌的有效活菌数,以亿个/mL或亿个/g表示。 计算方法:利用以下公式计算原菌液的最大可能数。 1mL (g)样品中的菌数=菌数近似值×数量指标第一位数的稀释倍数 例如,某批菌剂测得的光合细菌的结果是,接种1:108稀释度的5支试管全部出现生长,接种1:109稀释度的5支试管中有2支试管为阳性,接种1:1010稀释度的5支试管全部为阴性,即检验结果为5-2-0,查表得知相当于第一稀释管1mL的最大可能数(MPN)为4.9,则该被测菌剂含菌数为4.9×108个/mL(g)。 当实际应用时,必须包含所有试管都生长的稀释倍数直到全部都不生长的稀释倍数,因此,要选择适宜的5个连续稀释倍数的稀释液进行接种。在这些稀释倍数中,如何求MPN值,可作如下处理: 在全部5支试管中均出现生长的稀释度中,把出现生长的稀释度倍数最高的那一级放入数列。例如:为5-5-3-0-0时,则取5-3-0数列。 在全部5支试管中均不出现生长的稀释度中,把稀释度倍数最低的那一级放入数列。例如:为5-3-0-0-0时,则取5-3-0数列。 如果应用上述两条规则,会出现采用如5-5-4-3-0这样的4个等级的稀释度的情况。此时,可先取前面的5-4-3数列,后取4-3-0数列,分别求出log10MPN,然后算出其真数的平均值。在此列中,数列5-4-3的log10MPN为1.447,数列4-3-0的log10MPN为0.431+1(后一数列与前一数列相应稀释了10倍,故要加1进行校正),(1.447+1.431)/2=1.439,所以MPN=2**。 若待测样品中光合细菌的含量较低,而1:106、1:107、1:108、1:109、1:1010五个稀释度的菌悬液不适宜测定,则可选则稀释倍数低的菌悬液接种测定。   表B.1 MPN,log10MPN表(10倍稀释,5支试管中各接种1毫升) 阳性试管数 MPN (相当于第一稀释管1mL) lgMPN 阳性试管数 MPN (相当于第一稀释管1mL) lgMPN 第一 稀释管 第二 稀释管 第三 稀释管 第一 稀释管 第二 稀释管 第三 稀释管 0 0 0 0 - 5 0 0 2.3 0.362 0 1 0 0.18 0.255-1 5 0 1 3.1 0.491 1 0 0 0.20 0.301-1 5 1 0 3.3 0.519 1 1 0 0.40 0.602-1 5 1 1 4.6 0.663 2 0 0 0.45 0.653-1 5 2 0 4.9 0.690 2 0 1 0.68 0.833-1 5 2 1 7.0 0.845 2 1 0 0.68 0.833-1 5 2 2 9.5 0.978 2 2 0 0.93 0.968-1 5 3 0 7.9 0.898 3 0 0 0.78 0.892-1 5 3 1 11.0 1.041 3 0 1 1.1 0.041 5 3 2 14.0 1.146 3 1 0 1.1 0.041 5 4 0 13.0 1.114 3 2 0 1.4 0.146 5 4 1 17.0 1.230 4 0 0 1.3 0.114 5 4 2 22.0 1.342 4 0 1 1.7 0.230 5 4 3 28.0 1.447 4 1 0 1.7 0.230 5 5 0 24.0 1.380 4 1 1 2.1 0.322 5 5 1 35.0 1.544 4 2 0 2.2 0.342 5 5 2 54.0 1.732 4 2 1 2.6 0.415 5 5 3 92.0 1.964 4 3 0 2.7 0.431 5 5 4 160.0 2.204 5 0 0 2.3 0.362 5 5 5 >180.0 >2.255   查看更多 0个回答 . 4人已关注
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技术资料:废水计算工艺? 一. 基本数据: 1. 日平均流量:Q=10000m3/d 2. 水质:项目 进 水 出 水 COD (mg/l) 280 60 BOD (mg/l) 140 20 SS (mg/l) 150 20 TN(mg/l) 45 20 NH4-N (mg/l) 35 15 TP (mg/l) 4 1 平均最低温(℃) 12 pH 7.7 3. 参数选取 3.1 运行参数生物池中活性污泥浓度: XVSS=1400mgMLVSS/l 挥发性组分比例: fVSS=0.7(一般0.7~0.8) 3.2 碳氧 化工艺污泥理论产泥系数: Y=0.6 mgVSS/mgBOD5 (范围0.4~0.8,一般取0.6) 20℃时污泥自身氧化系数: Kd(20)=0.06 1/d (范围0.04~0.075,一般取0.06) 3.3 硝化工艺参数硝化菌在15℃时的最大比生长速率: μm(15) =0.47 1/d (范围0.4~0.5,一般取0.47或0.45) 好氧池中溶解氧浓度:第 1 章 DO=2.0 mg/l NH4-N的饱和常数(T=Tmin=12℃): KN=10(0.051×T-1.158)=0.28 mg/l 硝化菌的理论产率系数: YN=0.15 mgVSS/mgNH4-N (范围0.04~0.29,一般取0.15) 20℃时硝化菌自身氧化系数: KdN(20)=0.04 1/d (范围0.03~0.06,一般取0.04) 安全系数: FS=2.5 (范围1.5~4,一般取2.5) 氧的饱和常数: KO=1.0 mg/l (范围0.25~2.46,一般取1.0) 二. 好氧池工艺设计计算 1. 参数修正 Kd (Tmin)=Kd(20)×1.05(Tmin-20)=0.041 1/d μm=μm(15)×e0.098(Tmin-15)×[1-0.833×(7.2-pH)]×[DO/(DO+KO)] =0.331 1/d KdN (Tmin)=KdN(20)×1.05(Tmin-20)=0.027 1/d 2.计算设计泥龄最大基质利用率: k’=μm/YN=2.21 mgBOD5/(mgVSS﹒d) 最小硝化泥龄: tcmin=1/(YN×k’-KdN)=3.29 d 设计泥龄: tc=Fs×tcmin=14.8 d 3. 污泥负荷硝化污泥负荷: Un=(1/tc+KdN)/YN=0.63 mgNH4-N/(mgVSS﹒d) 出水氨氮浓度: 由UN=k’×[Ne/(KN+Ne)] 得Ne=UN×KN/(k’-UN)=0.11mg/l 碳氧化污泥负荷: US=(1/tc+Kd)/Y=0.18 mgBOD5/(mgVSS﹒d) 4. 好氧池容积计算 BOD氧化要求水力停留时间: Tb=(So-Se)/ (US×XVSS)= 0.48d=11.43 h BOD5表观产率系数: Yobs=Y/(1+Kd×tc)=0.37 mgVSS/mgBOD5 硝化细菌在微生物中占的百分比:硝化的氨氮量Nd=TN-0.122Yobs(So-Se)-Ne-0.016 Yobs Kdtc(So-Se) =38.6mg/l 硝化菌百分比fn fn=Yn*Nd/ Yobs (So-Se) + Yn*Nd +0.016Yobs Kdtc(So-Se)=0.11 硝化水力停留时间Tn Tn = Nd / ( Un*XVSS *fn )= 0.38 d = 9.18 h Tb>Tn,取好氧池水力停留时间为Tb,即11.43h。生物池容积:V= Q*T/24 =47625 m¬¬¬¬3 5 排泥量计算污泥有机部分产量 W1 = Yobs * ( So - Se ) * Q / 1000 = 444 kg / d 污泥惰性部分产量 W2 = ηss * SSo * Q / 1000 =825 kg / d 总悬浮物TSS惰性组份比例ηss 取55% 污泥硝化部分产量 W3 = Yn * (NHo-NHe) * Q / 1000(1+tc*KdN) =21.43 kg / d 活性污泥总产量 W '=W1/fvss+W2+W3-SSe*Q/1000=1280.72 kg / d 污泥的综合产率 W ' / [(So - Se) * Q / 1000] =1.07kgDS/kgBOD查看更多 5个回答 . 3人已关注
杭氧压缩机温度? 杭氧的氧压机级间 换热器 由于堵塞严重,几级的进排气温度高,进65,出188度,出到190度喷氮停车。但为了维持生产,不能停车,两台冷却风扇已开,水池水正常更换,补充循环水,除了用喷淋水,通换热器 氮气 还有什么好方法,即八级压缩,四级换热查看更多 1个回答 . 5人已关注
Aspen生成再沸器psf文件时出错,文件为空? 我用Aspen生成 再沸器 的psf文件时,遇到下面情况就不再运行了,生成的psf文件是空的。请朋友们指点一下是怎么回事。 具体模拟过程在附件中。查看更多 0个回答 . 2人已关注
本人急需以下标准,先谢谢各位了.? HG/T20569-94 HG/T20677-90 HG/T20678-2000查看更多 3个回答 . 2人已关注
动设备管理分工界面划分? 求一份动设备管理分工界面划分的规定,万分感激 查看更多 1个回答 . 2人已关注
气象SIO2分离器赌赛? 气象法SIO2生产线上,从 酸洗塔 下来的A1 气液分离器 经常赌赛,赌赛物为SIO2和部分水蒸气,对此我们调小真空度(无用)请问哪位高手给小弟指点一下(一周左右就要停车检修一次)查看更多 0个回答 . 3人已关注
求助:financial means at applicants disposal翻译? 是出国的一个申请上出现的一句话,不知道什么意思和如何回答,请大家帮忙看看,谢谢。查看更多 7个回答 . 3人已关注
简介
职业:杭州双安科技有限公司 - 自控设计工程师
学校:福建教育学院 - 化生系
地区:江苏省
个人简介:手机对我来说是药品,可以有效缓解孤独,尴尬,无聊,没有安全感等症状。查看更多
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