人网钙蛋白1(RCN1)ELISA试剂盒的原理及应用? 背景 人网钙蛋白1(RCN1)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该试剂盒通过将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被捕获抗体的包被微孔中,并经过温育和洗涤步骤。 底物TMB被用于显色,经过过氧化物酶催化转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中的指标呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算样品的浓度。 ELISA反应示意图 ELISA的原理是将抗原或抗体固定在固相载体上,并使用酶标记的抗原或抗体。固相载体上的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,而酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 在测定时,受检标本与固相载体表面的抗原或抗体发生反应。通过洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分离。然后加入酶标记的抗原或抗体,它们也会通过反应结合在固相载体上。 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应底物后,底物被酶催化生成有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关。因此,可以根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接放大了免疫反应的结果,使得测定方法具有很高的敏感度。 应用 用于OA关键基因筛选及鹿茸的归经靶向治疗作用研究 通过模型对照组和鹿茸灌喂组的实验,成功分离出差异明显的蛋白质点,并筛选出上调表达和下调表达的蛋白质。质谱结果显示,鹿茸灌喂组上调表达了一些目标蛋白质,包括二氢嘧啶相关蛋白2(Dpysl2)、血清转铁蛋白(Tf)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpina3n)等。下调表达的蛋白质包括C型凝集素结构域家族蛋白(Clec3b)、钙网织蛋白(Calr)等。这些研究结果为鹿茸的归经靶向治疗作用提供了重要的参考。 参考文献 [1]TGF-βMediates Renal Fibrosis via the Smad3-Erbb4-IR Long Noncoding RNA Axis[J].Min Feng,Patrick Ming-Kuen Tang,Xiao-Ru Huang,Si-Fan Sun,Yong-Ke You,Jun Xiao,Lin-Li Lv,An-Ping Xu,Hui-Yao Lan.Molecular Therapy.2018(1) [2]The NF-κB–Responsive Long Noncoding RNA FIRRE Regulates Posttranscriptional Regulation of Inflammatory Gene Expression through Interacting with hnRNPU[J].Yajing Lu,Xu Liu,Minghong Xie,Mingjia Liu,Mengling Ye,Mingxuan Li,Xian-Ming Chen,Xiaoqing Li,Rui Zhou.The Journal of Immunology.2017(10) [3]Relationship between hormone replacement therapy and spinal osteoarthritis:a nationwide health survey analysis of the elderly Korean population[J].Jung-Ho Park,Jae-Young Hong,Kyungdo Han,Seung-Woo Han,Eun Mi Chun.BMJ Open.2017(11) [4]Sex-specific hip osteoarthritis-associated gait abnormalities:Alterations in dynamic hip abductor function differ in men and women[J].Kharma C.Foucher.Clinical Biomechanics.2017 [5]卢贺.OA关键基因筛选及鹿茸的归经靶向治疗作用研究[D].广州中医药大学,2018. 查看更多